糖含量测定
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实验原理】
苯酚—硫酸 试剂 与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸起显色反应，己糖在490nm处有最大吸收，吸收值与糖含量呈线性关系。
【实验材料】
1. 实验器材
721型分光光度计。
2. 实验 试剂
(1) 98％ 的浓硫酸。
(2) 80％ 苯酚：80g苯酚加20ml水使之溶解，可置冰箱中避光长期贮存。
(3) 6％ 苯酚：临用前用80％苯酚配制。
(4) 标准葡萄糖溶液（0.1 mg/ml）：取100mg葡萄糖，用蒸馏水溶解，定容至1L。
(5) 多糖样品：半乳葡萄甘露聚糖溶液（0.1 mg/ml）。
【实验操作】
1. 制作标准曲线：
取9支干燥 试管 ，按下表操作
横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，绘制标准曲线。
2. 样品含量测定：
取样品液1.0ml，按上述步骤操作，测光密度。
3．计算:
糖含量(%)=C /（C0× V）×100%
C: 由标准曲线查得的糖微克数
C0：样品溶液的浓度（0.1 mg/ml）
V：测定时用的样品溶液体积（1.0ml）
苯酚—硫酸 试剂 与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸起显色反应，己糖在490nm处有最大吸收，吸收值与糖含量呈线性关系。
【实验材料】
1. 实验器材
721型分光光度计。
2. 实验 试剂
(1) 98％ 的浓硫酸。
(2) 80％ 苯酚：80g苯酚加20ml水使之溶解，可置冰箱中避光长期贮存。
(3) 6％ 苯酚：临用前用80％苯酚配制。
(4) 标准葡萄糖溶液（0.1 mg/ml）：取100mg葡萄糖，用蒸馏水溶解，定容至1L。
(5) 多糖样品：半乳葡萄甘露聚糖溶液（0.1 mg/ml）。
【实验操作】
1. 制作标准曲线：
取9支干燥 试管 ，按下表操作
|
管号 |
0 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
|
标准溶液（ml） |
0 |
0.4 |
0.6 |
0.8 |
1.0 |
1.2 |
1.4 |
1.6 |
1.8 |
|
蒸馏 水（ml） |
2.0 |
1.6 |
1.4 |
1.2 |
1.0 |
0.8 |
0.6 |
0.4 |
0.2 |
|
6％苯酚（ml） |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
|
浓硫酸（ml） |
5 |
5 |
5 |
5 |
5 |
5 |
5 |
5 |
5 |
|
静止10分钟，摇匀，室温放置20分钟 |
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A 490 |
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2. 样品含量测定：
取样品液1.0ml，按上述步骤操作，测光密度。
3．计算:
糖含量(%)=C /（C0× V）×100%
C: 由标准曲线查得的糖微克数
C0：样品溶液的浓度（0.1 mg/ml）
V：测定时用的样品溶液体积（1.0ml）
