全部

P3实验室是生物安全防护三级实验室。生物安全防护实验室根据微生物及其毒素的危害程度不同，分为4级，一级最低，四级最高。 一级实验室一般适用于对健康成年人无致病作用的微生物；二级适用于对人和环境有中等潜在危害的微生物；三级适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物或其毒素；四级适用于对人体具有高度的危险性，通过汽溶胶途径传播或传播途径不明、目前尚无有效疫苗或治疗方法的致病微生物 ...

Chou-Fasman方法是一种基于单个氨基酸残基统计的经验参数方法，由Chou和Fasman在20世纪70年代提出来。通过统计分析，获得的每个残基出现于特定二级结构构象的倾向性因子，进而利用这些倾向性因子预测蛋白质的二级结构。每种氨基酸残基出现在各种二级结构中倾向或者频率是不同的，例如Glu主要出现在α螺旋中，Asp和Gly主要分布在转角中，Pro也常出现在转角中，但是绝不会出现在& ...

蛋白质二级结构的预测开始于20世纪60年代中期。二级结构预测的方法大体分为三代，第一代是基于单个氨基酸残基统计分析，从有限的数据集中提取各种残基形成特定二级结构的倾向，以此作为二级结构预测的依据。第二代预测方法是基于氨基酸片段的统计分析，使用大量的数据作为统计基础，统计的对象不再是单个氨基酸残基，而是氨基酸片段，片段的长度通常为11-21。片段体现了中心残基所处的环境。在预测中心残基的二级结构时， ...

蛋白质结构预测的基本思想 蛋白质结构预测的问题从数学上讲，是寻找一种从蛋白质的氨基酸线性序列到蛋白质所有原子三维坐标的一种映射。典型的蛋白质含有几百个氨基酸、上千个原子，而大蛋白质（如载脂蛋白）的氨基酸个数超过4500。所有可能的序列到结构的映射数随蛋白质氨基酸残基个数而呈指数增长，是天文数字。然而幸运的是，自然界实际存在的蛋白质是有限的，并且存在着大量的同源序列，可能的结构类型也不多，序列到结构 ...

蛋白质结构预测的背景 一种生物体的基因组规定了所有构成该生物体的蛋白质，基因规定了蛋白质的氨基酸序列。虽然蛋白质由氨基酸的线性序列组成，但是它们只有折叠成特定的空间构象才能具有相应的活性和生物学功能。了解蛋白质的空间结构不仅有利于认识蛋白质的功能，也有利于认识蛋白质是如何执行其功能的。确定蛋白质的结构对于生物学研究是非常重要的。 目前，蛋白质序列数据库的数据积累的速度非常快，但是已知结构的蛋白质相 ...

超净工作台是医药卫生、生物工程、科学实验等领域用于无菌无尘洁净环境的局部净化单元。空气经顶/后部的初效空气过滤器和低噪音离心式通风机压入静压箱，经高效空气过滤器在上侧部均匀吹出，形成高度洁净度的水平/垂直空气幕，去除工作区域内的原自然空气，开机后五分钟即达到理想的高洁净度空间。采用可调风机无极调节风量大小，轻触型开关调节电压旋钮，保证工作区内的风速始终处于理想状态。本公司的超净工作台箱体壳采用进口 ...

亲和层析的应用主要是生物大分子的分离、纯化。下面简单介绍一些亲和层析技术用于纯化各种生物大分子的情况。 1.抗原和抗体 利用抗原、抗体之间高特异的亲和力而进行分离的方法又称为免疫亲和层析。例如将抗原结合于亲和层析基质上就可以从血清中分离其对应的抗体。在蛋白质工程菌发酵液中所需蛋白质的浓度通常较低用离子交换、凝胶过滤等方法都难于进行分离而亲和层析则是一种非常有效的方法。将所需蛋白质作为抗原经动物免疫 ...

1.上样 亲和层析纯化生物大分子通常采用柱层析的方法。亲和层析柱一般很短，通常10cm左右。上样时应注意选择适当的条件，包括上样流速、缓冲液种类、pH、离子强度、温度等，以使待分离的物质能够充分结合在亲和吸附剂上。 一般生物大分子和配体之间达到平衡的速度很慢，所以样品液的浓度不易过高，上样时流速应比较慢，以保证样品和亲和吸附剂有充分的接触时间进行吸附。特别是当配体和待分离的生物大分子的亲和力比较小 ...

亲和层析的实验操作和一般柱层析类似，都包括：装柱、上样、洗脱、样品收集、结果处理等步骤。 溴化氰活化琼脂糖用于配体固相化是实验室亲和层析最常用的技术之一，该方法简便廉价，并广泛应用于蛋白质、核酸、凝集素等。下面以此为例介绍亲和层析的实验方法： 试剂与配制 1.Sepharose 4B 2.CNBr（剧毒） 3.抗原或抗体 4.1Mol/L NaHCO3 取NaHCO3 84.01g加水至1 00 ...

选择并制备合适的亲和吸附剂是亲和层析的关键步骤之一。它包括基质和配体的选择、基质的活化、配体与基质的偶联等等。 基质 基质的性质 基质构成固定相的骨架，亲和层析的基质应该具有以下一些性质： 1.具有较好的物理化学稳定性。在与配体偶联、层析过程中配体与待分离物结合、以及洗脱时的pH、离子强度等条件下，基质的性质都没有明显的改变。 2.能够和配体稳定的结合。亲和层析的基质应具有较多的化学活性基团，通过 ...

生物分子间存在很多特异性的相互作用，它们之间都能够专一而可逆的结合，这种结合力就称为亲和力。亲和层析就是通过将具有亲和力的两个分子中一个固定在不溶性基质上，利用分子间亲和力的特异性和可逆性，对另一个分子进行分离纯化。 被固定在基质上的分子称为配体，配体和基质是共价结合的，构成亲和层析的固定相，称为亲和吸附剂。 亲和层析时首先选择与待分离的生物大分子有亲和力物质作为配体，并将配体共价结合在适当的不溶 ...

1.生物大分子的纯化 凝胶过滤是依据分子量的不同来进行分离的，由于它的这一分离特性，以及它具有简单、方便、不改变样品生物学活性等优点，使得凝胶过滤成为分离纯化生物大分子的一种重要手段，尤其是对于一些大小不同，但理化性质相似的分子，用其它方法较难分开，而凝胶过滤无疑是一种合适的方法。例如对于不同聚合程度的多聚体的分离等。 2.分子量测定 外水体积是指凝胶柱中凝胶颗粒周围空间的体积，也就是凝胶颗粒间液 ...

1.层析柱的选择 层析柱大小主要是根据样品量的多少以及对分辨率的要求来进行选择。一般来讲，主要是层析柱的长度对分辨率影响较大，长的层析柱分辨率要比短的高；但层析柱长度不能过长，否则会引起柱子不均一、流速过慢等实验上的一些困难。一般柱长度不超过100cm，为得到高分辨率，可以将柱子串联使用。层析柱的直径和长度比一般在1:25－1:100之间。用于分组分离的凝胶柱，如脱盐柱由于对分辨率要求较低，所以一 ...

超净工作台在当今医学、生物科学、食品科学和电子科学等研究领域中已经成为一种必不可少的实验室设备。科学家们需要超净工作台来提供一个洁净的，无尘的试验环境，来保护昂贵的样本不会受到污染，以及危险的样品不泄露到周围环境中。超净工作台正是为了满足用户这方面的要求而出现的。 现在市场上存在各种品牌、各种型号的超净工作台，怎样才能选择到满足自己需要的而且花费最少的超净台呢？怎样才能最大限度的使用超净工作台，保 ...

【目的】 规范净化工作台操作与维护工作，确保仪器正常运作。 【适用范围】 本实验方法适用于微生物检验中净化工作台操作与维护管理。 【该SOP变动程序】 本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。 【操作及维护规程】 1.1操作规程 1.1.1使用工作台时，应提前50分钟开机，同时开启紫外杀菌灯，处理操作区内表面积累的微生物，30分钟后关闭杀 ...

超净工作台是为实验室工作提供无菌操作环境的设施，以保护实验免受外部环境的影响，同时为外部环境提供某些程度的保护以防污染并保护操作者。 与简陋的无菌罩相比，超净台具有允许操作者自由活动，容易达到操作区的任何地方以及安全性较高等优点。目前我国使用的超净工作台有进口产品，如BIOGARD B40-112型，这是一种达到美国二级A类安全标准的超净工作台，是一种趋向具有低等和中等危险性的生物学试验推荐的产品 ...

超净台的优点是操作方便自如，比较舒适，工作效率高，预备时间短，开机10分钟以上即可操作，基本上可随时使用。在工厂化生产中，接种工作量很大，需要经常长久地工作时，超净台是很理想的设备。超净台由三相电机作鼓风动力，功率145～260W左右，将空气通过由特制的微孔泡沫塑料片层叠合组成的“超级滤清器”后吹送出来，形成连续不断的无尘无菌的超净空气层流，即所谓“高效的特殊空 ...

1、目的：维持屏障系统的生物洁净度，保护工作人员的安全，维护动物福利，保障机组的正常运转，尽量减少可影响科研成果的各种可变因素。 2、原则：屏障系统内的超净工作台只能用于建立动物模型的手术、转基因小鼠的日常操作。 3、使用管理： （1）每次使用超净工作台时，实验人员应先开启超净工作台上的紫外灯，紫外照射20分钟后使用。　　（2）开启超净工作台工作电源，关闭紫外灯，并用75%的酒精或0.5%过氧乙酸 ...

生物安全柜是用于实验室的主要隔离设备，可以防止有害悬浮微粒的扩散，对人员、样品和环境提供保护。生物安全柜按照NSF49号标准分类。二级生物安全柜属于全开门的通风橱，通过垂直气流来保护工作人员，空气经多层HEPA过滤器过滤以保护样品，排出空气经HEPA过滤来保护环境。使用正确的微生物操作技术，二级生物安全柜可以有效遏阻通过空气传播的污染物。 Thermo Electron所有的生物安全柜都带有HEP ...

1、仪器名称及型号 仪器名称：生物安全柜。 型号：HFsafe1200/C。 2、生产厂家 上海力申科学仪器有限公司。 3、检测范围 对直径0.3µm以上的颗粒，过滤效率达到99.99%。 4、检测原理 通过对整个过滤系统的控制，使得工作区的洁净度达到或超过100级标准。 5、参数设置 6 开关机程序6.1 开机：6.1.1 将电源插头插入准备好的固定插座。6.1.2 由系 ...