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        生化实验基本操作技术

        互联网

        910

        一:玻璃 仪器 的洗涤及干燥:
        (一) 意义:去除干扰物,提高实验结果的准确性。
        (二) 常用洗涤剂:
        1. 洗衣粉,肥皂,洗洁精,去污粉----用于一般去污。
        2. 强酸,强碱,尿素------去除蛋白质,核酸。
        3. 铬酸洗液------见附2。
        4. 水(自来水,蒸馏水)------用来冲洗容器。
        (三) 洗涤方法:
        ~undefined 洗涤程序:泡→洗(→泡)→冲→漱
        1. 新 仪器 的洗涤:
        2%的盐酸浸泡数小时→自来水冲净→洗涤剂溶液中浸泡过夜→试管刷蘸肥皂、洗衣粉或去污粉擦洗容器内外壁→自来水冲10 遍→蒸馏水漱洗
        内壁3 遍→包装、消毒→干燥备用。
        2. 非定量敞口仪器的洗涤(试管、烧杯等)用后立即放入洗涤剂溶液或清水中浸泡过夜→试管刷蘸肥皂、洗衣粉或去污粉擦洗容器内外壁→自来水冲10 遍→检查是否洗净→蒸馏水漱洗内壁3 遍→包装、消毒→干燥备用。
        注意:检查毛刷顶部是否裸露,洗刷时用力不可过猛,以免戳破玻璃仪器。
        3.窄口仪器的洗涤(容量瓶、 试剂 瓶)
        使用后立即在洗涤剂溶液或清水中浸泡过夜→洗涤剂溶液倒入容器内(约1/4)→小心转动或摇动仪器→自来水冲10 遍→检查是否洗净→蒸馏水涮洗内壁3 遍→包装、消毒→干燥备用。
        4.刻度吸管的洗涤
        使用后立即用大量自来水冲洗(切勿使样品干在管内,否则难以洗净)→干燥后放入铬酸洗液中浸泡过夜→取出,在特制的容器中用自来水冲洗30 分钟→蒸馏水涮洗内壁3 遍→包装、消毒→干燥备用。
        (四) 判断洗净的标准:
        洗净的玻璃仪器管壁光洁、清亮,无污渍;被水湿润后,管壁呈现均匀水膜,无挂水珠。
        (五)干燥方法
        1、 晾干:仪器倒立放在特制架子上,自然晾干。
        2、 烘干:尽量倒净仪器内部的水,将其倒立放在托盘上,放入烘箱烘干。普通仪器用80-100℃,容量分析仪器用37-40℃。
        3、 有机溶剂干燥:体积小的容器急需干燥时,可用此法。洗净的仪器先用少量酒精洗一次,再用少量丙酮或乙醚洗涤,吹干(不必加热)。

        二:吸管和微量移液器的使用及注意事项:
        (一) 刻度吸管:
        1. 作用:用于准确移取一定体积的溶液。
        2. 规格(ml):0.1,0.2,0.5,1.0,2.0,5.0,10.0。
        3. 注意事项:
        1) 使用前:
        ① 观察吸管有无破损,污渍。
        ②观察吸管的规格:所用吸管的规格应等于或近似等于所要吸取的溶液的体积。
        ③观察有无“吹”字:若有,说明刻度到尖端,放液后需将尖端的溶液吹出,否则不吹。
        2) 握法:拇指和中指夹拄吸管,食指游离。
        3) 取液:①垂直入液 ②入液深度适中 ③洗耳球吸取 ④取液高度高于刻度2-3cm ⑤食指按紧吸管
        上端⑥刻度吸管提离液面⑦观察液内无气泡⑧滤纸擦净管壁。
        4) 放液至刻度:①刻度吸管垂直②右眼与刻度线平行③轻轻松开食指(转动刻度吸管),使液面缓慢降低,直至最低点与刻度线相切。
        5) 放液至容器:①刻度吸管垂直②容器倾斜45℃③使溶液自然流入容器,注意吹与不吹。
        6) 一根吸管只吸取一种 试剂 ,用后立即浸入水中。
        (二) 微量移液器
        1、 作用:
        用于准确移取一定体积的溶液,尤其是较小体积
        的溶液(<100ul)。
        2、 规格:
        固定式、可调式;单道、多道
        1,2,10,20,100,200,1000(单位:ul)
        3、 注意事项:
        1) 使用前:
        ①连续按压数次,以调节空气。
        ②调节体积至所需的刻度。
        ③接上Tip 头,注意密封。
        2) 握法:手掌握住器液器,拇指按压。
        3) 取液:①轻压拇指至第一停点 ②垂直握持移液器,使Tip 头浸入溶液 ③预洗一次 ④缓慢松开按钮,吸取溶液⑤等一秒钟,将移液器提离液面,擦去Tip 头外液滴。
        4) 放液:①Tip 头贴住容器内壁 ②平稳地把按钮压至第一停点,等1 秒钟再压至第二停点③提起移液器,Tip 头贴容器壁擦过④松开按钮。
        5) 如吸取不同溶液必需更换Tip 头。

        三:电动离心机的使用:
        (一) 作用:分离密度不同的物质。
        (二)分类:低速离心机 <4000rpm
        高速离心机 6000-20000rpm
        超速离心机 >20000rpm
        (三) 使用:
        1、 开机:
        ① 将待离心溶液倒入大小适中的 离心管 中(溶液量不应超过 离心管 总体积的2/3)
        ② 离心管连同管套一起放在粗天平上平衡(管套底部应放置橡皮垫)
        ③ 对称放入 离心机 插孔中(不用的管套应拿出),盖紧上盖。
        ④ 开关置于“关”,调速杆置于最小(逆时针旋转至转不动,接通电源,打开开关,缓慢启动。
        ⑤ 用调速杆沿顺时针方向缓慢调速,观察转速,达到转速后开始计时。
        2、 关机:
        ① 用调速杆将沿逆时针方向缓慢降速,关掉开关,切断电源。
        ② 停转后打开上盖,轻轻取样。
        ③ 离心管 套倒立放置,使其干

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