原生质体融合技术（仙台病毒法、聚乙二醇（PEG）法、电融合法）

一、仙台病毒法

仙台病毒诱导细胞融合经四个阶段：

①两种细胞在一起培养，加入病毒，在4℃条件下病毒附着在细胞 膜上。并使两细胞相互凝聚；

②在37℃中，病毒与细胞膜发生反应，细胞膜受到破环，此时需 要Ca2+和Mg2+，最适PH为8.0一8.2；

②细胞膜连接部穿通，周边连接部修复，此时需Ca2+和ATP；

④融合成巨大细胞，仍需ATP 。

病毒促使细胞融合的主要步骤如下：

1.两个原生质体或细胞在病毒黏结作用下彼此靠近；

2.通过病毒与原生质体或细胞膜的作用使两个细胞膜间互相渗透，胞质互相渗透；

3.两个原生质体的细胞核互相融合，两个细胞融为一体；