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昆虫病原细菌、真菌的分离及病毒的提纯

一、目的要求: 昆虫病原体的采集,整理是研究昆虫病理和利用微生物进行害虫防治的第一步。识别症状是诊断学的主要内容。本实验要求对昆虫疾病有一个较直观的了解,从而为今后工作打下基础。 二、实验内容: 1. 病体材料的收集 因病死亡的昆虫,可发现于植物的枝叶、茎内、花苞。果实中地表土下等,样本多数脆弱。因此,采集时应以单个样本连同基物的一部份或全部置于小瓶中,并加棉塞。 已收集到的病、死虫体,应迅速处 ...

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微生物大小的测定

一、目的和要求:1.学习并掌握用测微尺测定微生物大小的方法2.增强对微生物细胞大小的感性认识二、基本原理微生物大小的测定需要在显微镜下借助特殊的测量工具——镜台测微尺和目镜测微尺。由于不同的物镜和目镜组合的放大倍数不同,目镜测微尺每小格所代表的实际长度也不一样。因此,用目镜测微尺进行大小测定时必须用镜台测微尺进行校正,以求出该显微镜在一定放大倍数的目镜和物镜下,目镜测微尺每小格的相对长度,然后根据 ...

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昆虫病原微生物——细菌染色技术及形态观察

目的要求: 昆虫病原微生物的鉴定是昆虫病理学研究的重要范畴,是微生物防治害虫中不可疏忽的步骤。对昆虫传染病的认识和致病原因的确定均取决于对病原微生物的正确鉴定,而且直接关系到病原体的生产、剂型和使用。 本实验要求通过显微镜检查和细菌学上的几个鉴别染色法来学习掌握鉴定细菌的常规方法,达到提高识别细菌形态的能力,和掌握鉴定细菌的技能。 二、实验仪器: 玻片、酒精灯、接种环、香柏 ...

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湿热灭菌法

在同样的温度下,温热的杀菌效果比干热好,其原因有:①蛋白质凝固所需的温度与其含水量有关,含水量愈大,发生凝固所需的温度愈低。湿热灭菌的菌体蛋白质吸收水分,因较大同一温度的干热空气中易于凝固。②温热灭菌过程中蒸气放出大量潜热,加速提高湿度。因而湿热灭菌比干热所要温度低,如在同一温度下,则湿热灭菌所需时间比干热短。③湿热的穿透力比干热大,使深部也能达到灭菌温度,故湿热比干热收效好。  湿热灭菌法包括有 ...

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土壤中稀有放线菌的分离、纯化和鉴别

一、目的和要求  1、了解采集土样的要求和方法。  2、掌握由土壤中分离稀有放线菌的基本原理和操作技术。  3、学习并掌握土壤稀释法和微生物的纯培养技术。  4、学习并掌握抗生菌的鉴别方法。二、原理  筛选放线菌是新抗研究的重要课题之一。迄今为止,已发现的抗生素有80%皆来自于放线菌。放线菌主要存在于土壤中,并在土壤中占有相当大的比例。一般地,放线菌在比较干燥、偏碱性、含有机质丰富的土壤中数量居多 ...

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细菌细胞壁的染色法和细胞质膜的观察

一、目的要求   1.学习掌握细菌细胞壁的染色法。   2.利用质壁分离法观察细菌的细胞壁和细胞质膜。   二、基本原理   细菌细胞壁很薄,革兰氏阳性菌的细胞壁为20—30nm,革兰氏阴性菌的细胞壁为10—13nm。组成细菌细胞壁的主要化学成分是肽聚糖,它与染料结合的能力差,不易着色,在细菌的染色过程中,一般情况染料都是通过细胞壁的渗透、扩散等作用而进入细胞,细胞壁本身并未染色,因此,欲通过染色 ...

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酒精发酵

一、目的和要求:  1、 学习淀粉质原料发酵产乙醇的原理  2、掌握酒精含量测定的方法。 二、原理  玉米粉中可供发酵的物质主要是淀粉,而酿酒酵母由于缺乏相应的酶,所以不能直接利用淀粉进行酒精发酵,因此必须对原料进行预处理,通常包括蒸煮(液化)、糖化等处理。蒸煮可使淀粉糊化,并破坏细胞,形成均一的醪液,目前多数厂家开始利用α-淀粉酶的液化作用来替代蒸煮过程,这样可大大减少能源消耗。液化后的醪液能更 ...

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四环素的定向发酵

一、目的和要求  1、通过实验加深对定向发酵的理解。  2、学习利用沉淀或溶媒法提取四环类抗生素的操作技术。 二、原理  金霉素在化学结构上与四环素十分相似,区别仅在C-7位上,以Cl取代了H。所以,金霉素又称为7-氯四环素。金霉素链霉菌是金霉素的产生菌,但当培养基中存在抑氯物质时,由于氯的掺入受阻,而使得金霉素链霉菌的生物合成方向发生变化,并使四环素成为主要产物。  本实验以M-促进剂(硫醇苯骈 ...

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微生物的形态观察

一.实验目的 1. 学习在油镜下观察微生物的个体形态 2. 了解革兰氏染色法的原理,并熟练掌握其操作步二.实验原理 微生物的细胞小且透明,在普通光学显微镜下不易识别,必须对它们进行染色,使经染色后的菌体与背景形成明显的色差,从而能更清楚地观察到其形态和结构。因此,微生物染色技术是观察微生物形态结构的重要手段。 革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。它是1884年由丹麦医师G ...

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厌氧菌的培养方法

厌氧菌在有氧的情况下不能生长。要培养厌氧菌,必须创造一个无氧的环境。通常用培养基中加入还原剂,或用物理、化学方法去除环境中的游离氧,以降低氧化还原电势。如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基,牛心脑浸液培养基等。常用的厌氧培养方法有许多,可根据实际情况选用。  1.厌氧缸法接种好标本的平板或液体培养基试管,可放入厌氧缸内培养,厌氧缸是普通的干燥缸,用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境,从而将厌氧菌培养出来。 ...

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苏云金杆菌的血清学鉴定

一、目的: 1、学习抗原及抗体的制备方法 2、学习试管凝集反应的方法及效价的测定 3、学会分析不同抗原(o抗原、H抗原)的方法 二、实验原理 将生物细胞或它们的磨碎物。提取物等注射到热血动物体内,动物血液中可以产生与注射物起作用的物质——抗体。能诱发抗体产生的注射物称为抗原。含有抗体的血清称为免疫血清或抗血清。抗原和抗体之间会发生各种血清学反应,如凝集反应,沉淀反应等,它既专化又敏感,可用于鉴定和 ...

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测定细菌数量的方法

1、计数器测定法:  即用血细胞计数器进行计数。取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内,用显微镜观察计数。由于计数室的容积是一定的(O.1mm3),因而根据计数器刻度内的细菌数,可计算样品中的含菌数。本法简便易行,可立即得出结果。  本法不仅适于细菌计数,也适用于酵母菌及霉菌孢子计数。  2、电子计数器计数法:  电子计数器的工作原理是测定小孔中液体的电阻变化,小孔仅能通过一个细胞,当 ...

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家兔动脉血压的神经、体液调节

:1、学习直接测定和记录家兔动脉血压的急性实验方法.2、观察神经,体液因素对心血管活动的影响.:在正常生理情况下,人和高等动物的动脉血压是相对稳定的。这种相对稳定性是通过神经和体液因素的调节而实现的,其中以颈动脉窦—主动脉弓压力感受性反射尤为重要。此反射既可使升高的血压降下来,又可使降低的血压升高,固有血压缓冲反射之称谓。家兔的主动脉神经在解剖上独成一支,易于分离与观察其作用。本实验是应用液导系统 ...

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细菌的简单染色

一、目的和要求1.掌握无菌操作技术。2.学习微生物涂片、染色的基本技术。掌握细菌的简单染色方法。3.巩固显微镜的使用方法。二、原理与操作1.无菌操作 2.细菌的简单染色(1)观察微生物时为什么必须采用染色方法细菌、真菌、和其他微生物的细胞质是透明的,不借助染色方法很难观察到这些微生物。(2)简单染色的生化原理细菌细胞通常带负电荷,简单染色时采用已知的、带正电荷的碱性染料与菌体细胞黏附使菌体着色。 ...

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细菌感染的诊断

一、检测细菌或其抗原  (一)直接涂片显微镜检查  自病人标本直接涂片作染色镜检是简便而快速的方法之一。自一定部位采集标本作直接检查需考虑细菌的形态特征与可能存在的细菌数量。脑膜炎患者的脑脊液和瘀斑刺破涂片,常可显示在细胞内的革兰氏阴性肾形双球菌,有诊断价值。白喉患者咽部假膜涂片中可见典型的杆菌有时可有异染颗粒,也有参考诊断价值。结核患者痰直接或浓集后,涂片抗酸染色检出结核杆菌有诊断价值。在少数情 ...

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显微镜的使用及细菌形态观察

一.目的和要求1.学习并掌握普通光学显微镜的结构和各部分的功能及使用方法。2.学习并掌握油镜的工作原理及使用方法。二.原理1.显微镜的基本结构现代普通光学显微镜由机械系统和光学系统两大部分组成。机械系统主要包括:镜座、镜臂、载物台、转换器、调节装置等组成。光学系统主要包括:物镜、目镜、聚光器、光源等组成。 将本文分享到下面的网站: ...

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革兰氏染色

一、目的和要求1.了解革兰氏染色法原理及其在细菌分类鉴定中的重要性。2.掌握革兰氏染色的基本步骤。二、原理G+、G-细菌的细胞壁成分和结构不同。G+的CW主要有肽聚糖形成的网状结构组成,在染色过程中,当用95%乙醇处理时,由于脱水而引起网状结构中的孔径变小,CW通透性降低,使结晶紫-碘复合物被保留在CW内而不易脱色,因此呈蓝紫色。G-的CW中肽聚糖含量低,脂类物质含量高,当用乙醇处理时,脂类物质溶 ...

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影响消毒剂[disinfector作用的因素

(1)消毒剂的性质、浓度与作用时间各种消毒剂的理化性质不同,对微生物的作用大小也差异。例如表面活性剂对革兰氏阳性菌的灭菌效果比对革兰氏阴性菌好,龙胆紫对葡萄球菌的效果特别强。  同一种消毒剂的浓度不同,其消毒效果也不一样。大多数消毒剂在高浓度时起杀菌作用,低浓度时则只有抑菌作用。在一定浓度下,消毒剂对某种细菌的作用时间越长,其效果也越强。若温度升高,则化学物质的活化分子增多,分子运动速度增加使化学 ...

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菌种保藏的几种常用方法

基本原理   微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。   低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。 保藏方法大致可分为以下几种: 1.传代培养保藏法  又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于 ...

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菌种保存方法

微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。   低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。  保藏方法大致可分为以下几种:  1.传代培养保藏法  又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4—6℃冰 ...

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