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        生物资源保存冷冻干燥管之开管说明

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        1110
        下列步骤请在无菌环境下操作:
        1、以沾有70%酒精的棉花,擦拭外管,在火焰上加热外管之尖端。
        2、滴数滴无菌水于加热处,使外管破裂,再以硬棒敲破尖端。
        3、取出隔热纤维纸和内管,以灭菌过的镊子取出内管之棉塞。
        4、( a ) 适用于细菌
        用无菌吸管,吸取0.3-0.5 ml指定之液体培养基,滴入内管内,并轻微震荡(可用该吸管协助),直到均匀悬浮。
        ( b ) 适用于霉菌、酵母菌
        用无菌吸管,吸取0.3-0.5 ml无菌水,滴入内管内,待干燥粉末溶解后,以无菌吸管吸取并滴入约含有5ml无菌水之试管内,轻微震荡使其均匀后,静置30至60分钟。
        5、取0.1-0.2 ml之菌体悬浮液于指定的平板培养基上,做划线分离培养或做成一系列之稀释,用无菌L型玻棒均匀涂抹,以检验菌种之纯度及活化情形,而剩余的菌体则全部移入指定的液体培养基内,并依指定的温度培养之。
        6、某些菌种经过冷冻干燥保存后,迟滞期 ( lag period ) 较长,必须等培养二倍时间后才能长出,且再经过一、二次继代培养 (Subculture) 后才能正常生长。经过以上的努力后仍培养失败,才视为不能活化。
        7、若菌种未能活化,或活化之菌落有疑问时,请于收到菌种之一个月内,以问题菌株反应单传真至本中心,即进行处理。
        8.未开封之冷冻干燥管,请冷藏于4℃冰箱,切勿冷冻保存。

         

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