无血清培养基(serum free mediumSFM):是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。但是它们可能包含个别蛋白或大量蛋白组分。虽然基础培养基加少量血清所配制的完全培养基可以满足大部分细胞培养的要求,但对有些实验却不适合,如观察一种生长因子对某种细胞的作用,这时需要排除其他生长因子的干扰作用。而血清中可能含有各种生长因子;又如需要测定某种细胞在培养过程中分泌某种 ...
合成培养基是根据天然培养基的成分,用化学物质模拟合成、人工设计、配制的培养基。它有一定的配方,是一种理想的培养基。目前合成培养基多达10多余种,有的培养基仍在不断进行改良。早期组织培养是利用天然培养基,目前合成培养基已经成为一种标准化的商品,从最初的基本培养基发展到无血清培养基、无蛋白培养基,并且还在不断发展。合成培养基的出现极大的促进了组织培养技术的普及发展。 基本组分 1.无机盐:CaCl2 ...
天然培养基是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基,如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期,体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大,因此逐渐为合成培养基所替代。目前广泛使用的天然培养基是血清,另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。 血清种类 目前用于组织培养的血清主要是牛血清,培养某些特殊细胞也用人血 ...
培养是既是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质,也是培养细胞生长和繁殖的生存环境。培养基的种类很多,按其物质状态分为半固体培养基和液体培养基两类;按其来源分为合成培养基和天然培养基。 1、天然培养基:使用最普遍的天然培养基是血清,基本以小牛血清最普遍。血清由于含有多种细胞生长因子、促贴附因子及其多活性物质。与合志培养基合用,能使细胞硕利增殖生长。常见使用最为 5-20%。 2、合成 ...
体外培养的细胞直接生活在培养基中,因此培养基应能满足细胞对营养成分、促生长因子、激素、渗透压、pH等诸多方面的要求。 营养成分 1.氨基酸:所有细胞都需要12种必须氨基酸:缬、亮、异亮、苏、赖、色、苯丙、蛋、组、酪、精、胱氨酸。 2.单糖:六碳糖是主要能源,也是合成某些氨基酸、脂肪、核酸的原料。细胞对葡萄糖的吸收能力最高,半乳糖最低。 体外培养动物细胞时,几乎所有的培养基或培养液中都以葡萄糖作为 ...
器材与试剂 干粉型培养基、胰蛋白酶,青霉素、链霉素. 纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器等 具体步骤 1、水: 细胞培养用水必须非常纯净,不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水. 2、PBS (也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制): 主要用于免疫组化染色时组织或细胞的漂洗 溶解定容:将药品(NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HPO4 ...
细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下,使其生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞,也可以是细胞群。 1、合适的细胞培养基 合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的最重要的条件之一,培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质,而且还提供培养细胞生长和繁殖的生存环境。 2、优质血清 目前,大多数合成培养基都需要添加血清。血清是细胞培养液中最重 ...
对于普通使用的缓冲液,PH值随温度变化而变化。 下表列出温度改变10℃时,PH值的变化情况: 例如 20℃下配制PH7.4 Tris缓冲液40℃时PH值为 7.4-(2x0.310)=6.78 缓冲系统 pKa/20℃ pKa/10℃ Mes 6.15 -0.110 Ada 6.60 -0.110 Pipes 6.80 -0.085 Aces 6.90 -0.200 Bes 7.15 -0 ...
体外培养的细胞直接生活在培养基中,因此培养基应能满足细胞对营养成分、促生长因子、激素、渗透压、pH等诸多方面的要求。 营养成分 1. 氨基酸:所有细胞都需要12种必须氨基酸:缬、亮、异亮、苏、赖、色、苯丙、蛋、组、酪、精、胱氨酸。 2. 单糖:六碳糖是主要能源,也是合成某些氨基酸、脂肪、核酸的原料。细胞对葡萄糖的吸收能力最高,半乳糖最低。 体外培养动物细胞时,几乎所有的培养基或培养液中都以葡萄糖 ...
培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之,首选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养,各种目的无血清培养的首选是AIM V培养基(SFM)。在开始进行新的细胞培养时,可以参考下表所列的条件: 细胞系 细胞类型 种 组织 推荐使用的培养基 293 成纤维细胞 人 胚胎肾 MEM 10% 热灭活马血清 3T6 成纤维细 ...
1、保存在2-8度干燥环境,避光。 2、称量出比最终容积小5%的蒸馏水,混合的容器尽可能接近最终容积。 3、将干粉加入到室温15到30度的水中,轻柔搅拌,勿用热水。 4、冲洗出包装袋内所有干粉。 5、每升培养基加入2.2g碳酸氢钠。 6、用水稀释至最终的容积,搅拌直至溶解。不要过分混合。 7、调整pH值比最后的培养用的pH值要低0.2到0.3(过滤后pH值一般要升高0.1到0.3):用1N NaO ...
选择培养基没有一定的标准,有几点建议可供参考: (1) 建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。 (2) 其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。 (3) 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640 。 (4) 用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率 ...
器材与试剂: 干粉型培养基、胰蛋白酶,青霉素、链霉素. 纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器。 具体步骤: 一、水的制备 细胞培养用水必须非常纯净,不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水 二、PBS的制备与消毒(也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制) 1.溶解定容:将药品(NaCl8.0g,KCl0.2g,Na2HPO4•H2O 1.5 ...
培养基历史 体外培养( in vitro culture )包括:组织培养( tissue culture )、细胞培养( cell culture )、器官培养( organ culture )。顾名思义,就是将活体结构成分(如活体组织、活体细胞或者活体器官等)从体内或其寄生体内取出,放在类似于体内生存环境的体外环境中,让其生长发育的方法。广义组织培养与体外培养同义。 体外培养已经历了约一百 ...
器材与试剂 干粉型培养基、胰蛋白酶,青霉素、链霉素. 纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器。 具体步骤 一. 水的制备 细胞培养用水必须非常纯净,不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水 二.PBS的制备与消毒(也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制) 1.溶解定容:将药品(NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HPO4•H2O 1.56g ...
The kitchen makes Tris TD Tryp/TD PBS and VE. Tris is a fairly complex Tris-buffered physiological saline solution. It is used to wash cells and is preferable to TD unless you need a Ca2+/Mg2+ free s ...
MS MEDIUM FOR ARABIDOPSIS To 990 ml H2O add: Sucrose ........... 10.0 g MOPS .............. 0.5 g Agar .............. 8.0 g Adju ...
培养细胞的完全培养基由基础培养基(如MEM)和添加剂(如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子)组成,下面介绍培养基及培养基中添加的成分的特性和用途。
培养基DMED的配置。
62 氯化钠结晶紫增菌液成分:蛋白胨 20g氯化钠 40g0.01%结晶紫溶液 5mL蒸馏水 1000mLpH9.0制法:除结晶紫外,其他按上述成分:配好,加热溶解。约加30%氢氧化钾溶液4。5mL,校正pH。加热煮沸,过滤。再加入结晶紫溶液,混合后分装试管。121℃高压灭菌15min。 63 氯化钠蔗糖琼脂成分:蛋白胨 10g牛肉膏 10g氯化钠 50g蔗糖 10g琼脂 18g0.2%溴麝香草酚 ...