其他试剂

licanming 请问大家用sigma公司的PMA时，储存液的浓度是配多少的？保存期多长？我是准备用DMSO配，我看说明书的意思是储存液浓度为20mM，但我工作液的浓度只要100nM，故很难分装和稀释。如果储存液浓度低一点，会不会对保存时间产生影响啊？我在园子里搜过，有用1mg/ml的，但我不知他是否用sigma公司的。licanming 自己顶一下amygdala 对于保存而言当然是浓度越高越好，稀释1万倍也是很正常的 ...

happy_840524 请问一下高手，我的MCF-7细胞老是养养就长出触角，而且长出触角后越长越慢，复苏了再养还是这样，我觉得我的培养液和操作都没有问题，因为另外一个细胞养的挺好，请高手指点。r1990en 我也是这种情况啊，不知道楼主的问题最后是怎么解决的？冬天的落阳 我的细胞也这样本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcomi ...

幽幽水 请问各位：如果所取肿瘤组织只有米粒大小，能同时做免疫组化和细胞培养吗？幽幽水 请各位给些建议，我现在弄开题报告，马上要开题了，很急。谢谢，十分谢谢！Fasta921 先培养细胞吧，不能断了自己的后路。呵呵免疫组化可以放在细胞培养后点做。幽幽水 呵呵，nlyydy 如果是医院取的组织建议先做细胞培养做免疫组化可以试着申请病理科取腊块或者切片，一般医院都有保存wanglinling 免疫组化一般取黄豆大点吧。一粒米要做两种有点不现实 ...

licanming 我的GF109203x（Bisindolylmaleimide I，Gö 6850）是sigma的，看说明书上是用DMSO配制母液，但未有说明稀释母液可以用哪些试剂，还是用DMSO吗？我看过一篇文献是用培养基稀释的。请问各位有无经验？一般都是用什么来配的？如果还用DMSO，那会不会DMSO过多，引起细胞损伤？licanming 可以用PBS稀释吗？licanming 通过这两天阅读文献，发现都是用培养基来配的，所 ...

zhanghaopeng 大家是按照什么浓度稀释、给药的呢？zhanghaopeng 自己顶一下吧！doctormy DAPT在体外的应用浓度从50 nM至50µM 不等，要根据细胞类型，作用时间等因素综合考虑，最重要的是参考文献，要有据可依。通常DAPT用DMSO溶解配置成10 mM的 stock solution ，溶解后保存在−70°C ，并在1个月内用完。zhanghaopeng 好的，谢谢啦！elegance_janet 请问DAPT是否可以通过血 ...

skybjp123 现在我要做一种药物对培养细胞的影响，观察这种药物是通过影响何种转录因子起作用的，如何设计一个实验呢？不知道这样设计行不行？加药组和未加药组进行对比，所反应的指标用PCR测定其含量，发现加药组和未加药组有明显的区别，然后使用Wstern blot 方法测定两组的相关的转录因子表达的区别，来证明是这个药物是通过这些转录因子起了作用，不知道这样的实验是否科学？另外这些转录因子在之前的文章中已经证明可以调控 ...

wingpuppy 刚刚接触这两个药物实验室没有人做过粗粗看了几篇文献发现条件都不是很一致尤其有的条件一个很成功，另一个却反应细胞全都漂了所以让我很头疼请教一下用过的达人刚开始的时候是不是应该摸一下梯度那么范围一般设计在多少呢，尤其是时间怎么来设定急等，谢谢！lrh75 我也想知道，顶一下wingpuppy 怎么没人回呢自己顶一下吧瓷不旧1992 请问你解决了吗。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以 ...

fanyi701019 请问U0126对哪种肿瘤细胞比较敏感，用药的终浓度是多少？用药时间是多少？amygdala U0126对MEK-ERK信号的抑制作用很明显，一般的细胞株都可以使用。终浓度10 μM左右，预处理15-30min。可以根据实际情况作适当调整。feiqi 怎么我看到一篇nature medicine上的一篇论文上是U0126 0.5 μM处理48小时啊？paulin98122 版主您好，请问如何预处理，如果我要长期观察MEK ...

daniao130 最近查文献发现carlsbad公司有提供nf-kb的EMSA检测试剂盒，不知道有没有sp1的。有用过活着熟悉的请告知小弟，非常感谢！之前的细胞加药干预培养后检测转录因子EMSA的效果都很差，这次打算改用试剂盒试试LWP1981 这个sp1，我以前做过，细胞的比较容易出结果！LWP1981 VIAGENE北京公司的，你可以咨询，这两个转录因子我都做过。挺容易出结果的！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的 ...

（一）仪器的清洗总的分为两大类：可泡酸的和不可泡酸消毒的。 酸指消毒的清洁液（由浓硫酸、重铬酸钾和蒸馏水配置的次强酸液）可泡酸的主要是玻璃仪器培养细胞的板子，离心管等塑料器皿。消毒过程：自来水冲洗3-5遍----→超声波清洗30′----→烘干----→濅入清洁液过夜（不少于6h）----→自来水冲洗15－20遍----→蒸馏水洗3-5遍，烘干备用。不可泡酸的主要是胶塞和盖子，虑器等，先在清水中濅泡后冲洗烘干----→2%NaOH濅泡过夜，自来水冲洗， ...

1、实验室设计细胞培养是一种无菌操作技术，要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响，要求工作环境清洁、空气清新，干燥和无烟尘。细胞培养工作包括：工作液配制、无菌操作（采样）、温育、无菌处理，细胞和用品贮存等。细胞培养室的设计实施原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧，常规操作和封闭培养于一室，而洗刷消毒在另一室。2、常用设施及设备（1）超净 ...

（1）高糖DMEM溶液用新配制的三蒸水配制，高糖DMEM干粉（规格10×1L），溶入约总量的1/3的三蒸水，并用水洗净包装袋，在磁力搅拌器上搅拌30分钟，加入NaHCO2 3.75克，补加水至最终量。用1N HCL调整PH为7.2，0.22μm滤膜抽滤除菌，分装-20℃保存，使用时加10%的胎牛血清及双抗溶液（最终浓度：青霉素100U/ml，链霉素 100μg/ml）（2） 胎牛血清使用前56℃水浴30分钟灭活，无菌条件下分装成10ml包装，- ...

在细胞和组织培养领域，从上世纪70年代起二维（2D）培养科学家已经看到其局限性，并且更多地关注三维（3D）培养的优点，目前越来越多的研究从细胞培养的平面环境中转变到三维培养。当前，虽然对基于细胞的效应研究和毒性测试中，制药工业如今最常用的依旧是2D方式，3D培养技术已在学术研究中被广泛应用。细胞增殖，分化和代谢等生理活动都严重受到微环境的影响。当前细胞生物学研究大多还是在二维平面培养进行，这种平面培养、生长方式与 ...

一、原代培养及其操作步骤 原代分离细胞培养是指从供体内取出组织后，经机械以及消化分离成单个细胞或单一型细胞群，使之在体外模拟人体生理环境，在无菌、适当温度和一定的营养条件下，生存、生长和繁殖。原代培养细胞常有不同的细胞成分，生长缓慢，但是更能代表所来源的组织细胞类型和表达组织的特异性特征。利用原代细胞培养做各种实验，如药物测试、细胞分化及病毒学方面的试验效果很好。其操作步骤如下。 1. 剪切组织　先将所取得的组织，用D-Hanks ...

细胞接种或传代以后，实验者每天或至多间隔1～2d，要对细胞做常规性检查。观察细胞形态和生长情况以及培养的pH变化、有无污染等。根据细胞动态变化，做换液或传代处理，如发现异常情况应及时采取措施。 1. 细胞形态　生长状态良好的细胞，在一般显微镜下观察时可见，细胞透明度大、折光性强、轮廓不清。细胞生长不良时，轮廓增强，胞质中常出现空泡、脂滴和其他颗粒状物，细胞之间空隙加大，细胞形态可变得不规则甚至失去原有特点，如上皮细胞变成类上皮细 ...

一、清洗 新采用和重新使用的培养器皿，都要严格清洗，以防各种有害物质对培养细胞损害。培养用的塑料器皿目前主要依靠进口，均已无菌密封包装，可直接使用。对于塑料瓶盖或胶塞等，可水中浸泡后用2％NaOH煮沸10～20min，自来水中浸泡和蒸馏水漂洗2～3次，晾干备用。细胞培养中的绝大部分器皿系玻璃制品，清洗过程为以下步骤。 1. 浸泡　新使用或重复使用的玻璃器皿须经5％盐酸溶液或自来水浸泡过夜或煮沸30min，水洗。以去除新购进玻璃器皿所 ...

由于现在国内的细胞库资料不是很充足，而且比较零散，包括建株时的技术层面不一，没有比较严格统一的操作规范，所以在遇到比较重要的实验项目时，一般都比较倾向于购买国外的细胞株，但购买国外细胞株需要考虑的因素有如下几点： 1、细胞株的生物等级，由于有些细胞株及菌株属于管制品，所以从国外购货比较麻烦。 2、在购买国外细胞株时，需交待国外加比较多的干冰(一般在13公斤以上，采用比 ...

一、实验试剂 10% (v/v) Household Bleach Callus Induction Medium Gamborg's B5 Basal Medium 0.5 g/liter MES pH 5.7 0.05 mg/liter Kinetin 0.5 mg/liter 24-dichlorophenoxyacetic Acid (24-D) 0.8% (w/v) Agar ...

大家知道，PeproTech的所有细胞因子和蛋白均为冻干粉，这使得运输非常便捷，只要常温即可。而且，细胞因子和蛋白冻干粉非常稳定，在-20o C或-80o C条件下可保存数年。冻干粉在使用前需进行溶解，然后以液体形式加到培养体系或注射入动物体内。溶解步骤非常关键，因溶解不好会导致细胞因子或蛋白的失活，这也是很多用户在实际使用中经常遇到的问题。 应该如何进行正确的溶解呢？ 下面我们以Recombi ...

一．台盼蓝染色二．伊红Y染色 三．苯胺黑染色实验