【共享】抗原抗体检测的影响因素

1.1 抗原的检测
检测抗原的免疫分析常用于感染性疾病的检测。病原体感染的快速检测可以防止疾病的扩散和增加对疾病流行病学的理解。对于一些感染原，免疫分析只能给出经验性的诊断。对其它的一些病原，在较短时间内就可以给出特异性的诊断。
不同抗原表位和相关抗体出现的检测，有助于感染期的判断，如，梅毒和腺病毒感染。在一些情况下，特定表位的研究也可以用于确定病原体新菌株的出现。
病原或病原抗原的免疫分析应该考虑几个潜在的问题：
1.1.1 表位
分析使用的抗体应该检测一直出现的表位，并且还要有病原体特异性。缺乏对此类表位的了解是阻碍可靠免疫分析研发的一个主要因素。
1.1.2 抗原浓度
不同病人和相同病人不同样本的抗原浓度有很大不同，有时相差几个数量级。抗原浓度过低，如果低于分析的检出限，则会产生假阴性结果；倘若浓度过高又会产生后带现象，从而低估抗原的含量。
1.1.3 基质效应
病人的样本有多种来源（如，血、尿、脑脊液和脓），并且不同病原提供的样本也不同。基质的不同对分析的性能影响较大。
1.1.4 样本的处理
许多病原体和抗原是易变的，即，对PH、温度、大气压以及白细胞或细菌性污染物的存在非常敏感。相同分析的不同样本和不同分析的相同样本的处理方法可能不同，应该详细说明处理的要求并要严格遵守。
1.2 抗体的检测
感染原抗体的免疫分析也很重要（1）确定病人是否已经接触了病原体和已经对其产生了抗体；（2）评价一个人对感染和免疫接种的免疫反应状态；（3）确定疾病是否被控制了；和（4）研究疾病在人群中的蔓延和流行。
在许多方面，抗体的分析比抗原的分析存在的问题少。首先，样本一般只用血清、血浆或脑脊液，所以基质的问题可能不会存在。其次，浓度通常变化不大，所以分析很少出现抗原或抗体过量。
抗体分析存在的问题，包括：
1.2.1 IgG抗体
免疫球蛋白G（IgG）的出现说明机体的感染不是当前的、活动期的感染而是先前的感染。 所以，IgM抗体的检测或几个星期后IgG水平（效价或其它检测）的检测对疾病的诊断是有用的（后者是回顾性的）。由于两次检测分析的反应性不同，配对样本应该在同一时间检测；如果需要在开始就检测样本，可以分装冻存一定量的未处理样本然后与后来得到的样本一起检测。
1.2.2 IgM抗体
许多检测IgM抗体的分析是不可靠的，这些分析只检测IgM或与IgG一起检测。尤其是后者，在分析临床样本之前，厂商和实验室应该利用只包含IgM抗体的样本充分证明分析的性能。
1.2.3 抗体水平
严重感染和免疫抑制药物的治疗，可以导致抗体水平低于分析检出限以下。从而导致感染了病原的病人出现假阴性。另外，抗体的水平可能不与感染的严重性、免疫程度或病人免疫系统产生免疫反应的能力有相关性。
1.2.4 溶菌抗原
在检测抗体的分析中，如果用病原体的原始溶菌产物做抗原的话，会产生非特异性的干扰。纯化抗原或使用重组抗原，可以在不影响敏感性的情况下提高分析的特异性。