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        PAR-1 Staining Procedure

        互联网

        2280

         

        <center> <b><font>PAR-1 Staining Procedure</font> </b></center>

         

         

        <center> <hr /> </center>

         

        • Freeze Fracture to permeabilize embryos
        • Fixation

          15' in -20 degree 100% MeOH

          1 x 10' wash in PBS

        • Staining

          1 x 60' block in goat serum

          1 x 60' primary antibody (rabbit-anti-PAR-1 in 1% BSA, 10% serum in PBS) -- optionally incubated 4 hours @ 16 degrees C

          1 x 10' wash in PBS

          1 x 10' wash in PBS + 0.5% Tween

          1 x 10' wash in PBS

          1 x 1 hr secondary antibody (1:00 to 1:200)

          1 x 10' wash in PBS

          1 x 10' wash in PBS + 0.5% Tween

          1 x 10' wash in PBS

          Reference: Guo, S. and Kemphues, K., 1995, Cell 81:611-620

         

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