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        高效液相色谱仪色谱柱结构解析

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        色谱柱是高效液相色谱仪的核心部件,色谱柱的柱材料、柱结构、柱规格和柱连接方式等对分析起着关键作用。

        一、柱材料:

        色谱柱管常采用内壁经过精密加工抛光的不锈钢管,以获得高柱效。不锈钢管耐溶剂、水和缓冲溶液的腐蚀,使用前色谱柱管先用氯仿、甲醇和水依次清洗,再用 50% 的 HNO3 对柱内壁作钝化处理。钝化时使 HNO3 在色谱柱管中至少滞留 10 min,以在柱内壁形成钝化的氧化物涂层。

        色谱柱管也采用氟塑料、玻璃和玻璃衬里材料,主要是从抗腐蚀和易加工方面考虑。

        二、柱结构:

        一般色谱柱是由色谱柱管、末端接头、卡套(又称密封环)和过滤筛板等组成。

        三、柱规格:

        —般采用直形柱管,标准填充柱柱管内径为 4.6 mm 或 3.9 mm,长 10~50 cm,填料粒度 5~10um,柱效达 5000~10000 块理论塔板/m。使用 3~5um 填料,柱长可减至 5~10 cm。当使用内径为 0.5~1 mm 的微孔填充柱或内径为 30~50um 的毛细管柱时,柱长为 15~50 cm。

        当使用粗内径短柱或细内径长柱时,应注意柱内体积减小,由柱外效应引起的色谱峰形展宽。柱外效应是指色谱柱之外的造成色谱峰展宽的因素,主要由进样器、检测器及它们与柱之间的连接管路所产生。此时应对进样器、检测器和连接接头作特殊设计,以减少柱外死体积。

        四、柱连接方式:

        柱接头通过过滤片与色谱柱管连接,在色谱柱管的上下两端安装过滤片。过滤片一般用多孔不锈钢烧结材料制成,过滤片上的孔径小于填料颗粒直径,可阻挡流动相 中极小的机械杂质以保护色谱柱,但流动相可顺利通过。柱入口和柱出口的连接管的死体积越小越好,一般常用窄孔(内径 0.13 mm)厚壁(1.5~2 mm)不锈钢管,以减少柱外死体积。
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