DNA标记

核酸版有赖于yong主任、liven主任和管理员的倾心建设，以及后期加入的斑竹和各位战友的热情参与，凝聚了不少优秀的资源。为对这些优秀资源进行整理，以便于dxyer更好地利用本版资源，特向广大战友征集“旧帖整理”。有兴趣的朋友可以选择一个核酸基因技术方面的常规角度进行整理。我们将根据劳动量、整理视角的合理性、整理内容的安排的科学性等方面进行评价，赠予2分~5分不等的积分。好机会不容错过！核酸基因技术版期待因为您的 ...

微卫星DNA的研究进展1 微卫星DNA的概况1.1 微卫星DNA的构成和分布频率 微卫星DNA (microsatellite MS )，又称短串联重复序列(short tandem repeat STR)，是一类广泛存在于原核、真核生物基因组的DNA串联重复序列。STR核心序列(重复单位)2~6bp，多位于编码区附近，也可位于内含子、启动子、Alu序列中，其重复单位相同，以(CA)n、(GT)n、(CAG)n较常见，重复次数(n)多为15~60次，总长度一般 ...

【2005年3月】2005-03-14: Oxford BioMedica用RNAi慢病毒治疗家族ALS动物模型http://www.oxfordbiomedica.co.uk/news/2005-ob-09.htmhttp://www.nature.com/nm/journal/vaop/ncurrent/abs/nm1205.htmlOxford BioMedica (LSE:OXB.L), the leading gene therapy company, an ...

现在许多从事分子生物学研究的人都非常恐惧EB，希望本帖对大家有帮助。EB只不过是被证明具有“潜在”的致癌性，并不表示一定就有致癌性！而之所以说是“潜在”的致癌性，仅仅是因为其致癌性是通过细菌诱变实验(Ames 测试)证明的结论。然而，用细菌进行检验的结果并不一定就能直接证明对人体或其它种类的生物具有相同的效果，这也就是为什么以前的《分子克隆》也只说EB有可能具有致癌性，而不是一定就是致癌物质的原因。Ames测试也只是对 ...

该贴内容较多，我花5天才整理成这个样子，但仅我一人之力，虽劳苦却难以求全，遗漏之处难以避免，请大家补充分子杂交分子杂交(综述)1、Southern杂交1-1、southern-blot protocolSOUTHERN BLOT PROTOCOL（English version）SOUTHERN BLOTTING操作手册DIG Application Manual非放射性的southern 杂交方法Southern转膜的方法Southern/ ...

1双元载体的农杆菌转化1.1农杆菌感受态细胞的制备1.1.1. 取-70℃保存的EHA105于含50μg/ml链霉素平板划线，28℃培养。1.1.2. 挑取单菌落接种于5ml YM液体培养基中，220rpm 28℃振荡培养12-16 hr。1.1.3. 取2ml菌液转接于100ml YM液体培养基中，28℃220rpm振荡培养至OD600=0.5。1.1.4. 转入无菌离心管，5000rpm离心5min,去上清液。1.1.5. 加入10ml预冷的0.1M的CaCl2 ...

分子生物学技术讨论区精华索引说明：分子生物学技术讨论区本由Yong主任提议开辟便于大家讨论分子生物学方面问题，但大量所要书籍的跟贴严重妨碍了对技术问题的讨论，导致该贴被锁定。然其中有不少精华帖子亦被淹没，偶心中不忍，奋战几日，将一些对大家可能有所帮助和启发的帖子集中于此，制成索引，有归纳不当之处，还请Yong主任及其他站友指出！基因表达与克隆方面：http://www.dxy.cn/bbs/thread/40236h ...

美国国家生物技术信息中心(National Center of Biotechology Information ,NCBI) 充分利用Internet ,为用户提供了丰富的生物信息资源。NCBI 的BLAST 程序是进行核酸序列和蛋白质序列相似性比较的优秀工具。1 　BLAST简介NCBIBLAST(Basic Local Alignment Search Tool ,局部对比基本检索工具) 是将核酸序列或蛋白质序列与可用的序列数据库进行相似性比较的一系列程序。其核 ...

【CRISPR/Cas9系统的发现历史和应用-@华夏凯奇】-兼谈八卦。水平有限，不准确和班门弄斧之处，还望大家斧正。copyright@华夏凯奇一、CRISPR系统的发现-从细菌的获得性免疫说起CRISPR系统实际是细菌的一种获得性免疫系统。细菌被phage侵染之后，可以获得phage的DNA片段整合进基因组形成记忆，当再次遭到入侵时，从对phage形成免疫。1） 早在1987年，日本人在大肠杆菌中发现有串联间隔重复序列 ...

英《新科学家》评选出2008年十大典型基因话题 据《新科学家》网报道，2008年，有关基因的话题数不胜数，很多公司利用有关基因的科研成果赚了不少钱。遗传学关于基因对人类的行为有着决定性作用的说法也越来越流行，我们不得不重新用一种新的视角来看待我们的生活。《新科学家》网站为我们评选出了2008年十大最典型基因话题。让我们来一一回顾。1、测试自己的基因 预测自己的未来“基因检测”，这个过去几乎不为人知的科学名词，最近频繁出现在 ...

外周血培养基配制一、配制用水培养基的大部分是水，所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准，水的电阻应为200万欧姆，一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。二、培养基培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基，以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）调pH至7.2～7.4，若pH值超过7.6或远低于6.8，则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐 ...

版主:最近小弟买了两套最新的《细胞培养技术》以及《分子生物学实验技术》的光碟，大约有1.1G，有需要的兄弟没有，如果有的话怎么样才能与大家共享？今天，我先把《分子生物学实验技术》光碟所包含的书名列在下面，请大家过目！1、《Molecular Cloning :A laboratory manual 》2、《PCR Cloning Protocols》Second Edition ,433页3、《PCR Mutation Detection Protocols》223 ...

欢迎来到《核酸基因技术讨论版》：本版归属于“实验技术讨论区”，以讨论各种以核酸基因为对象的理论和实验技术。本版的宗旨是为您提供各种核酸基因的相关理论和实践经验的交流平台！欢迎您参与交流！发贴必读&加分标准：1、本版欢迎0分站友参与讨论，加分特优。20分以下的战友，加分从优。2、对置顶的零回复帖进行回贴的战友，加分从快从优。3、对本版置顶帖子的讨论，或积极参与各位斑竹发起的各种活动，加分从优。对本版的建设提出任何意见或建议 ...

MicroRNA ProtocolsEdited by Shao-Yao YingDepartment of Cell and Neurobiology, Keck School of Medicine,University of Southern California, Los Angeles, CAContentsPreface ............................................vContributors .......................................xi1. The MicroRNA: Overvi ...

全基因表达谱差异研究有这些方法，EST测序（成本巨大）、DDPCR（特异性差，基本已经不用）、基因芯片（技术上比较复杂，数据处理工作量大）、SAGE技术（相对较科学，实验数据较可靠、花费较大）等。个人推荐：（本人原创，请斑竹加一分表示鼓励）cDNA-AFLP是从AFLP (amplified fragment length polymorphism) 衍生而来的RNA指纹识别技术，现已发展成较为成熟的转录组研究技术（Donson, et al., 2002） ...

我也是从网上收集过来的，仅供相关人员参考！DIG标记的Northern杂交试验指导一、 RNA提取方法一、改良异硫氰酸胍提取法试剂及其配制异硫氰酸胍变性液：贮存液－在含484ml 水（经DEPC处理）, 17.6ml 0.75mol/L柠檬酸钠（pH7.0）和26.4ml10%Sarkosyl的溶液中加入250g异硫氰酸胍，加热至60~65℃并持续搅拌使之充分溶解。贮存液室温保存备用（不超过3个月）。工作液－在每50ml贮存液中加入0.3 ...

PCR技术在分子生物学领域的重要性自不必多说，各种新的PCR技术也不断涌现。引物的设计是进行各种PCR的重要前提条件。虽然现在有很多软件可以设计并评价引物，但在实际的PCR扩增过程中，必须对反应体系和反应条件进行优化，尤其是引物浓度，Mg2＋浓度，退火温度等。有时候无论我们如何优化，也拿不到目的产物，只能重新设计。鉴于在引物的设计和合成过程中所花费的时间、精力和财力（尤其对于新手而言），本着资源共享的原则，建立丁香 ...

本版有较多关于promoter的讨论，其中不乏精彩好贴，本人也受益较多，现试着总结归纳了如下，希望对大家有用：　　启动子是DNA分子可以与RNA聚合酶特异结合的部位，也就是使转录开始的部位。在基因表达的调控中，转录的起始是个关键。常常某个基因是否应当表达决定于在特定的启动子起始过程。启动子一般可分为两类:　　(1)一类是RNA聚合酶可以直接识别的启动子。这类启动子应当总是能被转录。但实际上也不都如此，外来蛋白质可对其有影响， ...

国家人类基因组北方研究中心对外开展重组腺病毒构建包装服务通过与美国Vector Biolab公司合作，国家人类基因组北方研究中心（北京诺赛基因组研究中心有限公司）利用优越的实验条件和训练有素的科研人员，成功构建的一个集克隆、包装、扩增、纯化为一体的重组腺病毒构建技术平台。从2005年7月成立腺病毒小组并开展实验至今，为课题组内部完成包装200多个腺病毒，为Vector Biolab公司成功包装近300个腺病毒，并且 ...

New England Biolabs（NEB 公司）隆重推出蛋白质标记 SNAP-tag 最新技术，该项技术可以在活细胞及固定细胞中研究蛋白质的功能和定位。SNAP-tag 技术能将哺乳动物细胞体内蛋白质成像并且体外捕获蛋白质，为研究蛋白质提供了强有力的工具。其工作原理是：构建基因，表达融合蛋白质，再与多种荧光基团、生物素或磁珠形成共价结合。为了使用方便，NEB 提供两套系统：一套是标记物可以直接自我标记构建好的融合蛋白质（SNAP-tag 和 ...