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        实验动物免疫方案

        互联网

        1852

         

        实验动物免疫方案

        1 、抗原 : 蛋白质、多肽、细胞器、细胞、组织等。

        2 、免疫方式: 皮下注射、腹腔注射、静脉注射、肌肉注射等

        3 、不同动物免疫所需抗原量(以蛋白免疫为例)

        >18-20kDa                  <18-20kDa

        动物     抗原量    最佳抗原量     抗原量    最佳抗原量

        兔子     20-200        100         50-400       200

        小鼠     2-40          15           4-60         40

        大鼠     10-50         30          20-150        50

        绵羊    100-1000       200         200-1000      400

        母鸡     20-200        100          50-400       200

        单位:微克

        4 、免疫方案(以免疫兔子为例):

        天数    0       14       28       38      56      66        87

        注射    x        x        x                x

        采血   2ml                        2ml           2+20ml     2+50-70ml

        5 、注意:

        1)第一次免疫用完全佐剂与免疫原混合,以后加强免疫用不完全佐剂与免疫原混合,采取多点,时间间隔式免疫法。

        2) 如果用细胞免疫兔子,那么每次免疫所需细胞量为2-3 x 107 cells。

        3) 在连续免疫完三次后,需要少量取血进行ELISA检测,检测所免疫动物的抗体滴度,一般滴度能达到1:10,000-50,000。在处死所免疫的动物前一周应加强一次免疫。

        4) 如果用小鼠免疫,可以尾静脉小量采血(大约50µl),最后取眼球大量采血(大约500-1000µl);如果用兔子免疫,可以耳缘静脉小量取血(大约2mL),最后心脏大量取血(50-100mL)

        5) 按血清制备的标准方法将血清分离,并且分装成小份,储藏在-80o C。

         

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