• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        总糖和还原糖的测定:3,5-二硝基水杨酸法

        互联网

        8099

        目的要求

        掌握还原糖和总糖的测定原理,学习用比色法测定还原糖的方法。

        实验原理

        在NaOH和丙三醇存在下,3,5-二硝基水杨酸(DNS)与还原糖共热后被还原生成氨基化合物。

        在过量的NaOH碱性溶液中此化合物呈桔红色,在540nm波长处有最大吸收,在一定的浓度范围内,还原糖的量与光吸收值呈线性关系,利用比色法可测定样品中的含糖量。

        一、 试剂

        3,5-二硝基水杨酸(DNS) 试剂 :称取6.5g DNS溶于少量热蒸馏水中,溶解后移入1000mL容量瓶中,加入2mol/L氢氧化钠溶液325mL,再加入45g丙三醇,摇匀,冷却后定容至1000mL。

        葡萄糖标准溶液:准确称取干燥恒重的葡萄糖200mg,加少量蒸馏水溶解后,以蒸馏水定容至100mL,即含葡萄糖为2.0mg/mL。

        6mol/L HCl:取250mL浓HCl(35%~38%)用蒸馏水稀释到500mL。

        碘-碘化钾溶液:称取5g碘,10g碘化钾溶于100mL蒸馏水中。

        6mol/L NaOH:称取120g NaOH溶于500mL蒸馏水中。

        0.1% 酚酞指示剂。

        二、材料

        藕粉,淀粉。

        三、器材

        试管 1.5×15cm(×13), 3.0×20cm(×1);移液管0.2mL(×2),0.5mL(×2),1mL(×5), 10mL(×1);水浴锅;电炉;分光光度计。

        操作方法

        一、 葡萄糖标准曲线制作

        取6支1. 5 cmm×1.5cm 试管 ,按下表加入2.0mg/mL葡萄糖标准液和蒸馏水。

        管号

        葡萄糖标准液(mL)

        蒸馏水(mL)

        葡萄糖含量(mg/mL)

        A540

        0

        0

        1

        0

         

        1

        0.2

        0.8

        0.4

         

        2

        0.4

        0.6

        0.8

         

        3

        0.6

        0.4

        1.2

         

        4

        0.8

        0.2

        1.6

         

        5

        1

        0

        2

        在上述试管中分别加入DNS试剂2.0mL,于沸 水浴 中加热2min进行显色,取出后用流动水迅速冷却,各加入蒸馏水9.0mL,摇匀,在540nm波长处测定光吸收值。以葡萄糖含量(mg/mL)为横坐标,光吸收值为纵坐标,绘制标准曲线。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序