“中国葡萄属植物野生种抗白粉病基因克隆”项目通过鉴定

   据《科学时报》2007年1月5日报道：由西北农林科技大学博士生导师王跃进教授主持完成的国家转基因植物研究与产业化开发专项“中国葡萄属植物野生种抗白粉病基因克隆 ”研究项目，经过6年的探索研究，近日在陕西杨凌通过了国家教育部组织的鉴定。与会专家一致认为：该课题针对世界葡萄生产中存在的问题，综合采用现代分子生物学技术，以我国特有的高抗白粉病的中国葡萄属野生种华东葡萄白河-35-1为材料，在抗白粉病基因克隆 与功能分析、cDNA文库构建和相关EST克隆 以及转基因植株培育等方面具有明显的创新性，研究成果居国际领先水平。

    我国是世界葡萄属植物最重要的原产地之一，拥有丰富多样的野生葡萄资源，这些资源不仅丰产性好，与欧洲葡萄杂交易亲和，而且不携带美洲葡萄的“狐臭味”，对主要真菌病害具有极强的抗性，是重要的抗病基因资源。

    为了利用我国野生葡萄的抗病基因并通过转基因技术培育抗病优质葡萄新品种，王跃进教授率领的科研项目组开展了如下工作：一是首次采用mRNA差异显示技术，从高抗葡萄白粉病的中国葡萄属野生种华东葡萄白河-35-1中获得了抗白粉病相关基因cDNA片段20个；采用抗病基因同源序列的方法获得了抗病相关基因cDNA片段7个。二是首次从中国葡萄属野生种华东葡萄白河-35-1中克隆 了抗白粉病芪合成酶基因家族成员6个、乙二醛氧化酶基因1个、抗坏血酸过氧化物酶基因1个、醛脱氢酶基因家族成员3个、病程相关蛋白基因1个、几丁质酶基因家族成员2个，共计14个基因。科研人员对这些基因进行了体外表达研究，分离纯化了基因的表达产物，制备了多克隆 抗体。三是构建了抗白粉病相关基因表达载体，采用农杆菌介导的方法，对欧洲葡萄无核白、底来特和爱莫无核的叶片，以及爱莫无核胚珠诱导的胚性愈伤组织和胚状体进行了遗传转化，获得转基因葡萄植株56株。四是构建了中国葡萄属野生种华东葡萄白河-35-1抗白粉病基因cDNA文库，获得了抗白粉病基因相关ESTs序列145个，其中抗白粉病相关基因cDNA全长序列17个，并首次发现抗白粉病相关新基因5个；首次获得中国葡萄属野生种抗病候选基因cDNA片段47个。

    据了解，西北农林科技大学此次所获得的中国葡萄属野生种抗白粉病相关基因和中国葡萄属野生种抗病候选基因DNA片段47个、抗白粉病基因相关ESTs序列145个，对我国和世界葡萄研究具有重要实践意义，同时对获得具有我国自主知识产权的新品种具有重要意义。

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