【求助】真菌DNA提取
丁香园论坛
3657
我现在做的是真菌DNA提取，后面用来做PCR的模板，用的是生工的提取盒。
今天刚刚做了，不知道做的对不对？最后出来的是一点点像白色沉淀似的东西，然后我用TE缓冲液溶解，但是不知道怎么样属于溶解好了。而且如何测定DNA的浓度呢？
我用的是液体培养基，但是不知道怎样把菌丝取出来，想请教一下各位，怎样在液体培养基上取出菌丝？
今天刚刚做了，不知道做的对不对？最后出来的是一点点像白色沉淀似的东西，然后我用TE缓冲液溶解，但是不知道怎么样属于溶解好了。而且如何测定DNA的浓度呢？
我用的是液体培养基，但是不知道怎样把菌丝取出来，想请教一下各位，怎样在液体培养基上取出菌丝？
真菌DNA的溶解和浓度测定应该与质粒一样道理。高速离心或滤膜过滤可以获得菌丝。
不好意思，高速离心到底怎么做啊？转速多少？多长时间？是不是将整个的液体培养基倒入EP管中？离心以后取哪部分？
真菌菌丝一般 用12000 rpm，4℃离心5 min左右就可以了把。
还有一种办法就是直接用冷冻干燥的方式将菌液冻干，效果也不错。
DNA浓度可以用微量的风光光度计测定吧，或者通过电泳分析之后与MARKER的亮度进行比较分析个大概。。因为MARKER的浓度是确定的。
还有一种办法就是直接用冷冻干燥的方式将菌液冻干，效果也不错。
DNA浓度可以用微量的风光光度计测定吧，或者通过电泳分析之后与MARKER的亮度进行比较分析个大概。。因为MARKER的浓度是确定的。
是不是将整个的液体培养基倒入EP管中？离心以后取哪部分？
为什么要在4℃离心？
为什么要在4℃离心？
离心后肯定要的是沉淀啊，菌体大部分在沉淀一层的
DNA的浓度和纯度怎么计算啊？我查文献说用紫外分光光度计，但是只有样品没有标准品怎么做呢？
本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴
师兄微信号：shixiongcoming
