trizol法提RNA浓度低的问题
刘芷谷
实验小白，前人用trizol处理了细胞之后放在-80℃冰箱。我今天继续提RNA，从加氯仿那一步开始。测浓度，有的样本浓度800多，纯度1.9-2.0，有的样本浓度只有70，纯度1.4-1.5。浓度低可能的原因有哪些呢？
2 个回答
土井挞克树
有帮助
首先考虑是不是细胞浓度太少，如果不是是否降解太多
Dr_劉医生
有帮助
- 提取样本过低总量不足或者提取样本过多裂解不彻底;
- Trizol分层后吸取上清时吸到中间层会带来严重的基因组污染，应当格外小心，不要吸取到中间层；
- 提取样本本身降解，或者是在提取过程中导致的降级;减少反复冻融
- 盐及有机溶剂残留
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