• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        鱼类胰蛋白酶的提取与活性

        互联网

        3189

        问:我用pH7.0 5mMTris-HCl缓冲液,含5mMCaCl2、0.02%叠氮化纳、0.5MNaCl,在4℃条件下提取黄鳝胰蛋白酶。具体方法是先将内脏打碎,离心,再用BAEE作底物在25℃,247nm处测胰蛋白酶活性,总是无功尔返。

        不知道胰蛋白酶跑哪里去了,是酶失活还是自溶了,甚至是根本就没有分泌胰蛋白酶,怎样进一步保持酶的活性,恳请各位多多指教!本人不胜感激!

        答:原因分析如下:

        1、可能自溶。胰蛋白酶的pH3.0时最稳定,可在低温下贮存数周而不丧失活性;低于此pH时酶容易变性,当高于pH5.0时,酶容易自溶而失去活性。不知道mhyuer904 兄用pH对多少抽提液进行抽提的。最好用pH2.5~3.0的抽提液进行抽提,并且抽提的温度应该控制在0~5℃。也有可能是胰蛋白酶的激活出现问题,激活温度太高?

        2、是不是应该在253nm下测定吸收,BAEE被胰蛋白酶水解后生成BA,BA在253nm处吸收远大于BAEE,专一性比较强。

        3、酶激活过程中,应该严格控制反应的最适pH7.8~8.0。

        答:不直到你哪儿能不能查到相关的文献,我先提供两篇吧,希望对你有用(其实胰蛋白酶没有激活剂也可以自身活化)


        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序