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        【求助】基因拼接

        丁香园论坛

        1978
        这几天在做基因拼接,看的文章不多,但是发现这个拼接的linker有不同:
        (G4S)n和(S4G)n两种,哪位高手解释一下,这两个有什么区别?
        谢谢!
        发现这么多天了回复仍然是0.主要是
        lz的问题根本很难看懂。什么叫基因拼接?
        是两个基因拼成假基因?重排?还是测序后的序列拼接?
        最好还是把原始文献弄出来看看吧?

        (G4S)n和(S4G)n这两个东西连google都查不到呀。。。
        抱歉,可能我表述不清吧。
        我先分别表达了两个蛋白,现在想把两个蛋白做成融合蛋白,首先就要在分子水平上把蛋白的碱基序列拼接在一起,这就涉及到要用什么样的linker,目前大部分是用Gly4Ser的linker,我看到好几篇文章上选择了Ser4Gly的linker,不知道这两个有什么区别?
        小鼠、斑马鱼ORF/cDNA基因克隆,80多种表达载体,50多种融合标签....
        版主zhujoker留言:
        不要打广告!
        我们实验室做过,建议楼主要同时设计不同长短的linker,Gly和Ser都是侧链很小的残基,所以差别不大,Ser带个羟基,更亲水些。根据我们的经验,linker长度对表达是有影响的,短了可能使两个蛋白之间没有足够的空间,造成空间位阻,太长了柔性太大也有被蛋白酶水解的风险。

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

        【求助】基因拼接

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