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        焦磷酸测序(Pyrosequencing)实验方法及技术

        互联网

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        先进的基于焦磷酸测序(Pyrosequencing)的PSQ96 MA技术平台,能提供基于序列测定的SNP检测、等位基因频率分析和甲基化检测服务。另外,还提供短片段的测序服务(50-100 bp),适用于细菌和病毒分型等研究领域。

        焦磷酸测序(Pyrosequencing)实验方法及技术

        基于Pyrosequencing的SNP分析具有快速、高通量的特点,完成96个样品的SNP分析仅需10分钟。整个实验过程(包括PCR扩增、单链分离、Pyrosequencing测序和数据分析)也只需3-4 小时。 PSQ96 MA配备有功能强大的SNP分析软件,可支持SNP位点的复合检测(在一个反应体系中最多可同时检测3个不同位置的SNP位点)。对于混合样品,则可准确测定特定SNP位点的基因型频率。

        焦磷酸测序(Pyrosequencing)实验方法及技术

        焦磷酸测序(Pyrosequencing)实验方法及技术


        一.常规SNP检测

        样品要求

        用户须提供足够量的基因组DNA样品,一般需200ng/样品/位点。

        二.基于Pyrosequencing技术的甲基化检测服务

        1.甲基化研究意义

        DNA甲基化是最早发现的基因表观修饰方式之一,可能存在于所有高等生物中。DNA甲基化能关闭某些基因的活性,去甲基化则诱导了基因的重新活化和表达。,真核生物中甲基化的主要形式是在DNA甲基化转移酶(DNMTs)的作用下,使CpG二核苷酸5'端的胞嘧啶转变为5'-甲基胞嘧啶。这种DNA修饰方式并没有改变基因序列,但是它参入了基因的表达调控。DNA甲基化在维持正常细胞功能、遗传印记、胚胎发育以及肿瘤发生过程中起着极其重要的作用。

        2.基本流程:

        通过亚硫酸氢盐处理基因组DNA,使其中未甲基化的C转变成T后,运用特异性引物扩增目的区段,然后用Pyrosequencing技术测定目标位点中C/T的比率,以此判断目标位点的甲基化程度。



        焦磷酸测序(Pyrosequencing)实验方法及技术

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