• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        高效毛细管电泳分离模式

        互联网

        1768

        分离类型
        八种分离类型,介绍常用的几种;
        根据试样性质不同,采用不同的分离类型;
        每种机理的选择性不同;
        一,毛细管区带电泳
        capillary zone electrophoresis ,CZE
        带电粒子的迁移速度=电泳和电渗流速度的矢量和.
        正离子:两种效应的运动方向一致,在负极最先流出;<BR>中性粒子:无电泳现象,受电渗流影响,在阳离子后流出;
        阴离子:两种效应的运动方向相反;ν电渗流 &gt;ν电泳时,阴离子在负极最后流出,在这种情况下,不但可以按类分离,同种类离子由于差速迁移被相互分离.
        最基本,应用广的分离模式;
        二,毛细管凝胶电泳
        capillary gel electrophoresis ,CGE
        将聚丙烯酰胺等在毛细管柱内交联生成凝胶.
        其具有多孔性,类似分子筛的作用,试样分子按大小分离.能够有效减小组分扩散,所得峰型尖锐,分离效率高.
        蛋白质,DNA等的电荷/质量比与分子大小无关,CZE模式很难分离,采用CGE能获得良好分离,DAN排序的重要手段.
        特点:抗对流性好,散热性好,分离度极高.
        无胶筛分技术:采用低粘度的线性聚合物溶液代替高粘度交联聚丙烯酰胺.柱便宜,易制备.
        三, 胶束电动毛细管色谱(MECC ,MEKC)
        1.缓冲溶液中加入离子型表面活性剂,其浓度达到临界浓度,形成一疏水内核,外部带负电的胶束.
        在电场力的作用下,胶束在柱中移动.
        2. 电泳流和电渗流的方向相反,且ν电渗流 &gt; ν电泳 ,负电胶束以较慢的速度向负极移动;
        3.中性分子在胶束相和溶液(水相)间分配,疏水性强的组分与胶束结合的较牢,流出时间长;
        4.可用来分离中性物质,扩展了高效毛细管电泳的应用范围;
        四,毛细管等电聚焦
        1. 根据等电点差别分离生物大分子的高分辨率电泳技术;
        2. 毛细管内充有两性电解质(合成的具有不同等电点范围的脂肪族多胺基多羧酸混合物),当施加直流电压(6~8V)时,管内将建立一个由阳极到阴极逐步升高的pH梯度;
        3. 氨基酸,蛋白质,多肽等的所带电荷与溶液pH有关,在酸性溶液中带正电荷,反之带负电荷.在其等电点时,呈电中性,淌度为零;
        4. 聚焦:具有不同等电点的生物试样在电场力的作用下迁移,分别到达满足其等电点pH的位置时,呈电中性,停止移动,形成窄溶质带而相互分离;
        5. 阳极端装稀磷酸溶液,阴极端装稀NaOH溶液;
        6. 加压将毛细管内分离后的溶液推出经过检测器检测;
        7. 电渗流在CIEF中不利,应消除或减小.
        五,毛细管等速电泳
        1. 将两种淌度差别很大的缓冲液分别作为前导离子(充满毛细管)和尾随离子,试样离子的淌度全部位于两者之间,并以同一速度移动.
        2. 负离子分析时,前导电解质的淌度大于试样中所有负离子的.所有试样都按前导离子的速度等速向阳极前进,逐渐形成各自独立的区带而分离.阴极进样,阳极检测.
        3. 不同离子的淌度不同,所形成区带的电场强度不同(ν=μE),淌度大的离子区带电场强度小;
        沿出口到进口,将不同区带依次排序1,2,3,4 电场强度依次增大.假设"2"号中离子扩散到"3"号,该区电场强度大,离子被加速,返回到"2"区;当"2"号中离子跑到"1"号区,离子被减速使之归队;
        4. 特点:界面明显,富集,浓缩作用;
        六,毛细管电渗色谱
        在毛细管壁上键合或涂渍高效液相色谱的固定液,以电渗流为流动相,试样组分在两相间的分配为分离机理的电动色谱过程。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序