细胞增殖与毒性检测：RTCA技术法
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一、核心技术介绍
实时无标记动态细胞分析技术（RTCA，Real Time Cellular Analysis）是通过特殊工艺，将微电子细胞传感器芯片整合到细胞检测板的底部，用以构建实时、动态、定量跟踪细胞形态和增殖分化等改变的细胞阻抗检测传感系统。
当贴壁生长在微电极表面的细胞引起贴壁电极界面阻抗的改变时，这种改变与细胞的实时功能状态改变呈相关性，通过实时动态的电极阻抗检测可以获得细胞生理功能相关的生物信息，包括细胞生长、伸展、形态变化、死亡和贴壁等。
二、主要仪器及设备
xCELLigence或iCELLigence 细胞功能分析仪及对应的E-Plate检测板、超净工作台、CO2培养箱、低速离心机、移液器、细胞计数板、光学显微镜。
三、实验步骤
1、向E-Plate检测板中加入培养基并测定背景阻抗值。
2、收集对数期细胞并计数，调整细胞悬液浓度，向E-Plate检测板中加入一定 体积的细胞，室温超净台内放置30min。
3、将加入细胞的E-Plate检测板放入检测台上（检测台预先放入培养箱中）， 进行实时动态的细胞增殖检测。
4、过夜检测后，向各培养孔中加入配制好的梯度药物并继续进行实时动态检测， 即可获得化合物介导的细胞效应曲线及不同时间段IC50值。
四、实验结果实例
典型的利用RTCA技术获得的细胞增殖实验检测结果：
利用RTCA技术获得的典型的细胞毒性实验检测结果：
五、与传统方法（MTT）对比优势
1、实验操作简单，步骤少，人为误差小。
2、采用无标记方法，不存在标记效率问题，并且对细胞无损伤，细胞在最接近生理状态下进行检测，结果准确度高。
3、实验结果客观，重复性好，不需设置重复孔（实验操作需规范，如有特殊要求也可设置重复孔）。
4、因预先对基础阻抗值测定，所以无需设置空白对照孔。
5、完整细胞效应图谱，提供大量、重要的动态反应信息。
六、延伸实验
可通过对细胞增殖及毒性的实时检测，确定细胞变化的关键时间点，检测后的细胞样品可用于细胞形态学观察、Western blot、Elisa、细胞凋亡及免疫荧光等细胞检测实验。
