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我做NF-kB的EMSA实验方法和结果,条带不好,请大家指点!

核蛋白提取:(1)5 millions个离心收集(2)弃上清,细胞沉淀重悬于1.5ml冰预冷的PBS缓冲液,4℃下2000 rpm离心5min。(3)弃上清,沉淀重悬于500μl冰预冷的Buffer A离心收集,再悬于0.5 ml Buffer A。(4)冰上放置10分钟,加入NP40使终浓度为0.5%,混匀后,轻摇20秒。(5)4℃下1330×g离心15分钟得到细胞核。(6)重悬于50µl Buffer B,于冰上强烈振荡15分钟,4℃下16300×g离心10 ...

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【共享】遗传学术语[A-Z] [中英文对照]

:)A腺苷脱氨酶缺乏症Aadenosine deaminase deficiency (ADA)定义:一种严重的免疫缺陷症,腺苷脱氨酶的缺乏可使T淋巴细胞因代谢产物的累积而死亡,从而导致严重的联合性免疫缺陷症(SCID)。通常导致婴儿出生几个月后死亡。腺嘌呤Adenine (A)定义:一种含氮碱基,是碱基对A-T(腺嘌呤-胸腺嘧啶)的一部分。腺病毒adenovirus定义:一组导致呼吸道疾病(包括常见的引起感冒)的DNA病毒。腺病毒 ...

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【交流】SP细胞--肿瘤治疗新靶点

长期以来,肿瘤一直是严重威胁人类健康的重大疾病。目前,我国有恶性肿瘤患者约450万人,死亡率超过30%,而且每年新增的患者人数高达200万以上。然而,目前临床上治疗肿瘤的传统方法,如手术切除和放、化疗,对多数肿瘤的疗效有限,且始终未能彻底解决肿瘤复发和转移的问题,提示这些治疗手段很可能未靶向肿瘤发生发展的关键环节。新近的研究发现,部分肿瘤组织中存在少部分特殊细胞,被称为旁群细胞或SP细胞(side population ...

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医学分子生物学数据库、机构、电子出版物、论坛网址大全

1. National Center for Biotechnology Informationprovides GenBank, Molecular databases, Literature, Genomic biology, Tools, Research at NCBI.http://www.ncbi.nlm.nih.gov资源类型:机构2. The Genome DatabaseThe Genome Database stores and curates genomic mapping submitted by ...

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【交流】关于荧光与萤光

总有同学分不清荧光与萤光的概念,导致犯了很低级的错误,例如有人问我,为什么我把pGL转染细胞,荧光显微镜下看不到荧光那?又比如 做双荧光素检测时能不能用酶标仪检测,或者该用什么仪器测那?这都是分不清荧光与萤光的区别导致的。本文只给刚入门的师弟师妹看,大神们不要笑话。荧光,英文fluorescence,是指绿色荧光蛋白以及其变体(EGFP,CFP,ECFP,YFP,EYFP,DsRED等等)在收到激发后发射出的特定频率的光 ...

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[申请加分]DNAStar中文说明书2

DNAstar---综合性序列分析平台生物谷提供下载 www.bioon.com,感谢原整理作者GETTING STARTEDIntroductory Tour of the LASERGENE SystemMAY 2001DNASTAR, Inc.1228 South Park StreetMadison, Wisconsin 53715(608) 258-7420Copyright . 2001 by DNASTAR, Inc.All rights reserved. Reproduction, ada ...

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【共享】五十多本Humana的电子书高速下载

五十多本Humana的电子书高速下载,请大家多多支持哟!http://mamb.dvo.ru/lib/mol-methods2/abc of clinical genetics.rar 06-Aug-2003 15:17 1.6Man introduction to computational biochemistry.rar 06-Aug-2003 15:29 6.3Mantibody phage display.rar 07-Aug-2003 10:32 2.5Ma practical guide to ...

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【交流】通过文献,进一步认识EB-没有那么恐怖

在生化区引发了一篇关于AO和EB染色细胞DNA的文献,应该发在这区比较合适,这里做基因的人肯定很多,和各位交流一下,EB为啥都传得那么可怕,我从来没有查到关于EB对于哺乳动物致癌的文章,反而找到了不少文献证明了EB根本无法穿透正常完整细胞膜,也就无从插入正常活细胞的DNA,更谈不上传说中的强致癌。以下是文献,大家还可以去自己搜索,另外,让我担心的是现在很多实验室都用国产核酸染料代替EB,有些核酸染料其实就是AO ...

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【旧帖整理】 关于SSCP

1.SSCP的原理:http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=761629&sty=3&keywords=sscp%D4%AD%C0%EDhttp://www.dxy.cn/bbs/thread/18311112.SSCP的相关资料http://www.dxy.cn/bbs/thread/18311113.SSCP的具体试验步骤http://www.dxy.cn/bbs/thread/1831147ht ...

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【旧帖整理】本版无人应助帖(2006-7-1至08-15)

支持版主工作,友情整理7月1日至8月15日的无人应助帖(不规范帖出外)。年代有点久远的帖子,请您回复时同时PM给求助者:)引用yaplewang战友的一句话:七、八月是应助的淡季,,,暑假嘛,呵呵,无人应助帖比较多哦,请大家积极应助!【求助】我提DNA时出现的这种现象会不会与抗凝剂有关?拜托了,谢谢!!作者:yugang====================【求助】斑点杂交作者:sabinewen====================【求助】用G418筛选pc ...

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【旧贴整理】关于酵母相关问题

酵母相关网络资源 推荐一个关于酿酒酵母基因的网站protocols-online 送《Two Hybrid System-Methods and Protocols》 毕赤酵母操作手册 酵母双杂交系统flash动画 酵母双杂交实验常见疑难解答(转帖) 假丝酵母的基因组有没有完成测序?酵母培养 酵母基本氮源(YNB)到底哪里有卖啊??? 酵母中的振荡现象 酵母培养用YNB如何消毒? 酵母培养时,如何抑制细菌生长? 求HB101大肠杆菌菌株酵母DNA提取 酵母的基因组怎么抽提? 请教 ...

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常用分子生物学单词缩写

名 称ADP全名(英) adenosine diphosphate全名(中) 二磷酸腺苷含义 名 称 AG全名(英) 8-azaguanine全名(中) 氮杂鸟嘌呤含义 名 称 AMP全名(英) adenosine-5'-monphosphate全名(中) 一磷酸腺苷含义 名 称 AO全名(英) acridine orange全名(中) 吖啶橙含义 名 称 APRT全名(英) adenine phosphoribosyltran-sferase全名(中) 腺嘌呤磷酸核糖转移酶含义 名 称 APT全名(英) aminopterin全名(中) 氨基蝶 ...

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染色体技术(3)

人类染色体姊妹染色单体差别染色姊妹染色单体区分染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)是70年代中期发展起来的染色体处理技术。Latt(1973)在培养的细胞中加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU),当用Hoechst33258 荧光染料染色时,发现了姊妹染色单体的色差反映和它们之间互换的现象。1974年KO Renberg和Froeed-Lender改进了这一技术,建立了较简易的Brd ...

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【旧帖整理】PFGE(脉冲电泳)

最近在做脉冲电泳,很感兴趣,本版战友wasteam曾于04年做过电泳方面的整理,其中提到过脉冲电泳,但当时有关帖子较少。现将后来的贴子重新整理,以便查找。 也希望版主能给予加分。PFGE(脉冲电泳)通常的琼脂糖凝胶电泳利用双链DNA 分子在电场作用下,在凝胶中的迁移率不同而达到分离的目的。当双链DNA分子超过一定的大小以后,DNA双螺旋的半径超过了凝胶的孔径,在琼脂糖中的电泳速度会达到极限,此时凝胶不能按照分子大小来筛 ...

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【经验交流】翻译纠错汇总(内容不全,欢迎补充)

近日看了几位前辈关于翻译纠错的帖子,内容很分散,特此整理了一下,方便大家查看,内容不全,欢迎各位继续补充~~1.in the extreme elderlyThe researchers said their results show theneed for more aggressive prevention, diagnosis and treatment of osteoporosis inthis age group, referred to as the extreme elderly.in the extre ...

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[教材]Gene VII中文版

译者序近年来,我国生命科学和生物高技术领域的教学和科研正在迅猛发展,一支年轻的生物高科技教学和研究队伍正在茁壮成长。我国高校研究生教育亦形势喜人,招生数量逐年增加,招生专业和规模逐年扩大,许多知名大学都把以研究生教育和创新性科学研究为标志的高水平研究型大学定为奋斗目标。研究生队伍已成为高等学校中教学和科研工作中一支生机勃勃、不可替代的生力军。但是,目前我国高等学校(理、工、农、医院校)生命科学领域尚无一本系统的 ...

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【资源】溴化乙锭EB净化和处理方法

溴化乙锭EB净化和处理方法溴化乙锭EB净化和处理方法EB是我们从事生命科学尤其是分子生物学经常要接触的致癌性物质,且不好处理.现提供如下方法,供参考. 特别是刚走进实验室未生育的新同行,一定得学会保护自己呵,否则还涉及到下一代问题实验室中经常有EB被打翻或EB废弃物的处理问题,如何做到标准处理?1 严禁随便丢弃。因为EB是强致癌性,而且易挥发,挥发至空气中,危害很大。2 废 EB溶液的处理方法(1) 对于EB含量大于0.5mg/ml ...

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【共享】Vector NTI User's Manual 使用手冊發送

本版面公共邮箱已经收录:ng_dxy@163.com_____________________________________________Vector NTI User's Manual前言(INTRODUCTION) ....................................................................3第一章 DISPLAY WINDOWS..............................................................4一. 顯示DNA 序列及圖形........................................................... ...

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【资源】实验六 从琼脂糖凝胶中回收DNA片段

1.目的学会从琼脂糖凝胶中回收DNA片段的基本技术。2.原理限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后,按分子量大小被分开,排列在琼脂糖凝胶中,可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来,加热或用特殊的试剂熔解凝胶,使DNA溶回到溶液中,再经过乙醇沉淀或过柱即可获得目的DNA酶切片段。3.器材旋涡混合器,微量移液取样器,移液器吸头,1.5ml 微量离心管,双面微量离心管架,台式离心机,琼脂糖凝胶电泳系统,微波炉,水漂,恒温水浴 ...

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【共享】Science:CRISPR热潮(中文翻译,附英文原文)

Science:CRISPR热潮科学家们有望利用一种细菌免疫机制开发出革命性的新型基因组编辑技术(genome-editingtechnique)。细菌虽然不会对我们真核生物产生太多的同情之心,但是它们也的确是会生病的。而且细菌得病也不是和我们人类毫无关系的,至少就会对乳制品业带来很大的影响,因为在生产酸奶和奶酪的过程中都会用到嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus)这样一类细菌。嗜热 ...

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