• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        【求助】如何选择IκB抗体

        丁香园论坛

        2436
        各位前辈,我接下来的实验要检测NFkB通路的活化状况,现在在订购抗体时遇到了问题:我准备订购IκB Antibody 和Phospho-IκB来反映NFkB通路的活化状况,发现Cell Signaling Technology提供了IκBα ,IκBβ ,IκBε和IκB-ζ和相应的磷酸化抗体,我应该订购那种亚型的抗体呢?希望前辈给于指点。
        你看你要做什么检测IκB抑制的是NF-kB哪两个亚基了。
        比如,国内一般人大多检测的都是p65和p50个二聚体,因为IκBα 是p65和p50个二聚体的天然抑制剂,这个只要做IκBα 和磷酸化IκBα 就可以了。其他的都不用做。一般的文章都是这样做的。
        但是,你要遇到特殊的通路,等等,具体情况要具体对待的。你可以参考这篇文章给你提供的知识
        非常感谢00501101战友!
        (1)直接做IkBa的磷酸化和总蛋白表达就行。看IkBa的磷酸化是否增加,以及IkBa是否降解。

        (2)如果IkBa发上了磷酸化和降解后,在检测下游的NF-kB的激活情况(NF-kB的磷酸化,NF-kB的核转位,NF-kB的报告基因是否激活)

        (3)有条件的话,最好能把IkBa的泛素化也做了,这样数据更丰富。

        (4)建议除了IkBa之外,最好把上游的IKKa/b的磷酸化情况也一同检测了,因为IKKa/b是IkBa的上游激酶,直接调控IkBa的激活,这样做了之后就行形成一条完整的信号通路了。
        学习中

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序