为什么我转完膜后，膜上没有任何条带，连 marker 条带都没有？

看一下电极有没有弄反。

最大可能是膜反了导致电机错了 直接就没转上去，不妨染色看看有没有。仅供参考。

连marker都没有？ 1.考虑转膜液的问题，是否过期失效？是否加甲醇？是否在低温条件下进行转膜？ 2.考虑转膜装置的问题。黑面在下，依次是海绵垫，滤纸，凝胶，PVDF 膜（膜一定要和胶贴好，不要有气泡），滤纸，海绵垫。 3.转膜条件设置是否合理。我们实验室条件是 200mA，90min。供你参考。

marker 都没有？影响因素很多，不过最可能的是转过了，或者是胶和膜放反了。

WB 只要有蛋白就不会出太大问题。很可能是你的蛋白没有表达出来或者丰度极低。

1.膜和胶可能放反了。 2.你用的 marker 是预染的还是非预染的？如果是非预染的话转膜完是看不见marker的，只有在考马斯亮蓝里染过才会显出来。 3.是湿转还是半干转？注意看一下配方和阴阳极。 4.转膜时间是多长？如果湿转液里SDS浓度过高，转膜时间过长的话可能会造成蛋白和 marker 的丢失，看一下膜侧的滤纸上有没有 marker 残留。 总之，WB 是一项需要很细心认真，注重操作的实验，做好每一步。

有很多原因的，你的转膜的条件是否和别人一样，而别人是做得出来的。最好有人能看你做一下。想转膜液的成分，少加了甲醇。或者如果你用 PVDF 膜的话事先要用甲醇浸泡。电压的设定也有可能出错。电极放错也可能。

电转仪正常否？电转液对否？用的膜是否需要特殊处理下呢？

首先应注意胶、膜的正负极摆放，然后注意调整转膜电压及转膜时间，再好好试一次，应该没问题的。