DNA含量测定

相关专题 解读miRNA （MicroRNA） 尽管早在1993年，科学家就发现了第一个microRNA，但直到2003年以后，这种小RNA分子的大作用才不断被发现。研究显示：miRNA通过与转录本的相互作用，关闭或抑制基因的表达，影响了30%的基因。miRNA在多个组织中，例如正常和肿瘤组织中差异表达。因此，通过表达谱分析寻找疾病相关miR ...

相关专题 解读miRNA （MicroRNA） Using a miRNA microarray can be broken down into 5 steps: 1. Post-Processing (Can be done ahead of time) 2. Isolation of Small RNAs from sample (Can ...

相关专题 解读miRNA （MicroRNA） 1 实验方法识别MicroRNA 1.1 建立富集microRNA 的cDNA 文库法 目前主要有两种构建富集microRNA 的cDNA 文库的方法。 第一种方法是将一个组织中的全部RNA经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离 回收19~25 nt RNA小片段 随后在这些小片段RNA的3'和5 ...

相关专题 解读miRNA （MicroRNA） 概观miRNA MicroRNAs(miRNAs)是一类非编码的小RNA分子，通过与靶RNA的3 UTR互补或部分互补结合，使其降解或介导其翻译抑制，参与细胞增殖、凋亡、分化、代谢、发育、肿瘤转移等多种生物学过程.miRNAs基因通常位于基因间或编码蛋白基因的内含子中，在核内由RNA聚合酶II或 ...

相关专题 解读miRNA （MicroRNA） 来自加拿大多伦多大学分子及医学遗传学、加拿大Health Network大学(University Health Network)、美国耶鲁大学的研究人员公布了一张包含104种人类miRNAs的1597个高可信度的靶标网络，并证明miRNAs与mRNA的配对表达谱(paired expressi ...

相关专题 解读miRNA （MicroRNA） MicroRNA(miRNA)是一种机体内源性表达的单链小分子RNA，位于基因组非编码区，本身不具有开放阅读框(open reading frame，ORF)，具有高度保守性，时序性和组织特异性。miRNA广泛存在于各种真核细胞中，不编码任何蛋白质，长度仅为20～24nt。成熟的miRNA 5& ...

相关专题 解读miRNA （MicroRNA） 来自中国药科大学生命科学与技术学院，中国药科大学药物分析教研室，华东医学生物技术研究所的研究人员在一篇综述文章中介绍了最新发展的microRNA定量检测方法 详细阐述了基于探针杂交技术的Northern blotting法、微阵列芯片法、纳米金标记法、桥连同位素标记法 以及基于扩增技术的定量PC ...

相关专题 解读miRNA （MicroRNA） 《自然—方法学》网络版近日介绍了瑞士苏黎世大学分子生命科学研究所迈克尔•恩加特纳(Michael O Hengartner)研究组发明的一种大尺度鉴定miRNA靶点新方法。 在过去几年中，随着实验和计算方法的发展和完善，miRNA靶点的鉴定和预测研究取得很大进展。然而，全面正确地鉴定m ...

相关专题 解读miRNA （MicroRNA） 探针-miRNA复合体通过纳米孔 miRNA能够调控基因表达，因此被作为抑制癌症等疾病相关基因的潜在疗法。然而，细胞中miRNA的拷贝数非常少以至于很难被检测到。11月4日出版的《自然—纳米技术》杂志以封面文章形式报道了美国宾夕法尼亚大学玛丽亚·德恩迪奇(Marija Drndic)小组发明的 ...

相关专题 解读miRNA （MicroRNA） 1 Northern杂交 Northern杂交是检测mirna表达的一种简便而可靠方法，不仅用于检测mirna在组织细胞中的表达水平，而且结合rna marker，可经凝胶电泳检测mirna的分子大小。 1993年始，Northern杂交应用于mirna表达谱研究，也是首个用于半定量检测mirn ...

相关专题 解读miRNA （MicroRNA） 多个研究小组采用生物化学结合生物信息学的方法开展对miRNAs的研究工作。由于据推测都是由Dicer酶降解RNA得到的，21—25个碱基大小、有5’端磷酸基和3’羟基的RNA片断，有的实验室采用改良的定向克隆方法来筛选具有相同特征的小分子——筛选一定大小的RNA分子，连接到3’和5’的适配子(a ...

相关专题 解读miRNA （MicroRNA） miRNA靶基因预测 与miRNA基因预测相比靶基因的预测具有更大的难度. 因为目前已知的miRNA靶基因数量非常有限不能为预测提供充足的依据而且对预测的候选基因的鉴定步骤相对繁琐很难实现高通量和规模化. 从已知的miRNA与靶基因的相互作用中人们得出miRNA5′端的2～8 个核苷 ...

相关专题 尽管第一个microRNA是在1993年发现的，但直到最近几年，人们才开始了解这种小RNA分子的大作用。miRNA通过与转录本的相互作用，关闭或抑制基因的表达。最近的研究表明它们影响了约三成的基因。miRNA在多个组织中差异表达，这就让表达图谱分析成为研究的重点。同时，miRNA的过表达和抑制也是近年来常用的研究方法。 然而，mi ...

相关专题 解读miRNA （MicroRNA） Q1：你使用什么方法来确保灵敏而特异的miRNA表达谱?为什么? Galina Gabriely(哈佛大学) 我们通常利用多重定量PCR来对少量的人miRNA进行小规模图谱分析。这种方法的灵敏度和特异性比芯片更好，因此在待分析miRNA数量不多时是首选。多重定量PCR图谱分析的准确性可用更加灵敏 ...

相关专题 解读miRNA （MicroRNA） miRNA很小，这就增添了研究的难度。如何从细胞中提取和纯化miRNA?如何上调或下调特定的miRNA?如何验证结果?全靠自己摸索，体会是很深，但时间也花不少。以下是收集了来自顶尖研究院的专家的实际操作经验，这将让你少走弯路。 尽管第一个microRNA是在1993年发现的，但直到最近几年，人们 ...

相关专题 解读miRNA （MicroRNA） 来自怀特黑德研究所的David Bartel是植物miRNA研究的鼻祖，并且发现microRNA对基因进化的影响力远远超过先前研究的预测。在2004年其与另外一个实验室发表Cell文章，证明人类基因中的三分之一受到microRNA的调节。 2008年，David Bartel研究小组与Niko ...

相关专题 解读miRNA （MicroRNA） RNAi是一种由双链RNA介导的序列特异性基因沉默现象。RNAi行使功能的机制与miRNA相同，都是一种在进化上十分保守的RNA-蛋白质机制。miRNA是由21至23个核苷酸组成的内源非编码RNA。随着RNA为基础的治疗方法学的不断发展与成熟，对于miRNA通路及转录后基因沉默机制的研究便显得尤 ...

相关专题 RNA干扰(RNA interference，缩写为RNAi)是指一种分子生物学上由双链RNA诱发的基因沉默现象，其机制是通过阻碍特定基因的翻译或转录来抑制基因表达。当细胞中导入与内源性mRNA编码区同源的双链RNA时，该mRNA发生降解而导致基因表达沉默。与其它基因沉默现象不同的是，在植物和线虫中，RNAi具有传递性，可在细胞 ...

相关专题 大肠杆菌的基因工程基因工程让一切皆有可能 一、原理 1、 E . coli 表达系统 E . coli 是重要的原核表达体系。在重组基因转化入E . coli 菌株以后，通过温度的控制，诱导其在宿主菌内表达目的蛋白质，将表达样品进行SDS-PAGE 以检测表达蛋白质。 2、 外源基因的诱导表达 提高外源基因表达水平的基本手段之一，就 ...

相关专题 E.coli细胞中主要的σ因子可与核心酶一同被纯化，称为σ70，但菌细胞中另外有一些σ因子能够识别其顺序与E.coli的主要启动子不同的另一些启动子，并促使核心酶起始转录。这些变异的σ因子在细胞中有特别功能，通常能剧烈改变细胞RNA的合成方式，以便在需要时使一组全新的基因得以表达。这 ...