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细胞培养（Cell Culture）专题：http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm肿瘤条件培养基制备：1．取C3H小鼠的S-180实体肉瘤组织。2．胰蛋白酶消化，Dulbecco改良Eagle氏培养液15ml（含10％小牛血清），接种到T-75 Falcon产培养瓶中培养。3．在细胞生长接近完全汇合时，收集培养液制成条件培养基； ...

细胞培养（Cell Culture）专题：http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm1）二倍体细胞培养法二倍体细胞培养法与一般培养相同，关键在于传代，其传代程序为：1.吸除旧培养液注入另瓶中。2.用温BSS冲洗1次。3.用0.25%温胰蛋白酶消化，加入消化液量以仅覆盖细胞层即可；作用1~5分钟。4.待细胞附着松动、细胞质边缘卷起和 ...

细胞培养（Cell Culture）专题：http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm细胞培养是现代生物学研究中应用最为广泛的技术之一。它的突出优点，一是研究对象是活的细胞，可长时期地监控、检测甚至定量评估其形态、结构和生命活动等；二是可以人为地严格控制研究条件，便于研究各种物理、化学、生物等外界因素对细胞生长、发育和分化等的影响， ...

一、机械刮除法1．标记：镜下观察，用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位。2．刮除：弃掉培养液，把无菌胶刮伸入瓶皿中，肉眼或显微镜窥视下，刮除无标记空间。3．用Hanks液冲洗一两次，洗除被刮掉的细胞。4．注入培养液继续培养，如发现仍有成纤维细胞残留，可重复刮除至完全除掉为止。二、反复帖壁法1．待细胞生长达一定数量后，倒出旧培养液，用胰酶消化后，Hanks冲洗2次，加入不含血清的培养液， ...

细胞培养（Cell Culture）专题：http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm　　羊水中含有胎儿脱落的上皮细胞，可在体外培养用以分析胎儿染色体核型。目前国内外大都采用腹腔羊膜穿刺术，妊娠12-30周的羊水细胞均可培养成功。羊膜腔穿刺取羊水行染色体分析，最佳孕周为16周左右。因此时羊水增长快，羊水中细胞较多，细胞培养易于生长， ...

细胞培养（Cell Culture）专题：http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm在正常情况下，人外周血中是没有分裂相的，只有在异常情况下才能发现。植物血球凝集素（PHA）是人类淋巴细胞有丝分裂的刺激剂，在PHA作用下，原处于Go期的淋巴细胞转化为淋巴母细胞，进而进行有丝分裂。利用PHA这一特性，淋巴细胞经过含有HPA培养液培养 ...

1. 细胞库之细胞培养基不加抗生素1.1. 培养自ATCC 引进之细胞株，培养基中不加抗生素。1.2. 培养自其它实验室引进之细胞株，制作token freeze 前培养基须添加抗生素，待token freeze 通过污染测试后，大量培养时则不加抗生素。2. 寄送活细胞时，须将培养液充满整个flask 时，则须添加抗生素(penicillin 100 units/ml + streptomycin ...

细胞培养（Cell Culture）专题：http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm我现在的方向其实是生物医用材料，我对一次性生物材料的性质还算比较了解。对培养瓶、培养板的重复使用简单的说两句。一般培养瓶、培养板、培养皿的材质都是生物相容性的聚苯乙烯，且要求具有较好的光学性能。在加工成型后，要进行组织培养处理。各公司用的方法都不太 ...

细胞培养（Cell Culture）专题：http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm高等生物是由多细胞构成的整体，在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内（in vivo）的功能活动是十分困难的。但是如果把活细胞拿到体外（in vitro）培养进行观察和研究，则要方便得多。活细胞离体后要在一定的生理条件下才能存活和进行生理活动 ...

细胞培养（Cell Culture）专题：http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm细胞培养常见问题与解答2.pdf 将本文分享到下面的网站： 更多 ...

1. 种类1.1. 细胞培养实验用品均为无菌，除了玻璃容器与pasteur pipet 外，其它均为塑料无菌制品。1.2. TC 级培养盘表面均有coating 高分子物质以让细胞吸附，培养容器种类有Tflask plates dishes roller bottle 等，依实验需要使用。1.3. plastic sterile pipet: 1 ml 2 ml5 ml 10 ml 25 ml1. ...

细胞培养（Cell Culture）专题：http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm1)实验前无菌室及无菌操作台用紫外灯照射30-60分钟灭菌用70% 酒精擦拭无菌操作台面并开启无菌操作台风机运转10分钟后才可开始实验操作.每次操作只处理一株细胞以免造成细胞交叉污染.实验结束后将实验物品带出工作台.如需要继续进行下一个实验则用70 ...

骨骼肌细胞培养1．杀死动物，无菌取大腿肌组织，切成0.3～0.5厘米小块。2．用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25％胰蛋白酶消化，无菌纱网或纱布滤过，合成培养基加10％小牛血清培养，为促进分化可加1％的胎汁。3．细胞接种量为2×106/皿，接种在胶原或明胶的底物上能促进细胞分化。明胶制备比较简单，常用Hanks液配的0.01％明胶。肌细胞培养1．选新鲜受精鸡卵，置温箱中孵育（温箱中放有水槽，以 ...

1 实验室设计细胞培养是一种无菌操作技术要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响.细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响要求工作环境清洁空气清新干燥和无烟尘.细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧常规操作和封闭培养于一室而洗刷消毒在另一室.2 常用设施及设备(1)超净工作台:也称净化工作台分为侧流式直流式和外流式三大类.(2)无菌操作间:一般由 ...

1. 如何选用特殊细胞系培养基？培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，首选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。2. 何时须更换培养基？视细胞生长密度而定， 或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更换培养基即可。3. 可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞 ...

细胞培养（Cell Culture）专题：http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm氨基酸氨基酸是组成蛋白质的基本单位.不同种类的细胞对氨基酸的要求各异但有几种氨基酸细胞自身不能合成必须依靠培养液提供这几种氨基酸称为必需氨基酸.其中谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸在缺少谷氨酰胺时细胞生长不良而死亡.因此各种培养液中都有较 ...

血清热灭活―您是否在浪费时间？血清的热灭活是很多培养者感兴趣的话题，价格不菲的血清中含有诸如生长因子，维生素，氨基酸等珍贵物质，而将它们置于50℃以上的温度长达30分钟是完全没有必要的。尽管如此，在大多数实验室之中血清的热灭活还是作为常规来执行，多数实验者并没有考虑热处理对血清中的生长因子，氨基酸等成分带来的负面影响，在我们的技术热线中最常被提到的就是否该对血清进行热灭活，下面我们就对胎牛血清的热 ...

细胞培养（Cell Culture）专题：http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm细胞培养是将器官、组织或细胞从生物机体中取出，模拟该器官、组织或细胞在机体内的生理条件，在体外进行培养，使其能够继续生存、生长和繁殖。一些研究结果表明，许多种类的动物或植物的细胞都能在人工培养条件下生存、生长和繁殖。现代的动物细胞培养始于美国动物学 ...

实验内容一、显微镜的结构及使用方法•1、光学显微镜的主要构造机械部分照明部分光学部分•2、光学显微镜的使用方法对光 → 置片 → 低倍 → 高倍 → 复原低倍镜使用高倍镜使用•3、使用光学显微镜的注意事项二、酸性蛋白和碱性蛋白的显示 1#、2#血涂片→凉干→70%乙醇中固定5分钟→冲洗→9 ...

一、原理：利用荧光染料（bisbenzimideHoechst 33258）检测支原体污染。这种染料会结合到DNA的A-T富集区域，因为支原体的DNA中A-T含量高（55％～80％），所以可将其染色而被检测到。被支原体污染的细胞经染色后在细胞周围可看到许多大小均一的荧光小点，即为支原体的DNA染色斑，说明有支原体污染。 二、试剂盒组分： 1．Hoechst 33258工作液 50ml 2 ...