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        液相色谱柱使用及保养

        互联网

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            液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成,其中液相色谱柱的正确安装和使用,是液相色谱工作的关键;也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路。

            一、液相色谱柱的安装:
            1、液相色谱柱的结构:

            a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。

            柱接头采用低死体积结构,柱接头是两端螺纹组件,一端是为7/16英寸外螺纹,另一端是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管(Φ6.35mm)连接,中间放置压坏用于密封。3/16英寸的内螺纹与1/16英寸(Φ1.57mm)的连接管连接,中间也放置压环用于柱接头的密封。为了尽量减少柱外死体积,在安装色谱柱时,用Φ1.57mm连接管通过空心螺钉压环后要尽量插到底,然后再拧紧空心螺钉。压环被空心螺钉挤压变形后紧箍在连接管上(连接管通过压环后露出的管长度应严格控制在2.5mm长或其他固定尺寸)。

            在两端柱接头内,柱管两端各放置一片不锈钢滤片(或滤网),用于封堵柱填料不被流动相冲出柱外而流失。空柱各组件均为316#不锈钢材质,能耐受一般的溶剂作用。但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性,故使用时要注意,柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂,以避免腐蚀。

            b、柱填料:

            液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的,柱子的分类是依据填料类型而定。

            正相柱:多以硅胶为柱填料。根据外型可分为无定型和球型两种,其颗粒直径在3―10 μm的范围内。另一类正相填料是硅胶表面键合―CN,-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。

            反相柱:主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。

            常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等,其颗粒粒径在3―10 μm之间。

            2,色谱柱的安装:

            a、拆开柱包装盒,确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。

         

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