大白鼠胃液分泌的调节

[实验目的]
　　学习测定胃液分泌的实验方法，观察胃的泌酸功能及其分泌的调节。
[实验原理]
　　胃液的分泌主要受神经与体液调节。迷走神经、胃肠激素（胃泌素）、组织胺及拟胆碱药物促进胃液的分泌，阿托品阻断迷走神经的促胃液分泌的作用而抑制胃液的分泌。
[实验对象]
　　大白鼠
[实验药品]
　　乙醚、3%戊巴比妥钠、生理盐水、0.01 mol·L ^-1 NaOH、1%酚酞、0.5 mg·m1 ^-1 阿托品、0.01%磷酸组织胺、1 mg·ml ^-1 毛果芸香碱、甲氰咪胍（组胺拮抗剂）。
[ 仪器 器械]
　　常用手术器械、刺激器、止血钳、直径2～3 mm长约细塑料管、纱布、碱式 滴定管 、支架、2 ml及5 m1注射器、100 ml锥形瓶、保护电极、棉线。
[实验方法与步骤]
　　1.实验准备
　　(1)取体重350 g以上的大白鼠两只，预先禁食18～24 h，自由饮水。实验时，腹腔注射3%戊巴比妥钠溶液(40～50 mg·（kg体重）-1)麻醉动物，背位固定于手术台上。
　　(2)颈部剪毛，作长约2.0 cm的皮肤切口，分离肌肉，找出气管，行气管插管术。
　　(3) 剪去上腹部的被毛，自剑突起沿腹部正中作一个长约3 cm的切口，沿腹白线剖开腹腔，在左上腹内找到膈后食管、胃和十二指肠。将胃移至腹腔外蘸有生理盐水的纱布垫上。在膈下食管的左右分离迷走神经，穿线备用。
　　(4)在食管和贲门交界处，迷走神经的下方穿一根棉线，打一个活结套，在十二指肠和幽门交界处穿二根棉线，结扎十二指肠端棉线。在颈部食管剪一小口，向胃端插入一根游离端连有8号针头的塑料管，导管深入胃1cm左右(用手指在胃表面可触摸到胃内的塑料管，以判断插入的深度)，用线结扎固定，此插管用来向胃内注入生理盐水；在十二指肠近幽门端剪一小口，插入塑料导管，深入胃1cm，结扎固定，用于收集胃液(图9.8-1)。
　　2.实验项目
　　(1)用注射器将38℃的生理盐水从食道插管注入，冲洗胃腔，直至流出液澄清无残渣为止。用蘸有温热生理盐水的纱布覆盖创面。可用白炽灯照射给动物保温。30 min后，用5 ml生理盐水冲洗胃腔，连续冲洗3次，每次2 min，洗出液收集于锥形瓶内，共收集3个样品。收集液作为正常状态下的泌酸量。以酚酞为指示剂，用0.01 mol·L ^-1 NaOH溶液滴定每次所收集的胃液样品，将中和胃酸所用去的NaOH 量（L× mol NaOH），换算成μmol·(L·2 min)-1数，即为胃液的分泌量。
　　(2)用连续电脉冲刺激迷走神经，每次持续5 s，间隔20 s重复刺激多次。30 min后收集胃洗出液，采用滴定法测定每一个样品中的胃酸含量。
　　(3)切断迷走神经，30 min后同法收集胃洗出液，应用滴定法测定每一个样品中的胃酸含量。
　　(4)收集对照样品后，立即皮下注射磷酸组织胺(1 mg·（kg体重）-1)，30 min后收集胃洗出液，连续收集3个样品，应用滴定法测定每一个样品中的胃酸含量。
　　(5)肌肉注射甲氰咪胍（250 mg·(kg体重)-1）收集3个样品后，再皮下注射磷酸组织胺(1 mg·（kg体重）-1)，连续收集3个样品，应用滴定法测定每一个样品中的胃酸含量。
　　(6) 收集对照样品后，立即皮下注射五肽胃泌素（100μg·(kg体重)-1），收集胃洗出液，连续收集3个样品，应用滴定法测定每一个样品中的胃酸含量。
　　（7）收集对照样品后，立即皮下注射毛果芸香碱0.5 ml，收集胃洗出液，用滴定法测定每一个样品中的胃酸含量。
　　（8）另取一只大白鼠，手术同前。按实验项目(2)的方法刺激两侧迷走神经、收集胃洗出液及测定胃酸含量，并以此胃酸含量作为对照。然后给大白鼠皮下注射阿托品(1～2 mg·(kg体重)-1)，5 min后，再重复实验项目(2)的方法刺激两侧迷走神经，30 min后收集胃洗出液，测定胃酸含量。
[注意事项]
　　1.大白鼠不宜麻醉过深，以免对胃液分泌量影响太大。
　　2.大白鼠的迷走神经很细，分离和刺激时要十分小心谨慎。
[实验结果]
　　上述各项，每一小组只做1～2项，每一项样品测定完成后，需绘曲线图表示，以胃酸排出量为纵坐标，时间为横坐标剪头表示注射药物的时间，并加以说明。各组可互相交换实验结果及所绘制的曲线。然后进行全面总结。