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        有关PCR的问题,大神求助呀:

        相关实验:多重 PCR 扩增实验

        user-title

        哦吼吼吼321

        请问759nt指该基因序列的长度为759吗?2.PCR基因跑Marker用的3号,本应该有7条带,结果只跑出一条带,原因可能是什么?

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        3 个回答

        user-title

        Miracle星

        有帮助

        七条带,只跑出一条带原因可能:

        a DNA marker 上样量不够
        按照说明书加样,或者根据自己的实验样品调整加样。
        b DNA电泳跑出凝胶
        电泳时,将溴酚蓝跑到胶长的2/3处即可停止电泳。更小的DNA片段可能需要电泳的时间更短。比如1/2
        c DNA条带被示踪染料所遮盖
        选用不同的电泳loading dye,使待检测的DNA样品避开示踪染料的干扰,或者适当降低loading dye用量。
        d 凝胶中未加核酸染料,或者后染时核酸染色不均匀。
        比如过夜存放的凝胶中的EB会分解很多,第二天使用,DNA条带明显变弱。因此使用EB作为核酸染料的凝胶最好是当天使用。少数剩余的凝胶想第二天使用,需要在凝胶中加入适当的缓冲液,最好用封口膜盖好。

        user-title

        dxy_jrj59zn3

        有帮助

        1.nt指的就是碱基数

        2.marker是不是过期了,可以再跑一次胶试试

        user-title

        Bumihiko

        有帮助

        1.是的

        2.这个没遇到过诶,只遇到过出歪点或者干脆不出的情况。只有一条的话确认加样是否加错了、尝试重跑一次看看吧

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