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1 引言 由于冻干药品呈多孔状、能长时间稳定贮存、并易重新复水而恢复活性，因此冷冻干燥技术广泛应用于制备固体蛋白质药物、口服速溶药物及药物包埋剂脂质体等药品。从国家药品监督管理局数据库得知，目前国内已有注射用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、注射用重组人干扰素α2b、冻干鼠表皮生长因子、外用冻干重组人表皮生长因子、注射用重组链激酶、注射用重组人白介素-2、注射用重组人生长激素、注射用A ...

在生化制备中，沉淀主要用于浓缩目的，或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制备中常用的有以下几种沉淀方法和沉淀剂： 1．盐析法多用于各种蛋白质和酶的分离纯化。 2．有机溶剂沉淀法多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化，有时也用于蛋白质沉淀。 3．等电点沉淀法用于氨基酸、蛋白质及其它两性物质的沉淀。但此法单独应用较少，多与其它方法结合使用。 4．非离子多聚体沉淀法用于分离生物大分子 ...

本实验以醋酸纤维素为支持物，分离各种血清蛋白，血清中含有清蛋白，α—球蛋白、β—球蛋白、γ—球蛋白和各种脂蛋白等。

一）实验原理 双缩脲（NH3CONHCONH3）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。 紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。测定范围为1~10mg蛋白质。 ...

一）实验原理 这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法，由于其试剂乙的配制较为困难（现在已可以订购），近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即Folin—酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深兰色的原因是：在碱性条件下，蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。Folin&mdas ...

紫外吸收法测定蛋白质/DNA浓度的最大特点就是操作简单、测量迅速，而且不需要引入试剂；但是它也面临着很多问题，诸如测量准确性的问题。本节将讨论影响测定的一些主要因素。 （1）蛋白质的不同对测定结果的影响。 由于蛋白质是生物大分子，而紫外吸收往往是其分子内的小基团所引起的，例如酪氨酸、苯丙氨酸，色氨酸和肽键等等。因此当蛋白质不同，其包含的上述小基团含量发生变化时，就会影响蛋白质含量的测定。然而蛋白质 ...

蛋白质分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处，其吸光度（即光密度值）与蛋白质含量成正比。此外，蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下，蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系，可以进行蛋白质含量的测定。 紫外吸收法简便、灵敏、快速，不消耗样品，测定后仍能回收使用。低浓度的盐，例如生化制备中常用的（NH ...

选择适当的胶粘层有助于厂商改善基于膜的诊断产品的加工处理并延长该产品的效期。 用于层析诊断检测的材料有两个共同特性：多孔渗水并有相关脆性。为弥补该类材料的物理强度的不足，该类材料通常会依靠胶粘剂的作用装配到特定支架上（见图1）。以前，产品开发者用过几乎所有种类的胶粘剂来装配这些物质，包括热固性胶粘剂。 现在，随着胶粘剂技术的发展，一系列适用于层析检测应用领域的胶粘剂已被制造出来。通过选择一种能将应 ...

蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸。它们具有吸收紫外光的性质，其吸收高峰在280nm波长处，且在此波长内吸收峰的光密度值与其浓度成正比关系，故可作为蛋白质定量测定的依据，但由于各种蛋白质的酪氨酸和色氨酸的含量不同，故要准确定量，必需要有待测蛋白质的纯品作为标准来比较，或且已经知道其消光系数作为参考。另外，不少杂质在280nm波长下也有—定吸收能力，可能发生干扰。其中 ...

（一）天然染料 1、苏木精 苏木精是从南美的苏木（热带豆科植物）干枝中用乙醚浸制出来的一种色素，是最常用的染料之一。苏木精不能直接染色，必须暴露在通气的地方，使他变成氧化苏木精（又叫苏木素）后才能使用，这叫做“成熟”。苏木精的“成熟”过程需时较长，配置后时间愈久，染色力愈强。被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。所以在配制苏木精染剂时都要用媒 ...

1、凯氏定氮法仍然是建立各个具体方法时采用的参考标准方法。 2、双缩脲比色法是目前首先推荐的蛋白质定量方法。方法操作简便，虽然双缩脲试剂有大同不异。其中酒石酸钾纳可以稳定在碱性溶液中的铜离子，含有碘化物作为抗氧化剂。双缩脲反应生成的复合物其吸收峰为540nm。可采用公认的标准牛血清白蛋白作为标准品，经精确称量，必要时用凯氏定氮法标定。各地质控中心提供的混合标准血清可作为第二参考，血清用量100&m ...

愈伤组织的培养 一般来说，从接种外植体到出现愈伤组织，需要经过2周时间。2周之内就可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白色的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时，恒温箱的门应该关闭，不必见光，因为在无光条件下愈伤组织长得更快。2周以后，由于培养基中的营养成分已接近耗尽，必须更换培养基，进行继代培养。 愈伤组织的继代培养 进行继代培养所用的培养基，和培养愈伤组织所用的培养基相同。在严格的无菌条件下(接种箱 ...

简单、快速的膜介质核酸检测方法已步入发展轨道，但未来还有很长的路要走。 本文第二部分主要讨论提供给膜介质核酸免疫快速诊断应用（IVD 技术，方法2001年9月，53页）研发者们使用的技术。共价连接作为一类具有化学－可控定量偶联技术而被应用到膜介质核酸检测系统中，在本文总结部分较为详细地介绍共价连接方法（见图一）。本文结尾部分描述了核酸膜介质快速分析产品生产过程中的一些还没有被解决的问题和挑战。 图 ...

1、蛋白质样品的特征： 复杂，含盐或其他污染物 易被蛋白酶降解 动态范围宽（>X106） 溶解性不均一（疏水性/亲水性） 分子量、等电点的范围宽（10-500KDa，pH2-14） 2、样品分离的基本要求： 高灵敏度和分辨率 宽动态范围 小样品体积 高通量 合适的温度和pH 避免蛋白酶降解 适合与高灵敏度的质谱联用 尽量少的操作步骤减少污染和损失 3、样品缓冲液的组成： 3.1 尿素：一种中 ...

在植物组织培养中，主要目标是诱导愈伤组织形成和形态发生，使一个离体的细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过脱分化形成愈伤组织，并由愈伤组织再分化形成植物体。 愈伤组织的形成 从一块外植体形成典型的愈伤组织，大致要经历三个时期：起动期、分裂期和形成期。 起动期是指细胞准备进行分裂的时期。用于接种的外植体的细胞，通常都是成熟细胞，处在静止状态。起动期是通过一些刺激因素(如机械损伤、改变光照强度、增加氧 ...

A． 实验过程 一、实验原理： 2-DE的第一向电泳等电聚焦是基于等电点不同而将蛋白粗步分离，第二向SDS-PAGE是基于蛋白质分子量不同，而将一向分离后的蛋白进一步分离。这样就可以得到蛋白质等电点和分子量的信息。 二、实验步骤： 1.样品的溶解 取纯化后的晶体蛋白3.0mg，加入300μl裂解液(1mg蛋白:100μl裂解液)振荡器上振荡10min左右，共处理一个小时。其中每隔10～ ...

（一）第一向等电聚焦 1.从冰箱中取-20℃冷冻保存的水化上样缓冲液（I）（不含DTT，不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管），置室温溶解。 2.在小管中加入0.01g DTT，Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml，充分混匀。 3.从小管中取出400ml水化上样缓冲液，加入100ml样品，充分混匀。 4.从冰箱中取-20℃冷冻保存的IPG预制胶条（17cm pH 4-7），室温中放置1 ...

一、目的要求 　　掌握蓝藻门代表植物细胞的形态、结构、繁殖和生活史；掌握 蓝藻门的基本特征及实验材料的采集、培养和制片观察方法。 二、实验材料和试剂 　　颤藻属、念珠藻属、微囊藻属、色球藻属、0.2%亚甲蓝溶液等。 三、实验内容和方法 1．颤藻属（Oscillatoria） 　　植物体为单条藻丝或多条藻丝组成的皮壳状或团块群体。用解剖针挑取少许生活材料，做水封装片观察以下内容： 　　(1) ...

一．目的要求 　　本门植物种类繁多，体形多样，分布极广，是植物界进化的主干，也是教学和实验的重点，为此安排两次实验。通过实验观察要： 　　1．的代表植物的形态构造、繁殖和生活史。从而掌握本门的征。 　　2．了解植物界从单细胞到多细胞，从无分化到有分化，从简单到复杂，从无性生殖到有性生殖，从核相交替到世代交替的演化趋向。 二、实验材料和试剂 　　衣藻属、绿球藻属、栅列藻属、实球藻属、团藻属、I―K ...

一、目的要求： 　　本门植物种类繁多，体形多样，分布极广，是植物界进化的主干，也是教学和实验的重点，为此安排两次实验。通过实验观察要： 　　1．的代表植物的形态构造、繁殖和生活史。从而掌握本门的征。 　　2．了解植物界从单细胞到多细胞，从无分化到有分化，从简单到复杂，从无性生殖到有性生殖，从核相交替到世代交替的演化趋向。 二、实验材料和试剂 　　水绵属、刚毛藻属、丝藻属、竹枝藻属、轮藻属、海生绿 ...