DNA含量测定

相关专题 核糖核酸酶保护实验 The ribonuclease protection assay (RPA) is a highly sensitive and specific method for the detection of mRNA species. The assay was made possible by the disco ...

相关专题 核糖核酸酶保护实验 Ribonuclease Protection Assay contributed by James McCaughern-Carucci Yale University Most RNase Protection protocols require an overnight hyb with numerous ...

相关专题 核糖核酸酶保护实验 1 analysis of yeast mRNA using oligonucleotide probes Steve Hahn. last modified Sat Oct 17 1998 Mix the following in an 0.5 ml eppendorf tube: 10-20 microgra ...

相关专题 核糖核酸酶保护实验 RNA酶保护试验((RNase Protection AssayRPA)是通过液相杂交的方式用反义RNA探针与样品杂交，以检测RNA表达的技术。 1。原理：双链RNA(杂交的)能够抵抗RNA酶的降解。 2。应用：检测RNA表达 3。与Northern杂交和RT-PCR比较，RPA有以下几个优点： 1. 检测灵敏度 ...

相关专题 核糖核酸酶保护实验 S1 Nuclease Protection Assay End-label oligo (20-25 mer) 4 µl 5X T4 Kinase Buffer 5 µl ATP (7000 Ci/mmol) 10 µl water + oligo (200 ng) 1 µl T4 Kinase 1. 37 ...

相关专题 核糖核酸酶保护实验 核糖核酸酶保护实验(Ribonuclease protection assay，RPA)是近十年发展起来的一种全新的mRNA定量分析方法。其基本原理是将标记的特异RNA探针(32P或生物素)与待测的RNA样品液相杂交，标记的特异RNA探针按碱基互补的原则与目的基因特异性结合，形成双链RNA;未结合的单链RNA经R ...

相关专题 核糖核酸酶保护实验 RNA酶保护试验((RNase Protection AssayRPA)是通过液相杂交的方式用反义RNA探针与样品杂交，以检测RNA表达的技术。与Northern杂交和RT-PCR比较，RPA有以下几个优点： 1. 检测灵敏度比Northern杂交高。由于Northern杂交步骤中转膜和洗膜都将造成样品和探针的损 ...

相关专题 核糖核酸酶保护实验 RNA酶保护试验实际上是很早就出现的技术。在1982年出版的第一版圣经(分子克隆)还没有提到。在1989年出版的第二版中已经出现：7.71 Mapping of RNA with Ribonuclease and Radiolabeled RNA(可参见中译本P383-387)。在2001年出版的第三版中的第七章 ...

相关专题 核糖核酸酶保护实验 核糖核酸酶是催化RNA水解、作用于RNA中的3′，5′-磷酸二酯键的内切酶，分别生成5′-磷酸核苷和3′-磷酸核苷。 核酸分解的第一步是水解核苷酸之间的磷酸二酯键，在高等动植物中都有作用于磷酸二酯键的核酸酶。不同来源的核酸酶，其专一性、作用方式都有所不同。有些核酸酶 ...

相关专题 DNA连接与转化 氨苄青霉素(ampicillin)(100mg/ml) 溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 羧苄青霉素(carbenicillin)(50mg/ml) 溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10 ...

相关专题 基因芯片是目前常用的一种基因检测方法。基因芯片又称DNA芯片，它的测序原理是通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的杂交测序方法。 基因芯片是在一块基片表面固定了序列已知的八核苷酸的探针，当溶液中带有荧光标记的核酸序列TATGCAATCTAG与基因芯片上对应位置的核酸探针产生互补匹配时，通过确定荧光强度最强的探针位置， ...

相关专题 什么是DNA甲基化，本文叙述了DNA甲基化结构基因，DNA 甲基转移酶，DNA 去甲基化，甲基化新位点。DNA甲基化是甲基转移酶催化作用下，DNA的CG两个核苷酸的胞嘧啶被选择性地添加甲基，形成5-甲基胞嘧啶。DNA甲基化修饰可导致基因结构和功能的异常。 结构基因 DNA甲基化状态的改变可导致基因结构和功能异常。结构基因含有很多C ...

相关专题 DNA(Deoxyribonucleic acid)即脱氧核糖核酸，是组成基因的材料，也是染色体的主要组成成分之一。发现DNA结构是科学史划时代的成就，但发现它的方法是模型建构法，模型建构法正如小朋友拼图游戏一样的“拼凑”法。通过氢键形成的碱基对和基对之间的相互作用力保证了DNA分子的双螺旋结构是相对稳定的。 DNA结构 — 概述 ...

相关专题 DNA序列分析主要测定的是组成DNA的核苷酸序列（DNA的一级结构），核酸的核苷酸序列测定依据方法有两种：一、Sanger双脱氧链终止法原理和Maxam Gilbert DNA化学降解法原理。本文叙述了两种测序方法的基本步骤和DNA序列分析的主要内容。 DNA序列分析的方法 DNA的一级结构决定了基因的功能，欲想解释基因的生物学含 ...

相关专题 解读miRNA （MicroRNA） 2000年，RNA的研究进展被美国《科学》杂志评为重大科技突破;2001年“RNA干扰”作为当年最重要的科学研究成果之一，再次入选“十大科技突破”;2002年12月20日，Science杂志将“Small RNA & RNAi”评为2002年度最耀眼的明星。同时， Nature杂志亦将Small ...

相关专题 DNase I可以将DNA链消化成寡脱氧核苷酸，因此常常用于RNA提取过程中消化掉提取核酸中所残留的DNA成分而得到高纯度的RNA产物。 DNase I，即Deoxyribonuclease I，中文名称为脱氧核糖核酸酶I，是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶。DNase I水解单 ...

相关专题 DNA测序技术始于70年代末，FrederickSanger最先发明了手动双脱氧终止法测序技术。80年代中期首次出现自动测序仪，其原理还是采用双脱氧终止法的方法，并利用荧光标记代替同位素标记。 DNA测序仪目前主要供研究之用，是生物学家们所能购买的最昂贵仪器之一，然而，在美国政府削减研究经费且未来的经费前景也不容乐观之际，许多研究 ...

相关专题 无论是真核还是原核生物，其遗传物质的复制都是有起始部位的，这个起始位置我们常常成为DNA复制起始子，在DNA复制的起始部位常常是含有AT序列，起始子的结构大多呈现十字形。 很多实验都证明：复制是从DNA分子上的特定部位开始的，这一部位叫做复制起始点(originof replication)常用ori或o表示。细胞中的DNA复制一 ...

相关专题 PCR(聚合酶链式反应)反应包括三个基本步骤，即：模板DNA的变性、模板DNA与引物的退火复性、引物的延伸。PCR反应体系包括5种基本成分，依次为：引物、DNA聚合酶、dNTP、模板DNA、Mg2+。 1、引物 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序 ...

相关专题 近几年来RNA干扰技术取得了突破性进展，有关RNAi的学术报道呈现爆炸式增长趋势，RNAi中出现一些名词概念相近但不完全一致，本文列举了miRNA、dsRNA、shRNA以及siRNA概念的简单解释。 RNA干扰(RNAi)，即用20多个核苷 酸组成的短的双链RNA(siRNA)代替传统反义核酸进行转录后基因沉默，已经迅速而广泛地 ...