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        免疫球蛋白提取技术:IgE的分离与提纯

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        (一)材料与试剂

        1.血清
        2.饱和硫酸铵溶液
        3.洗脱液0.005Mol/L pH7.4PB液
        0.025 Mol/L pH7.4PB液
        0.01Mol/L pH7.4PBS 液(0.14mol/L NaCl)
        4.DE52
        5.SephadexG150

        (二)操作方法

        1.取血清倍比稀释后,加等量饱和(NH4)2SO4溶液,盐析。
        2.离心取沉淀,溶于少量生理盐水中,透析、除盐。
        3.过DE52柱,以0.005Mol/L pH7.4PB液洗脱,收集洗脱蛋白峰(IgG),弃去。
        4.换以0.025Mol/L pH7.4 PB液洗脱,洗下的蛋白峰主要是IgE。
        5.透析除盐。
        6.过G150柱,以0.01Mol/L pH7.4PBS(0.14Mol/L NaCl)洗脱,收集洗脱液即为纯化的IgE。
        7. 浓缩、鉴定。
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