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        免疫胶体金银细胞化学染色的固定剂选择

        互联网

        1095
          一、固定剂的选择及固定时间(详见表5-9)
          (1)Karovsky's 液pH7.3。
          (2)PAP液(Periodate—lysine – paraformaldehyde fixative)
          配制见附录一。
        表5-9 各种抗原固定剂的选择及固定时间
        待检抗原 固定剂的种类 固定时间
        蛋白质
        冰冻切片不固定,或用95%乙醇,B 5 固定液 10 min
        激素 冰冻切片,涂片,印片,不固定或丙酮,甲 10 min
        醇,乙醇,PEG固定,B 5 固定液固定 4 30 min
        免疫球蛋白 中性福尔马林,四氯化碳(1%甲醛) 30 min
        白蛋白 95%乙醇含1~5%冰醋酸 30 min
        纤维蛋白元 同上 30 min
        病毒 丙酮,100%乙醇,甲醇,乙醚 30 min
        糖蛋白 PLP,丙酮 30 min
        脂质Forssman 中性福尔马林 20 min
        抗原 2.5%硫代硫酸钠,冰冻切片不固定 20 min
        免疫电镜 PLP,戊二醛,戊二醛—多聚甲醛(Kacnovsky’s 液pH7.3)PEG、ECD-G等 30min
        二、切片的处理与粘附。

        免疫组化染色过程较长,洗的次数很多,而且均在振荡洗涤,抗原片附贴不紧,往往在最后的时刻,还没有等显色就会脱落导致前功尽弃,这个环节 虽小却会影响大局,因此,为了保证切片染色成功必须把切片处理好,解除掉片的后顾之忧

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