酶免疫技术

Serologic assays are a very important method of detecting antibodies in the bodily fluids of patients and have a broad applicability in confirming a patient’s immunological response to an infection or a vaccination. When new pathogens like SARS-CoV-2 emerge and spread epidemically arou ...

酶联免疫吸附（ELISA）可以：（1）免疫酶染色各种细胞内成份的定位。（2）研究抗酶抗体的合成。（3）显现微量的免疫沉淀反应。（4）定量检测体液中抗原或抗体成份。实验原理双抗体夹心法（常用于测定抗原）用特异性抗体包被于固相载体，经洗涤后加入含有抗原之待测样品，如待检样品中有相应抗原存在，即可与包被于固相载体上的特异性抗体结合，经保温孵育洗涤后，即可加入酶标记特异性抗体，再经孵育洗涤后，加底物显色进行测定，底物降解的量即为 ...

一、ELISA实验中血清的采集、处理和保存1、 真空采血针采集2ml新鲜血液，加入无菌试管中2、 采血后室温静置1小时3、 将采集血液用离心机4℃，2500rpm离心10min，，将离心好的匀浆留上清，弃下面沉 淀。 4、 取上清。 分装冻存备用， 2-8℃下，可放置保存24-48小时； -20℃下，可放置保存1个月； -70℃下，可放置保存6个月5、 根据你的实验需要，取适量上清夜进行各种ELISA测定。 大部分ELISA检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集，应注 ...

ELISA实验因灵敏度高，特异性强在生物科研上得到了广泛的认可，但对初学者而言，如不注意实验操作过程中的各个环节，可能会对最终的实验结果产生比较大的影响，比如实验出现白板，显色弱灵敏度低，花板无梯度背景高等现象。下面对以上实验现象进行一一解析。1.白板现象在完成所有实验步骤进行底物TMB溶液显色后，酶标板中所有孔的颜色均为无色，即无信号呈现。出现该现象的可能原因：试剂已过保质期，不同批次稀释液交叉使用。错加漏加检 ...

ELISA，即酶联免疫吸附实验，其基本原理是将一定浓度的抗原或者抗体通过物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面，加入待检标本，通过酶标物显色的深浅间接反映被检抗原或者抗体的存在与否或者量的多少。ELISA技术作为免疫标记技术（包含免疫荧光技术，免疫放射技术，免疫酶技术和免疫胶体金技术）中的一种，已广泛应用于科研和临床实验中，具有快速，定性或者定量甚至定位的特点。在ELISA实验方法中，比较常见的方法有双抗体夹心 ...

优质的试剂，良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异，国内医学检验一般均用板式点。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点，珠式、管式及磁性球ELSIA，国外试剂均与特殊仪器配合应用，两者均有详细的使用说明，严格遵照规定操作，必能得出准确的结果。

第一次作ELISA，真**的简单，偶暗想。第二次做，咿，结果差别这么大（同一份标本）怎么还有跳孔。第三次，决定做的认真一些，争取作到同一份标本，做两到三次，板间无差异，发觉很难。原来ELISA 也这么讲究。看看ELISA的注意事项吧：（一）加样　　在ELISA中除了包被外，一般需进行4－5次加样。在定性测定中有时不强调加样量的准确性，例如规定为加样一滴。此时应该使用相同口径的滴管，保持准确的加样姿势，使每滴液体的体积基本相同。在定量 ...

菜鸟做ELISA实验操作体会1.标本收集：这个很关键呀！标本收集及保存的好坏，直接决定了实验能否成功。在收集标本之前必须考虑到实验对标本收集及保存的要求，这些要求对标本中待测物质稳定性影响很大。以ELISA为例。ELISA检测的一般是液态标本，应在收集到新鲜标本后立即离心留取上清液1ml左右移入高温灭菌过的1.5ml EP管中。这种标本在4度保存48小时，-20度保存1个月，-80度保存6个月对检测影响不大。样本一般 ...

　　ELISA的技术要点包括三个方面：试剂的制备、反应条件的选择和操作的标准化。　　一、试剂的制备　　ELISA的主要试剂为固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体和与标记酶直接关联的酶反应底物。以下叙述这些试剂的原料和制备方法。　　（一）固相载体　　可作ELISA中载体的物质很多，最常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能，抗体或蛋白质抗原吸附其上后保留原来的免疫活性。聚苯乙烯为塑料，可制成各种形式。在ELISA测定过程中，它作 ...

1、免疫检测的基础知识ELISA是一种免疫测定。免疫测定（immunoassay，IA）是应用免疫学技术测定标本的方法。在临床检验中主要通过抗原抗体反应检测体液中的抗体或抗原性物质。1.1　抗原抗原是能在机体中引起特异性免疫应答的物质。抗原进入机体后，可刺激机体产生抗体和引起细胞免疫。在免疫测定中，抗原是指能与抗体结合的物质。能在机体中引起抗体产生的抗原多为分子量大于5000的蛋白质。小分子化合物在与大分子蛋白质结 ...

最近要做HLA的工作，所以将园子里HLA的有关资料整理了一下，方便战友查询。HLA基础知识http://www.dxy.cn/bbs/thread/8357624http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=38&id=3688870&sty=3&keywords=HLAhttp://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=76&id=217511&sty=1HLA配型与骨髓移植http://ww ...

作者：江苏省临床检验中心 许斌概述 ELISA是一种敏感性高、特异性强、重复性好的实验诊断方法，由于其试剂稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素，以及既适宜于大规模筛查试验又可以用于少量标本的检测，既可以做定性试验也可以做定量分析等优点，已广泛应用于微生物学、寄生虫学、肿瘤学和细胞因子等领域。ELISA的影响因素较多，加强质量管理才能充分发挥其方法学的优点。分析前质控人员培训 实验是人操作的，因此检验人员需经过培训，熟 ...

缩写 全称 中文AAautoantibody自身抗体AAFaminoacetylfluorescence氨乙酰基荧光Abantibody抗体ABCavidin-biotin peroxidase complex抗生物素（亲合素）-生物素-过氧化物酶复合物AChacetycholine乙酰胆碱AChRacetycholine receptor乙酰胆碱受体AChRAbacetycholine receptor antibody乙酰胆 ...

单抗讨论小组报名帖|\|/|单抗讨论小组日常讨论交流贴|\|/|\|/|单抗讨论小组工作交流与工资贴单抗讨论小组最新动态（2008年1月20日更新）(c)经过版主会议的讨论决定，由口口草芳战友担任免疫版单抗小组组长。（11-11更新）单抗讨论小组总帖|\|/|单抗讨论小组报名贴|\|/|\/|单抗讨论小组工作交流与工资贴欢迎您加入单抗讨论小组这个大家庭，大家可在此踊跃讨论或另开贴交流。好的帖子将归纳到下面供战友学习，同时也欢迎战友给我 ...

抗原递呈细胞通过其表面或者胞浆内的模式识别受体识别病毒或者其它抗原，启动Ⅰ型干扰素的表达，Ⅰ型干扰素是天然免疫的重要因子，具有抑制病毒复制的功能。在病毒免疫反应中，其表达过高容易引起炎症反应和自身免疫性疾病，表达过低则不利于病原体的清除，因此，Ⅰ型干扰素的表达必须处在严格而精细的调控之中。以往对Ⅰ型干扰素负向调控机制的研究主要集中在模式识别受体信号通路上，而JI上的这篇文章则是发现了直接调控IFNβ的micro ...

今天参加了BD组织的一个学术交流会，会上JAY Dong博士介绍了JEM杂志在今年七月发表的一篇文章，发现CD127可以替代FoxP3成为特异性识别调节性T细胞的新标志。该方法利用CD127、CD25和CD4三标法识别、分选、分型人调节性T细胞，得到较exciting的结果。介绍：自身免疫性疾病主要特征是免疫系统在识别“自我”与“非我”时出现差错。尽管绝大多数自身免疫性T细胞在胸腺成熟过程中被调节分化后去除，但正常 ...

很多时候Elisa检测多肽效价的时候会存在多肽难以包被的问题，我在实验室对这个问题进行了研究，再此发上来一点自己的研究心得。首先，多肽包被条件是很难控制的，很多多肽用传统的碳酸盐包被液就可以达到很好的包被效果，但是有些却始终包不到板子上，这时最常用的措施是使用BSA或者其他大分子蛋白进行耦连，之后用耦连后的大分子进行包被。但是这样做最大的缺点就是成本太高，一次耦连就要几百元。鉴于此我对多肽包被条件进行了一些 ...

酶联免疫检测法应该注意的几个问题 转贴近年来，疯牛病、瘦肉精事件的连续发生，人们震惊之余发现饲料在某种条件下不仅构成了对动物和人类健康的严重威胁，而且造成了意想不到的经济损失和巨大的政治影响。饲料安全作为食品安全中的一个源头环节，成了上至国际组织、政府部门，下至平民百姓，各个层面广泛关注的热点问题。世界上很多国家及非政府组织都积极加人了饲料、食品安全控制行列。各个国家与地区也都加大力度强化相关的组织机构，制定一系 ...

galectin-1介导DC的负向调控功能文章出处：Tolerogenic signals delivered by dendritic cells to T cells through a galectin-1-driven immunoregulatory circuit involving interleukin 27 and interleukin 10. Nature Immunology. 2009. 10(9):981-991主要内容：文章证明了凝集素家族之一galectin-1，一种糖 ...

ELISA质量控制从1949年美国College of American Pathologists（简称CAP）首先开始研究临床实验室室内质量控制（简称质控）问题，美国学者Levery和Jenning于1950年发表第一篇关于使用质控图的实验室室内质控，临床检验实验室的室内质控工作正式拉序幕。 到70年代，实验室质量控制进入一个新的阶段--全面质量管理，推行Good Laboratory Parctice（简称GLP）。进入80年代末 ...