PCR产物电泳条带

PCR新手，请问大神，出现这样的PCR结果，没有出现CT值都是目的基因的，另外，内参基因CT值很大，为什么会出现这些问题，有什么建议？谢谢！（第一张图是我第一次做的PCR，第二张是次日重复的，内参基因用的是GAPDH，2和3是标本号，C是肿瘤组织，N是正常组织，程序是按说明书设置的：95℃ 30秒；变性：95℃ 5秒；60℃ 45秒；cDNA A260/A280为1.80-1.84之间，）