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        【求助】mirna的抑制与过表达

        丁香园论坛

        8296
        想做mirna的抑制和过表达,请问
        1.过表达是否直接转
        >ssc-let-7c MI0002445 stem-loop
        UGUGUGCAUCCGGGUUGAGGUAGUAGGUUGUAUGGUUUAGAGUUACACCGUGGGAGUUAACUGUACAACCUUCUAGCUUUCCUUGGAGCACACU
        2.抑制表达是否是上个stem-loop序列的反义
        还是>ssc-let-7c MIMAT0002151
        UGAGGUAGUAGGUUGUAUGGUU
        的反义

        谢谢
        1.过表达:
        想方便些,可直接购买miR人工合成拟似物,但作用时间可能较短;
        也可以将前体miRNA及上下游百余bp的序列接入表达载体,再行转染。当然,直接做前体也可以过表达,但这么做的比较少。
        2.抑制或敲减:
        人工合成的有LNA,PNA,2-o-methyl及吗啉代等;
        也可以用质粒或慢病毒过表达成熟miRNA的翻译序列,如“Sponges”策略,可在园内或pubmed上搜一下。
        非常感谢

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

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