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一、实验目的细胞融合是指两个或两个以上的细胞合并成为一个细胞的过程。在自然情况下，体内和体外培养的细胞均能发生自发融合现象。人工方法诱导细胞融合开始于50年，现在这项技术已成为研究细胞遗传、细胞免疫，肿瘤及细胞工程的重要手段。通过实验，了解细胞融合的原理，掌握细胞融合的基本方法。二、实验原理在诱导物（如仙台病毒，聚乙二醇）作用下，相互融合的细胞发生凝集，随后在质膜接触处发生质膜成份的一系列变化，主 ...

组织细胞用于遗传学分析最常见的是体外培养的细胞株，多为恶性肿瘤细胞株，且呈贴壁生长，仅小数细胞株为悬浮生长。培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和染色体标本制出清晰度高等优点。组织细胞染色体制备的关键是掌握好体外细胞的生长动态，只有处在对数生长期的细胞才能出现较高的分裂相，所以积水仙素处理的时机及量是染色体标本形态及分裂指数的关键。 　　1、 实验材料 　　培养液（PRMI 1640、M199、DM ...

在真核生物中 染色体的数量和形态具有物种的特异性一直可以作为此物种分类的基本依据之一。染色体作为遗传物质-DNA的载体 对生物的遗传、变异、进化和个体发生 以及细胞的增殖和生理过程的平衡控制等都具有十分重要的意义。每一个物种的细胞一般都有一定数目、形状和大小的染色体。将体细胞核中全部染色体按照其大小、着丝粒位置，以至带型有序地排列起来，此模式图象排列即为核型(karyotype)或染色体组型。核型 ...

1．培养IL-2依赖细胞株CTLL-2细胞或HT-2细胞（检测IL-2），或者IL-3依赖细胞株FDC-P1细胞或FL5.12细胞（检测IL-3）到对数生长期。 2．取96孔细胞培养板，每孔加0.1ml含1×104～2×104上述细胞之一的DMEM培养液（加10％小牛血清）。 3．每孔加0.1ml系列稀释的待测细胞因子（IL-2或IL-3）样品或细胞因子标准品，在37℃ 5％ CO2的饱和水汽二氧 ...

实验目的观察植物细胞质流动现象了解影响细胞质流动的因素。实验原理在多种植物的细胞中都能观察到植物细胞质流动现象，它是细胞活动强弱的重要指标。细胞质流动现象的产生，是细胞骨架中微丝肌动蛋白与肌球蛋白相互滑动的结果，此过程要消耗能量，受各种因素诸如温度、渗透压及各种离子的影响。材料用品**材料：紫鸭趾草花丝，黑藻（水王荪、轮叶黑藻）叶。 紫鸭趾草紫鸭趾草花黑藻**药品：1mol/L氟化钠，1mol ...

1. 冷冻细胞之活化原则为快速解冻，以避免冰晶重新结晶而对细胞造成伤害，导致细胞之死亡。 2. 细胞活化后，约需数日，或继代一至二代，其细胞生长或特性表现才会恢复正常(例如产生单株抗体或是其它蛋白质)。 3. 材料 3.1 37 oC 恒温水槽 3.2 新鲜培养基 3.3 无菌吸管/ 离心管/ 培养瓶 3.4 液氮或干冰容器 4. 步骤： 4.1 操作人员应戴防护面罩及手套，防止冷冻管可能爆裂之伤 ...

第一种方法：使用泰乐菌素（tylosin），Sigma，120多块钱泰乐菌素是一种兽用抗生素常用在鸡、猪的食料辅料，可以防止支原体感染引起的支气管哮喘，至今尚未见有耐药菌株，是治疗支原体感染的特效药。第二种方法：M-Plasmocin：InvivoGen公司研究开发的新一代支原体抗生素M-Plasmocin能有效地杀灭支原体，不影响细胞本身的代谢，并且用M-Plasmocin处理过的培养细胞，不会 ...

概述如今越来越多的临床与细胞实验室检验项目对快速处理样品提出了更高的要求。对于样品分离的常规离心技术，更是需要具有尽可能快的加速和与之相应的减速，以缩短许多诸如培养细胞等温度敏感的样品在离心机中存留过长的时间。Eppendorf根据这方面应用的要求，开发并推出5702、5702R、5702RH系列离心机，已经成功地将离心机加速和减速时间缩短至25秒以内。除了速度，另一个影响或评价临床与细胞实验室离 ...

1． Fen细胞培养于含10％小牛血清的RPMI-1640培养液中，在25cm2培养瓶中生长到接近汇合。用含0.05％胰蛋白酶，0.02％ EDTA的PBS消化细胞5分钟，洗涤后，用细胞培养液将细胞配成1×105/ml。 2． 取96孔细胞培养板，每孔加0.1ml细胞悬液，在37℃ 5％ CO2的饱和水汽二氧化碳培 养箱中培养24小时，让细胞帖壁。每孔加0.1ml效应细胞悬液，效靶比10：1到50 ...

一、用51Cr铬酸钠标记靶细胞 短期标记法 1．用RPMI-1640培养液洗涤107靶细胞，去上清液。用0.5ml不含碳酸氢钠的完全培养液悬浮细胞。加入100μCi（3.7MBq）51Cr铬酸钠，37℃水浴中标记1小时，每5～10分钟摇晃一次，混匀细胞。 2．如上用RPMI-1640培养液洗涤细胞3次，每次400×g 10分钟。用50ml RPMI-1640培养液悬浮细胞，置37℃水浴30分钟，以 ...

植物原生质体融合和培养在理论和实践上都有很大的意义，在植物遗传工程和育种研究上具有广阔的应用前景。它是植物同源、异源多倍体获得的途径之一，它不仅能克服远缘杂交有性不亲和障碍，也可克眼传统的通过有性杂交诱导多倍体植株的麻烦，最终将野生种的远缘基因导入栽培种中，原生质体融合技术可望成为作物改良的有力工具之一。植物原生质体培养方法起源于植物单细胞的培养方法。1954年，植物单细胞培养才获得成功。Mlli ...

1．ATP反应液（Bio-Orbit）是粉末状混合物，含有荧光素、荧光素酶、0.5mmol醋酸镁、50mg BSA和0.1μmol无机焦磷酸。在4℃可以保存1个月。用前用10ml含2mmol/L EDTA的0.1mol/L pH7.75 Tris-醋酸缓冲液稀释。稀释液分装后可在－20℃长期保存。 2．在已经完成促增殖或抑生长试验后的96孔细胞培养板中（每孔含100μl细胞培养液），每孔加0.1m ...

肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置，首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。一、组织培养肿瘤细胞生物学特性肿瘤细胞与体内正常细胞相比，不论在体内或在体外，在形态、生长增值、遗传性状等方面都有显著的不同。生长在体内的肿瘤细胞 ...

1. 收到细胞株包裹时， 请检查细胞株冷冻管是否有解冻情形， 若有请立即通知。细胞 株请尽速开始培养， 或立即冷冻保存(置于–70 °C， 隔夜后， 移到liq N2)。 2. 冷冻细胞解冻程序: 2.1. 依据细胞株数据单指定之基础培养基种类、血清种类和其它指定之成份和比例， 制备培养基。绝大多数之细胞均无法立即适应不同之基础培养基或不同之血清种类， 若因实验需要， 必须有所不同时， 务必以缓慢 ...

氨基酸 氨基酸是组成蛋白质的基本单位.不同种类的细胞对氨基酸的要求各异但有几种氨基酸细胞自身不能合成必须依靠培养液提供这几种氨基酸称为必需氨基酸.其中谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸在缺少谷氨酰胺时细胞生长不良而死亡.因此各种培养液中都有较大量的谷氨酰胺.但是由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定应置于-20℃冰箱中保存在使用前加入培养液内.已含谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱中储存2周以上时还应重新加 ...

目的要求 1．掌握一般培养基制备的原则和要求。 2．熟悉一般培养基制备的过程。 操作步骤 一、培养基的制备原则和要求 培养基是根据各类微生物生长繁殖的需要，用人工方法把多种物质混合而成的营养物。一般用来分离、培养菌类。常用的培养基有基础培养基、增菌培养基、选择培养基、鉴别培养基和厌氧培养基。在制备培养基时，应掌握如下原则和要求： （一）培养基必须含有细菌生长繁殖所需要的营养物质。所用的化学药品必须 ...

　　采用这种方法的主要是Sysmex生产NE和SE系列血液分析仪，如SE-9000。此类仪器白细胞分类通过四个不同检测系统完成。 1.嗜酸性细胞检测系统 　　血液进入仪器后，经旋转阀准确分血2·4μl 加入0·6ml嗜酸性细胞计数的溶血剂，混合，由于试剂特殊的PH，使得除嗜酸性细胞以外的所有细胞溶解或萎缩，含有完整的嗜酸性粒细胞250μl液体通过小孔时，使计数电路产生脉冲而被计数。 2.嗜碱性细胞 ...

一、 常规操作1. 穿着专用实验服。自己的白大衣或厚外套，可脱在门外的衣帽架上。2. 穿着专用拖鞋。在缓冲间换下自己的鞋子，尽量避免在缓冲间走动、停留。3. 细胞房最多可4个人同时使用。尽量避免在内长时间逗留、交谈。二、 培养箱使用规则1. 从培养箱取放物品前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。__培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。长时间敞开或频繁开关培养箱 ...

细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传特性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养室的常规工作和通用技术。第一节 细胞的冻存一、概述目前，细胞冻存最常用的技 ...

细胞是一切生物体最基本的结构单位和功能单位。细胞学研究在医学科学乃至生命科学中占有十分重要的地位。近代细胞生物学发展十分迅速，其研究方法逐步从传统的定性描述发展到定量的、细胞群体的研究，以获得更为客观的、具有统计学意义的测量数据，供进一步深入的研究。由此形成了一个新的领域，新的学科，即分析细胞学。流式细胞分析术(FCM)是分析细胞学最重要的组成部分。分析细胞学也称为定量细胞学。它既是细胞生物学发展 ...