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一、抗体选择指南 检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择，为缩小抗体的选择范围选中合适的抗体，需要考虑如下几种因素： 1. 分析或应用的类型 2. 样本蛋白的结构性质 3. 样本的种属 4. 抗体宿主的种类 5. 抗体的标记和检测 1. 分析试验的应用类型 一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型，如：可以应用于WB IHC ICC ELASA 分析 ...

一、常用设备 1. 准备室的设备： 单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜（放置未消毒物品）、储品柜（放置消毒过的物品）、包装台。配液室的设备：扭力天平和电子天平（称量药品）、PH计（测量培养用液PH值）、磁力搅拌器（配置溶液室搅拌溶液）。 2. 培养室的设备： 液氮罐、储品柜（存放杂物）、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱（-80℃）、空调、二氧化碳缸瓶、边台（书写实 ...

细胞划痕实验是一种操作简单，经济实惠的研究细胞迁移的体外试验方法。这种方法的原理是，当细胞长到融合成单层状态时，在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。 基本的步骤包括“划痕”的制造，细胞迁移期间图像的获得以及后期数据的处理。 优点： 1，在一定程度 ...

我做不出来克隆的时间长达半年，期间克隆实验方面许多问题都遇到过，现在总结主要的一些问题和大家交流，希望大家以后不要犯我一样的错，少走弯路。 1、感受态细菌本身有质粒污染，这个问题困扰了我三个月，一直到最近才找到原因，我这里犯了最大的错是没有做过感受态检测。也许大家奇怪为什么在三个月内的时间里没有怀疑到感受态，不用奇怪，因为感受态“表现的太正常了”，每次涂板都 ...

一、基本原理 微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素，所以，菌种保藏方法虽多，但都是根据这三个因素而设计的。 二、保藏方法大致可分为以下几种： 1. 传代培养保藏法 又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养 ...

(一)雄性小鼠 雄鼠的生殖器官包括睾丸、附睾、输精管、储精囊、凝固腺、前列腺、尿道球腺、包皮腺及阴茎。 睾丸：睾丸又称精巢，是产生精子的地方。睾丸共有两个，幼年时睾丸藏存腹腔内，性成熟以后则下降到阴囊内，其表面为纤维性结缔组织，内部有无数的曲细精管，雄性间质组织产生精子，存在与睾丸的曲细精管内。 附睾：附睾又称精巢上体，由许多弯曲旋廻的细管组成，是接受并暂时贮存精子的 ...

(一)性成熟和体成熟 动物生长发育到一定程度，即达到性成熟期。性成熟的表现是生殖器官发育完全，出现第二性征。这时雄性动物有产生精子、雌性动物有产生卵子的能力，并出现性的要求。 小鼠性成熟时期的标志是：雌性小鼠阴道口张开，出现求偶周期，有交配的欲望，愿意接近公鼠；公鼠睾丸下降，精子生成。雌鼠一般在20日龄以前阴道口由皮肤闭合，之后阴道口皮肤逐渐变薄，阴道开口，其开口与卵巢机能活动相一 ...

(一)小鼠饲养管理的基本条件 饲养小鼠的基本条件包括鼠舍及笼具设备。由于前述小鼠的生物学特性及习性，小鼠对房舍的建筑和环境条件的要求比较严格，鼠舍应满足基本要求，如温度、湿度、噪音、氨浓度、通风换气和气流等条件。笼具可采用瓦罐、塑料罐或塑料盒，按照体重20 g的小鼠计算，每只小鼠需要饲养笼具面积0.009～0.063 m2，最好是分为5～10只小笼饲养。非同窝的性成熟雄鼠放在一起时，易互斗并咬伤 ...

1、PCR 产物测序时出现重叠峰 问题图1（模板中有碱基缺失，往往是单一位点（1-1）或两个位点（1-2）碱基缺失导致测序结果移码） 图1-1 图1-2 解决方法：将PCR 产物克隆到质粒（如T 载体）中挑单克隆测序，或将PCR 产物进行PAGE纯化（至少琼脂糖充分电泳后切胶纯化）后再进行测序。问题图2（PCR 产物不纯，含部分序列一致的两种以上的片段，长度不一） 图2 ...

问：在elisa实验中，抗体要不断冻融，特容易失活，不知道有什么配方可以使抗体和酶在4度中长时间保存? 答1：抗体溶液忌讳反复冻融。当你获得一个较大包装的抗体后，一般要先将其分装，每次取一小支使用，可于4度短期保存。 答2： （1） 分装的时候每管容量不宜过少，管数不宜过多，因为管壁也会吸附部分抗体溶液。 （2） 不要用玻璃容器分装，因为会导致蛋白失活 （3） 千万不 ...

1. 最佳量程范围 移液器范围在满量程的35%-100%，可以保证最佳的精度和重复度。 2. 吸液速度 （1）避免吸液速度过快； （2）移液速度保持均匀； （3）保持移液的节奏和压力一致。 3. 吸头浸入角度 保持吸头浸入角度垂直或和垂直方向倾角不超过20度。（原来移液器还是可以倾斜的嘛） 4. 吸头浸入深度 （1）移液器量程是0.1-10ul， 则浸入 ...

一、移液器的工作原理 移液器的工作原理是活塞通过弹簧的伸缩运动来实现吸液和放液。 在活塞推动下，排出部分空气， 利用大气压吸入液体， 再由活塞推动空气排出液体。 使用移液器时，配合弹簧的伸缩性特点来操作，可以很好地控制移液的速度和力度。 二、移液器的操作使用 1. 移液器规范操作步骤 （1）第一步 设定移液体积 从大体积调节至小体积时，为正常调节方法，逆时针旋转刻度即可 ...

前段时间写过一个胶体金的市场情况，考虑到丁香园里做研究或者研发的战友会比较多一些，结合自己的研发经验，写一些相关的东西。 一， 做胶体金研究好出论文吗？ 相对分子生物学的微观研究，胶体金出论文的难度似乎很大，总觉得一个研究做下来，就是出线与不出线，没什么可以写。为什么？ 首先，胶体金研究偏向生物技术应用研究，而分子生物学目前阶段还是停留在理论研究。所以你可 ...

1. 细胞爬片可以用含叠氮钠PBS液保存，但不知道具体浓度，请告知。 答：加在液体中作为防腐剂的叠氮钠浓度一般为0.04--0.08%。但是我建议对于细胞爬片，还是尽量快的进行处理，以防不必要的问题！ 2. 我的细胞爬片经过4%多聚甲醛固定，PBS冲洗后直接就放在了-20度，还能用于免疫组化吗？！ 答：应该没有问题，但是还是现作先染好些，以防抗原的丢失 &n ...

References Danise P Amendola G Di CR et al. Nucleated red blood cells and soluble transferrin receptor in thalassemia syndromes: relationship with global and ineffective erythropoiesis. Clin Chem La ...

INTRODUCTION Serum paraoxonase-1 (PON-1) is a high-density lipoprotein (HDL)-associated calcium-dependant esterase with antioxidant and anti-atherogenic properties. The activity of paraoxonase-1 has ...

软琼脂(soft agar)实验一般用来检测细胞的集落形成能力。现在这种方法越来越多的用于分离癌细胞，也可以用来确认癌细胞是否具有癌化特性，为进一步做肿瘤小鼠移植模型奠定理论基础。该方法看似简单，但如果细节掌握不好，往往导致实验失败或数据缺乏说服力。如果你曾经在这个实验上栽了跟头，请不妨在如下几个方面进行尝试： 1.要确保在整个实验过程中所使用的琼脂处于完全液体状态（>80℃ ...

单克隆抗体在现代生物医学中的作用越来越大，它不仅被广泛应用于生化和免疫检测，而且治疗癌症和自体免疫疾病的单抗药物也逐渐批准上市。因此单抗的制备和筛选具有其内在的重要性。 动物免疫 取4只6周龄雌性BALB/c小鼠皮下注射抗原（20 μg/只），第一次免疫与等量弗氏完全佐剂乳化，0.2 mL/只；两周后进行第二次免疫，抗原与等量弗氏不完全佐剂乳化，皮下注射，0.2 mL/只；两 ...

大鼠尾静脉注射是常见的操作，稍微有点难度，没有指导的话，一开始可能会感觉有点手足无措。但是可以肯定的说，只要掌握了方法，大鼠的尾静脉注射还是很容易的。总的来说，大小鼠的尾静脉注射难度相当，熟练后，大鼠应该比小鼠注射更容易，因为大鼠的尾巴较粗，而且血管也较粗，进针的手感比较好找。但是大鼠年龄增大后，尾部鳞片也较厚，此时尾静脉注射难度会加大，进针点宜选择两个鳞片的间隙，以利于针尖顺利刺入。 &nbs ...

小鼠静脉注射是常见的操作，稍微有点难度，没有指导的话，一开始可能会感觉有点手足无措。但是可以肯定的说，只要掌握了方法，小鼠的尾静脉注射还是很容易的。 操作步骤： 1. 首先要固定小鼠，最简单的固定方法就是把小鼠放在盒子里面，让它的尾巴伸在盒盖的外面，用手抓住小鼠尾巴，轻轻往外拽，就可以固定好小鼠了。这种固定方法，小鼠可以在盒子里面活动，固定的也不是很牢固，但是只要你尾静脉注射的手法 ...