化学发光

化学发光免疫分析与磁珠化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA),是具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合，通过抗原抗体的免疫反应检测各项标志物的免疫分析技术。该技术广泛用于传染病，心脏疾病，肿瘤，妊娠检测等领域。是现阶段体外诊断领域最主流的技术和趋势。磁性微粒（磁珠）是化学发光免疫分析中的一种重要原料。常用磁珠主要是粒径1-3um，修饰了羧基、甲苯磺酰 ...

一、选择荧光标记要匹配荧光直标抗体的一个主要优势在于它为多重检测提供了机会，比如现在一些先进的流式细胞仪能检测每个细胞中 20 多个离散参数。在设计多重实验时，应考虑每种荧光基团的独特性质，如最大吸收波长和最大发射波长，消光系数和斯托克斯位移等因素。对于免疫荧光分析方法，人们要同时检测组织或细胞样本中的多个抗原，常常会利用直标一抗进行免疫荧光共染色，这时一般尽量选择光谱重叠比较少的荧光基团进行组合。比如，我们会选择一个 ...

1、冰冻切片制备 建议用新鲜组织，否则组织细胞内部结构破坏，易使抗原弥散。选用干净锋利的刀片、组织一定要冷冻适度等，防止裂片和脱片严重。 2、组织切片固定 切好片风干后立即用冰丙酮等固定液进行固定5-10 min，尤其要较长时间保存的白片，一定要及时固定和适当保存。 3、血清封闭 为防止内源性非特异性蛋白抗原的结合，需要在一抗孵育前先用血清（与二抗来源一致）封闭，减 ...

光动力反应（OKR）已被广泛用来评估幼年斑马鱼视觉功能，然而此方法对成年斑马鱼并不适用，因此我们定制了专门的运动器械以及制定了新的步进法来研究成年斑马鱼的视觉功能。同时也演示了对幼年斑马鱼光动力反应和成年斑马鱼视动反应的研究。

荧光光漂白及恢复技术利用高能量激光束将细胞内某一部分中选定靶区域的某种荧光淬灭，然后观察邻近相同的荧光标记物重新扩散入该区域的速度和方式，因而能测定大分子的扩散系数。

生物发光和化学发光BL/CL用于免疫检测 BL/CL已经广泛的应用到免疫检测中进行标记物的超灵敏检测。CL免疫检测不但可以通过以CL分子直接标记抗原或抗体，也可以以CL底物标记可被检测的酶。现在，80%的常规临床分析的免疫检测都是使用酶标记。相比同位素检测，CL检测以其更加灵敏和可检测性获得越来越多的应用。依赖于碱性磷酸酯酶（AP）的CL检测和依赖于辣根过氧化物酶的增强性CL检测是最常用的 ...

用荧光素标记抗体，下面介绍直接法和半透膜法。

对于化学发光检测系统和多数抗体制剂来说，检测最低值可达到约2 fmol/L（10-15）的水平。相当于0.1ng 的50 000kD的蛋白质，高于此浓度的样品较易检出。一个标准的SDS �聚丙烯酰胺凝胶泳道的上样量为150µg（小胶道可为15µg），如果上样量过大条带会发生扭曲变形。因此，50kD中等大小蛋白抗原的上样量以0.1ng/150µg（或1/15 000 0 ...

细胞表面抗原的检测-间接免疫荧光法【试剂】（1）一抗和荧光标记的二抗（2）固定液：如4%多聚甲醛、乙醇等。（3）洗涤液及抗体稀释液(pH 7.4 PBS-Tween 20)【操作方法】（1）取已固定好的细胞爬片或甩片或经过预处理的组织切片（石蜡或冰冻切片）；（2）加入25ml一抗，完全盖住盖玻片，室温孵育60min；注意不可使盖玻片接触培养板孔边缘。每个检测应包括3组对照：与一抗同一种属、类型 ...

一、免疫标记法及其分类 1.荧光免疫法 原理是应用一对单克隆抗体的夹心法。底物用磷酸-4-甲基伞形酮，检测产物发出的荧光，荧光强度与Mb浓度呈正比，可在8min内得出结果。结果以Mb每小时释放的速率表示(△Mb)表示。该法重复性好，线性范围宽，具有快速、敏感、准确的特点。 以双抗夹心法为例，首先将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体。除去未结合抗体，然后加受检标本，使其中的蛋白抗原与固相抗体形成 ...

免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。它是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团，再用这种荧光抗体（或抗原）作为探针检查细胞或组织内的相应抗原（或抗体）。利用荧光显微镜可以看见荧光所在的细胞或组织，从而确定抗原或抗体的性质和定位，以及利用定量技术（比如流式细胞仪）测定含量。

【摘　要】应用鲁米诺-过氧化氢发光体系建立定量测定血清前列腺特异性抗原含量的酶促化学发光免疫分析方法。该方法测量范围为1．5～80μg／L，灵敏度为0．12μg／L，批内变异〈5％，批间变异〈15％。回收率为83．8％～118．7％，稀释实验测定值与稀释度呈线性相关，相关系数为0．999。本方法与免疫放射分析方法的相关方程y=1．07x＋0．68，相关系数r=0．97。 【关键词】酶促 ...

【摘　要】目的 建立灵敏度高，测定范围宽的检测人血清雌二醇(E1)的化学发光免疫分析法(cuA)。方法 采用竞争抑制法，用碱性磷酸酶标记抗原，金刚烷(CSPD)增敏化学发光体系作为酶底物。结果 敏感度为2．0pg／ml；在10～1000pg／ml之间可以准确定量；用不同浓度的E2质控血清测定精密性，批内变异<8％(n=20)，批间变异<10％(n=20)。与雌醇、雌酮、雌三醇(E3)的 ...

【摘　要】肿瘤抑制基因——p53基因的突变可能产生p53抗体．p53抗体在肿瘤的诊断、预后及监测等方面具有重要的临床价值．目前检测p53抗体的方法，如酶联免疫分析方法，需要多个步骤，比较费时，且大部分检测指标只能是半定量，具有一定的局限性提出了一种磁免疫电化学发光(IM-ECL)分析方法定量检测人血清p53抗体．这种新的分析方法检测人血清p53抗体的最低检测极限可达到10n ...

简介 多种化学和生物发光方法目前已用于基础生化和微生物研究、分析生化、分子毒理学、药学和环境生物学领域 (3) 。萤火虫的荧光素 - 荧光素酶系统是最早建立的发光模型之一 (4) ，仍被广泛用于发光应用中，并且是检测 ATP 的最灵敏的方法 (1) 。与细胞外基质相比，活细胞表现出更高的 ATP 浓度，并且多数细胞生命活动与 ATP 浓度的变化相关。 在最佳的反应条件和较低的 ATP 浓度下，光 ...

【摘　要】以萤火虫发光为例，简述什么是生物传感器；生物传感器的特点和应用效益；生物传感产品在医学诊断、食品、饮料生产企业的卫生检测、环境污染监测等诸多领域中的应用；并对生物传感产品的现有和未来潜在市场作了分析和评价。 【关键词】生物传感器 萤火虫荧光素酶 卫生检测 应用 【分类号】TP212.3 【栏目信息】技术与方法 ...

点击链接下载全文：电化学发光免疫分析法测定TSHFT3FT4的临床应用.pdf ...

【摘　要】目的：应用微粒子荧光酶免疫分析法（MEIA）定量检测乙肝病毒e抗原的浓度，以反映肝病毒感染的程度。方法：收集106例怀疑乙肝病人血清做乙肝e抗原定量检测，阳性标本同时用荧光定量PCR法检测HBV－DNA。结果：64例e抗原阳性标本的e抗原浓度范围为0．49－11466．23PEIU／mL，其浓度的变化与HBV－DNA浓度变化一致。结论：MEIA法作乙肝e抗原定量检测能准确反映乙型肝炎病毒 ...

【摘　要】目的 了解电化学发光法（ECL）检测乙肝病毒标志物的应用价值。方法 用ELISA法和ECL法平行测定360例疑似乙肝病人血清乙肝五项标志物，并对ELISA法检测为阴性而ECL法检测为低浓度HBsAg的标本，再用微粒子酶免分析法（MEIA）进行复测并分析。结果 ELISA法和ECL法对HBsAb、HBeAg、HBeAb三项标志物的检出率无显著性差异，但对HBsAg的检测，ECL检出率明显高 ...

【摘　要】目的对微粒子酶免疫测定法(MEIA法)检测乙肝病毒表面抗原进行方法学评价并研究低含量乙肝表面抗原人群阳性检出率。方法采用美国雅培公司的AXSYM型化学发光仪对乙肝病毒表面抗原卫生部质控物、高浓度乙肝病毒表面抗原标本进行稀释测定，同时与ELISA法检测乙肝表面抗原进行比较；对低浓度(HBsAg≤1μg／L)的标本进行中和确证试验与采用PCR—ELISA法定量测定HB ...