组织培养再生

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步骤一：接种

　　组织培养的接种是指将灭过菌的材料，在无菌的情况下，切成小块，放入培养基的过程。科研、生产部门的接种工作，多在无菌室或超净工作台上进行，中学可制作接种箱，在箱内进行接种。接种的方法步骤如下：

　　①在无菌室或接种箱中放好接种时所需要的酒精灯、贮存70%酒精和棉球的广口瓶、各种镊子、接种针、解剖刀、手术剪、火柴、培养基等。

　　②在无菌室或接种箱内用紫外灯灭菌（无菌室照射20～50分钟，接种箱照射15分钟）。

　　③放入已灭菌的接种材料（用培养皿盛取）。同时，操作人员用酒精棉球擦手，并对接种工具用酒精灯火焰烧灼。

　　④用手术刀片将材料切割成若干片段，并迅速接种入培养基中。接种时，锥形瓶（或试管）应斜向火焰，在酒精灯火焰附近操作。

　　⑤材料接种好后，将锥形瓶瓶口在酒精灯火焰上转动烧一遍，盖好瓶盖，注明材料名称及接种日期。

　　材料接种后，应置于26～28℃的培养室中进行培养。

 

步骤二：植株诱导

 

<center> <p>  </p> <p> 　　本阶段是组织培养中最重要的一环。在培养基中<u>植物</u> 激素的作用下，外植体通过三条途径迅速增殖，这就是侧芽增殖、诱导不定芽的形成和诱导胚状体的形成。</p> <p>  </p> <p>  </p> <p> <b>侧芽增殖</b></p> <p> 　　种子植物的每个叶腋中通常都存在着腋芽，在一定条件下可以使它生长。现在知道顶端优势抑制侧芽生长，可被外源的<u>细胞分裂</u> 素打破，所以在利用侧芽增殖这条途径时，培养基中几乎都要加入细胞分裂素（有时也加入少量生长素）。由于细胞分裂素的持续作用，侧芽不断分化和生长，逐渐形成芽丛。如果反复切割和转移到新的培养基上继代培养，就可在短期内得到大量的芽。</p> <p> 　　侧芽增殖的主要优点是能保持遗传的稳定性，因为茎尖的细胞常是均一的二倍体细胞，它不易受培养条件的影响而发生变异，也易于保持嵌合体的性状。目前已有近百种植物可以用这种方法进行繁殖，如草毒（Fragaria ananassa Duch.）、苹果、葡萄（Vitis vinifera L.）、唐菖蒲（Gladiolus gandavensis Houtt.）、非洲菊、月季（Rosa chinensis Jacq.）、甜菜（Beta vulgaris L.）和凤梨</p> </center>