近半个世纪以来,临床化学微量免疫分析技术从上世纪60年代的放射免疫分析,70年代初的酶联免疫分析,到70年代末化学发光免疫分析,经历了标记物由放射性同位素(3H、14C、125I等)、酶(辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶)到化学发光物质(吖啶酯、鲁米诺等)的革新和检测技术由手工操作到全自动检测的飞跃,带来了医学检验质量和数量的迅速提高;90年代问世的LOCI(Luminescent oxygen channeling immunoassay, LOCI)技术以其独特的能量传递机制和化学发光原理,实现了均相、一步法、免清洗和高通量检测,并以其高灵敏度和特异性等突出检测性能,和包括DNA检测、新药开发在内的广泛用途而为世人所瞩目。该技术最初由Ullman等人在1994年报道,后由PerkinElmer公司生产相关试剂(AlphaScreenTM)。我国科研工作者在学习国外技术的基础上,勇于探索,对该技术从试剂到设备进行了进一步改良,开发了拥有自主知识产权的光激化学发光系统(Light initiated chemiluminescence assay, LiCA)。本文就该技术基本原理和
“借助一种称为新生儿Fc受体(Neonatal Fc receptor, FcRn)的免疫蛋白,抗体能进入被感染的细胞发挥作用。”这是来自马里兰大学,中国农业大学,加州理工学院的研究人员发表的题为“Intracellular neutralization of viral infection in polarized epithelial cells by neonatal Fc receptor (FcRn)-mediated IgG transport”的文章,提出了抗体对抗 ...
卵巢癌在妇科肿瘤中发病率仅次于子宫颈癌和子宫体癌居第三位,死亡率却居首位。这主要是因为卵巢深藏在骨腔内,且早期症状十分不明显,超过70%的患者就诊时已经是晚期。有资料显示:I期卵巢癌的5年生存率可达90%,而晚期患者仅为2.3-20%。由此可见卵巢癌早期诊断对其预后有重要影响。 肿瘤标志物是一种自然产生的分子,可在血清、血浆、体液、或其它组织提取物中检测到,也可以从组织中检测到(用以判断是否有癌细胞)。这种方法简便无创,在 ...
在本月的欧洲肝病研究学会的官方期刊《Journal of Hepatology》上刊登了一篇香港学者关于乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的综述性文章,该文章详细论述了目前HBsAg的最新进展以及在临床治疗和疾病预后中的意义。 图 HBV 生命周期 已经证实HBsAg定量检测有助于对HBV感染者的管理,但检测方法比较麻烦。最近,商业定量检测试剂盒的推广应用再次使人们的目光注意到血清HBsAg定量检测是一种有用的生物学标记,可预测慢性乙 ...
为了解乙肝流行情况,对疾病控制机构的大规模调查作有益补充,该项研究联合了浙江3家大规模综合性医院对大量临床患者筛查HBV血清标志物的结果和相关资料进行整理,分析。收集了3家医院2003—2008年6年间住院患者标本70582例,剔除了肝炎病区,感染病毒,肝指病区,血透病区等乙肝密切相关的病区患者。研究结果表明,HBV血清标志物5项检出率最高的就是抗-HBc,为55.17%,其他项检查率由高到低依次为抗-HBs(49 ...
化学发光免疫分析(ChemiLuminescence ImmunoAssay, CLIA) 一、定义: 化学发光是一种特异的化学反应,有机分子吸收化学能后发生能级跃迁,产生一种高能级的电子激发态不稳定的中间体,当其返回到基态而发出光子,即为化学发光。将化学发光与抗原抗体相结合而形成的免疫分析技术,即为化学发光免疫分析。 二、分类: 根据发光原理的不同,主要可分为化学发光免疫分析(CLIA)和化学发光酶免疫分析(CLEIA)两种。 CLIA CLEIA ...
前言乙型病毒性肝炎(简称乙肝)是由乙型肝炎病毒(HepatitisB virus , HBv )引起的传染性疾病,在我国人群中感染率较高,,是严重危害人民身体健康的常见传染病之一。对乙肝的诊断主要以实验室检测乙肝表面抗原(Hepatitis B Surface antigen , HBsAg )为主,检测方法主要有酶免疫法、反向间接血凝法、放免法、化学发光法、免疫荧光法等,目前应用较广、较普及的是酶免疫法。本标准所使用的缩略语为HBV 、HBsAg 。 本标准从2 ...
1.乙肝五项和乙肝核心抗体IgM:正常人HBSAb阴性或者阳性(有免疫力);HBSAg阳性表明感染乙肝病毒;HBSAb阳性代表机体有保护性抗体,对乙肝病毒有免疫力,阴性代表无保护性抗体,为易感人群;HBEAg阳性表明乙肝病毒正在复制或者病情复发;HBEAb阳性代表部分患者病情缓解或者趋于稳定;HBCAb表明已经感染乙肝病毒,接触乙肝病毒后都会产生的抗体,并维持很长时间甚至终身;HBC-IgM代表乙肝病毒活跃并已复 ...
近二十年来,心脏标志物尤其是肌钙蛋白(cTn)在临床的广泛应用,极大地促进了心血管疾病的诊断治疗和预后判断。cTn检测有着不可比拟的高灵敏性,因此很多首诊患者即表现出cTn轻度升高。如何正确分析该指标,从而区分高危的心脏急重症患者和非重症患者,对于临床医师非常重要,这样既能为前者提供程序化快速诊断、准确的危险分层评估以及最充分的治疗,又能减少后者留院观察时间,降低临床诊疗费用效益比。 值得注意的是,cTn升高虽然是 ...
生化分析仪常用分析方法共有三大类,分别为终点法、固定时间法和动力学法。 终点法: 指经过一段时间的反应,反应达到平衡,由于反应的平衡常数很大,可认为全部底物(被测物)转变成产物,反应液的吸光度不再变化,只与被测物的浓度有关。这类方法通常称为“终点”法,更确切地说应称“平衡”法。 单试剂单波长终点法:t1时刻加入试剂(体积为V),t2刻加入样本 (体积为S),然后搅拌并反应,之后开始测量反应液的吸光度, 在t3时刻反应达到终点,t3-t2为测定时 ...
一、试剂间化学污染的来源全自动生化分析仪发展迅速,具有多项目、多样本的处理能力,检测速度不断的提高,但由于共用吸样针、试剂针、搅拌棒以及比色杯,当生化仪长期使用致其清洗能力下降、比色杯老化后引起吸附力增加、生化仪内污垢的积聚、测试顺序安排不当,且常规清洗不能有效消除交叉污染时,就会增加试剂间化学污染的可能性,引起测定结果不准确。1.试剂针污染:目前大多数全自动生化分析仪采用双试剂检测样本,,试剂R1、R2的吸取与吐出 ...
[摘 要] 目的:建立一种双波长双试剂二点法测定血糖的方法。方法:应用BECKMANCOULTER LX20全自动生化分析仪,用双波长双试剂二点法测定血糖。结果:本法与LX20电极法相关系数r=0.998 6,血糖浓度在22.20 mmol/L内线性良好,批内CV是2.11%~3.07%,批间CV是3.57%,平均回收率为100.6%。结论:研究结果表明,该法适用于常规批量测定血糖,且该法基本解决了溶血、脂血、黄疸对结果的影响。 [关键词] 双波长;双试剂; ...
糖化血红蛋白(hba1c)是糖尿病患者长期血糖控制的重要监测指标,与糖尿病慢性并发症的发生及发展有着密切联系,是目前为止评价糖尿病患者血糖控制的“金标准”。因此,hba1c控制水平直接影响到糖尿病患者的长期预后。 许多大型的临床研究如dcct(糖尿病控制与慢性并发症试验)和ukpds(英国前瞻性糖尿病研究)均已证实,持续性降低糖化血红蛋白a1c (hba1c)能显著减少糖尿病各种慢性并发症的发生。hba1c不但可作为糖尿 ...
糖异生:由非糖物质(如乳酸、甘油、丙酮酸等三碳化合物和生糖氨基酸)转变为葡萄糖的过程称为糖异生。是体内单糖生物合成的唯一途径。 肝脏是糖异生的主要器官,长期饥饿、酸中毒时肾脏的异生作用增强。 糖异生的途径基本是糖酵解的逆向过程,但不是可逆过程。 糖异生的4个关键酶是: 葡萄糖-6-磷酸酶 果糖-1,6-二磷酸酶 丙酮酸羧化酶 磷酸烯醇式丙酮酸激酶 生理意义: 1) 作为补充血糖的重要来源,以维持血糖水平恒定。 2) 回收乳酸能量,防止乳酸中毒。 3) 协助氨基酸代谢。 糖的有氧氧化 ...
糖的无氧酵解途径——糖酵解途径 是在无氧情况下,葡萄糖分解生成乳酸的过程。它是体内糖代谢最重要的途径。 糖酵解途径包括三个阶段: 第一:引发阶段。葡萄糖的磷酸化、异构化。 已糖激酶(催化) 磷酸化 ①葡萄糖 葡萄糖-6-磷酸 (消耗1分子ATP) 为不可逆的磷酸化反应,酵解过程关键步骤之一,是葡萄糖进入任何代谢途径的起始反应。 磷酸已糖异构酶 ②葡萄糖-6-磷酸 果糖-6-磷酸 6-磷酸果糖激酶 磷酸化 ③果糖-6-磷酸 1,6-果糖二磷酸 是第二个不可逆的磷酸化反应,酵解过程关键步骤之二, ...
——重新认识高密度脂蛋白与AS的关系中南大学湘雅二医院 赵水平 有关HDL抗AS作用的困惑 动脉粥样硬化(AS)是心脑血管系统中最常见的疾病,研究证实其发病与多种危险因素相关。大规模临床流行病学研究表明,血浆高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平降低与冠心病(CHD)发生危险呈负相关,这提示高密度脂蛋白(HDL)具有一定的抗AS作用,升高HDL-C水平是抗AS的靶点之一。 然而,在临床研究中有学者却发现了一些矛盾现象:升高HDL-C水 ...
虽然我国城乡居民生活水平不断得到改善和提高,但在日常生活中科学饮食尚有欠缺,摄取高能量、高脂类食物不断增多,罹患冠心病、心脑血管病或周围动脉硬化、高血压、糖尿病等疾病的发病率越来越高,临床接受血脂检验的工作量较大,被检者对提高血脂检验质量要求越来越高。在实际操作中应注意以下几点。 (1)饮食:饮食会对检验结果产生明显影响,抽血前1~2周应保持平时的饮食习惯,前3 d避免高脂饮食,不应太油腻,不饮酒,禁食12~14 h后空腹抽血。 (2 ...
(一)体液葡萄糖的检测 酶法为推荐使用的测定方法(如:己糖激酶法或葡萄糖氧化酶法)。 1. 标本收集和贮存 大多数临床实验室采用血浆或血清测葡萄糖浓度,而大多数床旁测定葡萄糖的方法使用的是全血。使用不同的标本应采用不同的参考值。 室温下,血细胞中进行的糖酵解使血中葡萄糖减少,在获得标本后应尽快测定。 通过向标本中加碘乙酸钠或氟化钠可抑制糖酵解作用,使血葡萄糖在室温下稳定3天。 2. 已糖激酶法 (1)原理:在有已糖激酶(hexokinase)和Mg2+ ...
在使用全自动生化分析仪的过程中,我们经常会遇到这样的情况:单独做某个项目时结果没有问题,可是将它与某些项目组合在一起时,结果却出现异常。其中的原因是全自动生化分析仪的清洗系统随着仪器使用时间的累加,清洗效果逐渐下降,试剂交叉污染的程度增加所致。全自动生化分析仪各试剂间的相互干扰影响到了检验结果的准确性和可靠性,给检验结果带来很大的偏差,有时甚至会误导临床医生,延误患者的病情,造成严重后果。因此避免试剂间的干扰, ...
卫生部中日友好医院检验科 鄢盛恺 血脂测定是检出血脂异常和评价治疗效果的重要手段。血脂测定结果准确是血脂异常防治工作的基本需要。近来《中国成人血脂异常防治指南》(简称《指南》)已正式颁布实施。我国已开展的第一、二次临床血脂控制状况多中心协作研究揭示,我国目前血脂达标率不高,部分归因于血脂化验报告单与《指南》不相适应。本文拟对目前临床检验申请及报告方式与新《指南》的要求存在差距这一问题进行分析,探讨解决问题的可能途径,不断提 ...