• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        细胞冻存液DMSO浓度是10%还是20%?

        相关实验:乙二醛 /DMSO 变性琼脂糖凝胶电泳

        user-title

        丁香实验

        很多帖子说冷冻保护液:一般是以9份小牛血清或细胞培养液与1份DMSO混合而成,即DMSO浓度为10%。
        还有说,加入培养基、 40% 血清,逐滴加入二甲基亚砜( DMSO )至 20% 浓度,即制成双倍的冻存液;,再取与细胞悬液等量的冻存液,缓慢逐滴加入细胞悬液,并晃动试管,制成细胞冻存悬液。即最终细胞混合液中DMSO浓度是10%。
        到底该怎么配 细胞冻存液?

        wx-share
        分享

        1 个回答

        user-title

        丁香实验

        有帮助

        DMSO不能超过10%,因为有细胞毒性,一般都采用10%,血清一般用30%到40%,当然再多一点血清也没有坏作用,只是浪费而已。
        一般来说,DMSO:血清:培养基的体积比为1:3:6或1:4:5。
        冻存液最好现配现用,不易放的时间过久(一般不超过一个月)。但刚配好的冻存液会产热,需放置一会才能用于悬浮细胞。
        冻存细胞(以50ml培养瓶)时,先将冻存液按DMSO:血清:培养基的体积比按1:4:5配好,再处理细胞,一般先用PBS清洗细胞,胰蛋白酶消化,合成培养基悬浮细胞后,1000RPM离心5分钟,弃上清,将细胞沉淀用1ml冻存液悬浮,转移至冻存管,作标记后脱脂棉包裹,可直接放于-80℃冰箱,改日(一般应在三个月内)移于液氮罐中。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序