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免疫层析

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开发灵敏度高、重复性好的侧向层析诊断产品----第二部分:新方法带来的新挑战

从更多专业领域分析,适合定量诊断分析需要的新技术的开发。 侧向层析免疫诊断(LFIAs)作为一种稳定的技术适合在广泛、多样的POC或者现场使用。然而,该技术不能适用于要求非常灵敏、重复性好或者需要获得定量结果的情况。 在过去的一些年里,在制作侧向层析诊断产品方面出现了一系列新方法,使得该技术可以用于广泛、多样的更高要求的应用领域。这些革新的方法迫使对LFIAs制做原理产生新的关注,同时研究进行研 ...

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开发灵敏度高、重复性好的侧向层析诊断产品---第一部分:对于老问题的新方法

对材料进行选择和生产工艺采用新方法能改善诊断产品性能。 侧向层析诊断技术作为一种稳定和实用的技术适合在多样的POC或者现场使用。然而,该技术不能广泛适用于要求非常灵敏、重复性好或者需要获得定量结果的情况。近年,在各种非传统市场领域对该技术的兴趣与日俱增。驱动侧向层析技术复兴的综合因素包括:现有技术面临的专利压力,另外新技术拥有好的灵敏度、可重复性和定量性或者目标结果的可记录性;为适应POC或者现场 ...

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胶体金在快速检测中应用及未来发展趋势

用于制作胶体金的溶液成分 在过去的5年中,应用金颗粒及层析的检测法日益确立了其在床旁检测中的地位。针对不同分析物的简易层析检测法的出现简化并加速了检测体系,也对诸多企业产生重大影响。例如,可以在临床问诊过程中利用病人的一滴血液、尿液或者唾液做出精确的诊断结果,这样当病人仍在场时就可以立即开始治疗了。同样地,食品生产公司可以在食品加工的不同阶段运用质控检测而无需专门的实验室人员也无需中断生产加工过程 ...

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胶体金在快速检测中的地位

优良的稳定性、灵敏度、精确度及制造过程中的可重复性,使得胶体金适合基于膜的检测技术。快速膜检测需求广泛,可应用于诸多领域(见下表)。随着灵敏度和特异性的提升,大量的潜在应用可能是作为替代昂贵仪器检测方法的低成本选择。快速检测的应用 临床医用变态反应心梗标志物退行性病变药物滥用 ...

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pH值对胶体金制备的影响

摘要:研究了不同的溶液pH值对胶体金颜色!粒径的影响"在不同pH值下通过柠檬酸三钠法制备胶体金溶液,利用紫外/可见光吸收分光光度计对胶体金进行扫描,得到最大吸收峰波长及峰宽;通过透射电镜观察其颗粒直径及分布,再将二者结果进行比较分析"结果显示:随着溶液pH值变小,胶体金颜色由红y蓝y黑,粒径变大" 关键词:胶体金;pH值;粒径;柠檬酸三钠法 中图分类号:TG14613 ...

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一种能原位检测类雌激素暴露的胶体金免疫检测试片

摘要:利用免疫层析和胶体金标记技术试制出一种免疫检测试片, 该试片可快速定性检测鱼体内诱导的卵黄蛋白原。试验结果表明,该检测试片仅需采鱼血浆100μL,15min 内便可获得检测结果。试片的检测限( LODVTG) 为10μg/mL ,野外现场应用表明测量准确度达92%。因此,该试片可用于野外水体类雌激素暴露与影响的原位评价。 关键词:胶体金;卵黄蛋白原;类雌激素;检测试片 文章编号: ...

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免疫胶体金稀释液的配伍原则

制备好免疫胶体金后,还需要将其稀释到一定浓度,并吸附于特殊的惰性介质中才能够最终制成产品。一般来说,特殊的介质常用的是玻璃纤维或无纺布。玻璃纤维和无纺布本身一般是疏水的,胶体金产业一般采用表面活性剂预处理过的玻璃纤维或无纺布,通常配方为1%Tween20+适量PVA。 介质处理完成后,免疫胶体金稀释液的配伍才是最关键的。现总结原则如下,不足之处欢迎批评或补充。 1、合适的离子种类和强度 免疫胶体金 ...

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胶体金制备方面的小Tick总结

1、鉴定胶体金烧制的质量一般有三种: (1)目测直观法:金胶溶液不浑浊,无漂浮物,无颗粒沉淀物,在日光灯下观察溶液中无微小颗粒。或用光电笔透过金溶液成一条直线,无散光现象。 (2)分光光度计光谱测定:波峰越尖,峰宽越窄,说明颗粒更均一、分散性越好。 (3)透射电镜对金颗粒的形貌进行表观,直接反映金颗粒溶液有无凝聚,均不均匀,分散性如何。颗粒直径大小。 科研单位制备胶体金时涉及的加热器主要有微波炉、 ...

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胶体金试纸加速老化试验原理及方案设计

你制作的胶体金试纸保质期有多长,1年,2年?难道我要将试纸放置两年以后才知道质量是否过关? 为了解决保质期的问题,我们设计了将试纸放置于高温环境下烘烤的加速老化试验。然而这个实验到目前为止都没有明确的技术资料,大多数文献资料里面只有"37度2个月=常温下2年","45度一个 ...

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胶体金实验技术相关问题总结

1、Q:金标试纸条包被单抗,检测线上包被多抗来检测抗原是否可行呢,用饱和硫酸铵纯化多抗能达到要求吗?A:多抗不是很合适,有条件还是多用单抗。确实要用,多抗一般要过纯化柱纯化,以提高抗体的特异性。 2、Q:我需要流速为135s的NC膜,可厂家都是孔径,而且0.45微米的多,请问大家我的应该买多大孔径的?A:NC膜大都是以每4cm膜水的层析流速多少秒来定义孔径的,根据流速的快慢常用的有90,120,1 ...

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胶体金免疫层析诊断试纸(lateral-flow)试验结果分析方法

近日有许多朋友询问胶体金试纸如何记录和分析试验结果,每次试验面对的都是使用肉眼判断条带颜色深浅,不同的人对结果的判断都不相同,容易出现误判,平行试验结果无法对比。且试验结果无法直接记录,不能留下有说服力的试验结果证明,就这个问题,我将谈我的一些看法。以下讨论仅针对普通胶体金试纸,荧光,化学发光,磁粒子等特殊标记物必然需要读条仪器。 一、现状 很多学术论文中对胶体金试验的结果记录通常是罗列简单的阴性 ...

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胶体金快速诊断试剂的市场情况略谈

序 胶体金快速诊断试剂是近年来的生物产业化最成功的产品之一,现在很多生物学者纷纷抛弃分子基因等艰涩的基础性理论研究,而转向该应用领域,利用自己实验室的设施人员开始开发胶体金快速诊断产品,为自己在创业初期淘得第一桶金。 我在该行业工作了比较长的一段时间,和很多的同行都有过接触,在此写一点自己对该行业的感受。个人观点不对之处,希望DX指正。 前言 目前生物领域内基本上是以研究为目的的基础理论工作。能顺 ...

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胶体金标记的影响因素

1、标记时pH对标记的影响。 根据标记物的性质,可以将标记物划分为三类。 其一为pH非依赖型,即标记时无论pH如何,您都能得到良好的标记结果,前提是您不能破坏胶体金的胶体状态。此类标记物仅仅是通过疏水相互作用与胶体金相结合,如PEG.这也是调节pH时首先要采用PEG保护电极的原因,当然,如果您使用的是充胶的电极,那您就不必这样麻烦了。呵呵,真希望所有的标记物都象P ...

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斑点金免疫渗滤试验

斑点免疫渗滤试验的基本原理是:以硝酸纤维素膜为载体,利用微孔滤膜的可滤过性,使抗原抗体反应和洗涤在一特殊的渗滤装置上以液体渗滤过膜的方式迅速完成。斑点免疫渗滤试验最初是从斑点ELISA基础上发展起来建立的,应用的结合物是酶标记的,称为斑点酶免疫渗滤试验。90年代初发展了以胶体金为标记物的斑点免疫渗滤试验(dotymmunogoldfiltrationassay,DIGFA),又名滴金免疫测定法(简 ...

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雌二醇的免疫胶体金试纸法检测

【关键词】雌二醇 雌二醇(17β-Estradiol)是天然雌激素的重要成分,为防止儿童性早熟等问题,食品中尤其是畜禽产品的雌二醇检测不容忽视。胶体金免疫层析技术(GICA)在检测小分子有机物方面越来越受到重视。其基本原理是胶体金颗粒能够稳定吸附蛋白质,而蛋白质的生物活性无明显变化,所以它可以取代酶标记抗体〔1,2〕。本实验采用标记有雌二醇单克隆抗体的胶体金颗粒与相对应的固定 ...

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胶体金免疫层析法检测乙型肝炎病毒表面抗原

关键词:乙型肝炎病毒表面抗原;胶体金免疫层析法Gold-immunochromatography 【摘要】目的建立一种简易快速、自测式胶体金免疫层析法(GICA)用于检测血清中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记乙型肝炎病毒表面抗体(抗HBs),制成免疫层析检测试条。血清中HBsAg与测试条上金标记抗体结合后沿着硝酸纤 ...

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免疫胶体金检测不孕症患者血清EMAb

摘要:目的建立快速测定抗子宫内膜抗体(EMAb)的新方法。方法采用经Sepharose4B免疫吸附柱亲和层析纯化的人子宫内膜抗原(EMAg),以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG为标记抗体,根据免疫胶体金技术原理,建立斑点免疫渗滤法(DIGFA)检测人血清EMAb.共检测500份不孕者血清并与酶联免疫吸附试验(ELISA)作对比研究。结果纯化的人子宫内膜抗原与患者血清 ...

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胶体金免疫层析法快速检测氯霉素残留

氯霉素(Chloramphenicol,CAP)是一种高效广谱抗生素,对多种病原菌有较强的抑制作用,常用于动物各种传染性疾病的治疗。但其在动物肉、奶、蛋等食品中的残留严重威胁人体健康,能引起再生障碍性贫血和粒状白细胞缺乏症等疾病,低浓度的药物残留还会诱发致病菌的耐药性。欧盟、美国等许多国家已明确禁止CAP用于生产动物源性食品,并制定了严格的限量标准。加入WTO后,农、兽药残留日益成为各发达国家限制 ...

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免疫胶体金技术及其在兽医临床上的应用

摘要:免疫胶体金技术是20世纪80年代发展起来的一种新型免疫标记技术,应用该技术制成的胶体金试纸条具有简便、快速、灵敏、特异性高等优点。文章介绍了胶体金技术的基本原理、制备方法、胶体金技术的特点以及利用该技术制成的胶体金试纸条在兽医临床上的应用。 关键词:胶体金;兽医临床;应用 免疫胶体金技术在人类医学上是一种常用的免疫标记技术,有其独特的优点。近几年来在生物医 ...

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应用包埋前免疫胶体金直接法研究细胞内病毒抗原超微定位

单位:湖北医科大学病毒所临床病毒室,武汉430071 关键词:包埋前免疫胶体金技术;免疫电镜;I型单纯疱疹病毒;病毒抗原 摘要目的:探讨细胞内病毒抗原的超微定位的方法。方法:采用包埋前免疫胶体金方法标记I型单纯疱疹病毒(HSV-1)抗原以研究该病毒在人胚肺细胞(HEL)内的超微定位。结果:发现金颗粒约为5nm,大小均一,在HSV-1囊膜、内质网膜表面 ...

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