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        注射用青霉素钠家兔热原实验法标准操作规程(SOP)

        互联网

        6113

        名称:注射用青霉素钠家兔热原实验法标准操作规程(SOP)

        关键词:注射用青霉素钠 家兔热原实验法 标准操作规程

        目的:通过家兔热原实验法对注射用青霉素钠进行热原检查

        背景知识:略

        原理:略

        主体内容:

        家兔热原实验法

        (1)试验动物:家兔

        ①供试家兔应健康无伤、肛门正常、毛色光滑,体重1.7~3.0kg,雌雄皆可,雌者无孕,分笼饲养,预测体温前一周应用同一饮料,在此期间,体重应不减轻,精神、食欲、排泄不得有异常现象;

        ②检查供试品前3~7日应以下列试验用兔预测体温,进行挑选:新兔;上次试验升温达0.6℃休息两周以上的试验兔,三周未曾使用的试验兔。挑选试验的条件与检查供试品相同,仅不注射药液,测体温时,体温计插入肛门的深度各兔应相等,约6cm,每1小时测理体温1次,共测4次,体温均在38.0~39.6℃范围内,且最高最低体温的差数不超过0.4℃为符合规定,方可供试验用。每只家兔用于热原试验体温的次数不超过10次;

        (2)试验前的准备工作:

        ①用具的洗涤与灭菌 a 洗涤:注射器、称量瓶用水冲洗后放入清洁液中浸泡,取出用水冲洗干净,再用蒸馏水冲洗至少3次,注射针、称量勺、镊子用水冲冼后,在2%NaNCO 溶液中煮沸10-15分钟,再用不冲洗干净后用蒸馏水冲洗至少3次;b灭菌:将洗干净的注射器、注射针、称量瓶、镊子置于铝盒中,放于250℃加热30分钟,放冷密闭保存备用;

        ②供试品溶液的制备:a精密称取青霉素钠(钾)适量,加灭菌无热原注射用水溶解成每1ml含24mg的溶液;c制备好的供试液放入恒温水浴箱中38℃预热待检;

        (3)操作方法:

        ①将预选合格的家兔装入固定器中,应防止骚动,30分钟后能开始第一次测温;

        ②测温时轻轻提取兔尾,将有润滑剂的肛门温度计缓缓插入肛门,至少2分钟后温度计读数、记录;

        ③间隔30~60分钟后,第二次测温,同一只家兔两次预测体温之差不得超过0.2℃方可作试验用,以再次体温的平均值作为该兔的正常体温。当日使用的家兔体温应在38~39.6℃的范围内;

        ④将试验兔分组,初试3只,复试5只,组内各兔正常体温之差不得超过1℃;

        ⑤预测体温后15分钟内自兔耳静脉缓缓注入已制备的供试液,注射前用75%的酒精擦兔耳边缘,注射剂量为青霉素钠(钾)注射用每公斤体重0.5ml,氨苄西林钠、注射用氨苄西林钠每公斤体重1ml,注射后用手捏住针眼处,以助止血,每批供试品可用同一支注射器;

        ⑥注射完结后,每隔1小时测量体温1次,共测3次,取3次中最后体温减去平均体温,即为该兔体温的升高度数;

        (4)结果判定:

        ①在初试3只家兔中,升温均在0.6℃以下,且3只升温总数在1.4℃以下,或在复试5 只兔中升温0.6℃或0.6℃以上的兔数不超过1只,且初复试合并的8只兔的升温总数不超过3.5℃时为符合热原检查规定;

        ②初试3只兔中,若有1只兔升温0.6℃或0.6℃以上或3只兔升温均低于0.6℃但升温总数达1.4℃或1.4℃以上时应另取5只兔复试;

        ③初试3只兔升温0.6℃或0.6℃以上兔数超过1只或在复试5只升温0.6℃或0.6℃以上兔数超过1只,或在初、复试中合并8兔升温总数超过3.5℃时为不符合热原检查规定;

        (5)注意事项:

        ①热原试验室内外均应保持安静,避免强烈的日光、灯光、噪音及其他刺激;

        ②试验室温度为17~28℃之间,试验过程中,室温变化不超过5℃;

        ③复试时宜取试验次数较少的家兔;

        ④试验过程中,家兔因肛门出血过多造成升温或降温超过规定时,可考虑重试;

        ⑤试验全过程中,不得随意更换肛门温度计。

        主要参考文献:略

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