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        TRIZOL法提RNA浓度低

        相关实验:TRIzol RNA 提取方法

        user-title

        刘芷谷

        实验小白,前人用trizol处理了细胞之后放在-80℃冰箱。我今天继续提RNA,从加氯仿那一步开始。测浓度,有的样本浓度800多,纯度1.9-2.0,有的样本浓度只有70,纯度1.4-1.5。浓度低可能的原因有哪些呢?

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        6 个回答

        user-title

        Dr_劉医生

        有帮助

        RNA浓度低可能的原因:

        1. 提取样本过低总量不足或者提取样本过多裂解不彻底;
        2. Trizol法提取时,分层后吸取上清时吸到中间层会带来严重的基因组污染;分层吸取时应当格外小心,不要吸取到中间层;
        3. 可能是提取样本本身降解,或者是在提取过程中导致的降级;应当尽可能使用新鲜样本进行RNA提取,采集的样本应当及时置于液氮或者-80℃冰箱冻存,并减少反复冻融。
        4. 盐及有机溶剂残留
        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        可能是你的细胞死了,所以提取到的rna量少,trizol裂细胞是没有问题的

        user-title

        申东熙老伯

        有帮助

        可能是细胞量不一样,细胞多的RNA浓度自然会高,再就是酒精没挥发干净。

        user-title

        麻黄连翘赤小豆

        有帮助

        浓度低有可能rna 降解了或者被污染了

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        相同条件下的浓度不同说明你有的可能杂质多了,测一下rna降解产物是否多了

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        加了trizol后放-80没有问题,浓度低首先考虑是不是细胞数太少了,其次是后面的步骤中混入蛋白或DNA以及酒精残留太多。

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