无论是保存还是运输,请避免反复冻融。反复冻融,冰晶会破坏抗体和重组蛋白的空间结构,导致蛋白变性形成多聚体和重组蛋白构象改变,从而降低抗体的结合能力,也加快了抗体球蛋白和重组蛋白的降解速度。抗体和重组蛋白保存得当与否,直接决定了抗体和重组蛋白的活性使用效果,如果保存得当,Cambridge Bio的抗体和重组蛋白活性大部分都可以维持数年。1. 收到抗体和重组蛋白后的操作收到抗体和重组蛋白后(大部分抗体和重组蛋白是溶液态) ...
据估计,因抗体质量不佳, 生命科学领域每年的损失达到 8 亿美元。这也造成了无数的实验失败,浪费了宝贵的资源和科学家的时间。尽管科学界已经意识到这个问题,但目前仍然缺乏抗体验证的整体框架。为了刺激研究界实现更高标准的抗体重复性,国际抗体验证工作组(IWGAV)于 2016 年 9 月份出台了一套抗体验证指南并发表在《Nature Methods》杂志上, 题为「A Proposal for Validation of Antibodies」, 强调了抗体验证需要针对应用和 ...
单克隆抗体单克隆抗体药物一直都是免疫治疗的热点,也成为医药巨头竞争的前沿阵地。1997 年:FDA 批准的针对 CD20 的利妥昔单抗。80 年代后期:针对 HER2,CD52,EGFR 和 VEGFR 的单抗每个都是重磅炸弹。2013 年:从肿瘤药销售额前20名来看(如下图),前三名重磅炸弹均来自于单克隆抗体药物。而针对肿瘤免疫疗法 BMS 的Yervoy 自 2011 年上市以来成为后起之秀,也标志着癌症免疫疗法的开端。癌症免疫疗法被各大顶级学术杂志评为最佳科学突破, ...
环佩从容 要做下一步实验啦,这两个抗体选哪个呀,目前研究有没有区分哪一个更好点啊ronaldo_zj 楼主您好。1. 楼主需要知道Pro caspase-3以及Cleaved caspase-3的功能以及检测手段,不是说哪个好那个不好的问题,而是根据你的课题需要检测何种片段的问题。请楼主先具体查阅关于caspase活化的文献后再定好实验计划;2. 目前多数研究均认为Cleaved caspase-3的表达水平与caspase的活化密切相关 ...
dj070886 从CST新买了一支U0126,是冻干粉,而且是用CST公司那种装抗体的管子装的,没有封口,请问这种状态下的粉子是有菌的还是无菌的?求助啊,求助chp_cn 应该是无菌的,你应该到culture hood中稀释好,分装到无菌的小管中保存。good luck!seagate 就算有菌,拿dmso溶解为母液就可以用了,dmso号称万能溶剂,本身就有强大的杀菌能力吕文明 既然提出来了这个抑制剂,我问一个问题:U0126 作为RAS ...
48126 http://www.univ-bio.com/Products.asp我在优宁维的网站上查到很多关于C-JUN的抗体,磷酸化又分很多种,不知道如何选择,有知道的战友指点一下,谢谢!我要准备做WB,IHC.biolinkphilic 我觉得如果真想在这家公司购买,咨询该公司就可以了。其实专业的抗体网站看看就知道应该要了解那些信息。如Abcam、santa cruz和cst等等最后,提供一个学习的博客,可以看看http:/ ...
znsdavid 抗体,是我们非常熟悉的一种生物试剂, 但我们对抗体的鉴定,选择又了解多少呢某著名抗体公司的科学家在行业内提出全新的抗体选择标准“PASS”。通过客观的参数指标和专家的观点,科研人员只需要仔细的阅读抗体的说明书,再结合 “PASS”的抗体选择标准,就可以在一定程度上自己鉴定选择抗体的品质。“PASS”抗体选择标准是指科研人员在选择抗体的时候,应留意抗体说明书中抗体纯化工艺(Purification),抗原信息( ...
青鸟使者 小弟刚接触细胞信号转导,做VEGFR-2,有个基础的菜鸟问题,VEGFR-2有6个自磷酸化位点,我做的是抑制其磷酸化的小分子抑制剂,观察其对VEGFR-2磷酸化的抑制作用,那western-blot时选哪个磷酸化位点的抗体检测好呢?还是都一样?先谢谢高手相助!xb0810 应该先看看文献,一般下游不同的分支的激活可能与不同的位点磷酸化有关。shutaozheng_824 还是查SCI文献吧!信号通路研究中,Cell Si ...
sunchangzheng 我打算用此抗体通过流式检测细胞表面P糖蛋白的表达量差异。说明书中说是多抗,这种抗体有单抗的吧?用于FCM: 1:20-100,这是说用于流式的稀释倍数,是不是稀释倍数越小越好呢?同型对照抗体是不是必须要做的?如何选择阴型同型对照抗体呢!我用的抗体是FITC标记的P-糖蛋白抗体谢谢交流与帮助!freecell 抗体的稀释倍数是需要优化的。sunchangzheng freecell wrote:抗体的稀释 ...
zhubaoqinzhu 各位大侠,我急需要搞清楚怎么选择小鼠基因组甲基化抗体!!!!!希望哪位专家给指点一下。非常感谢!freecell 主要取决于你做什么试验,以后请别问这么莫名其妙的问题!http://www.abgent.com/products/category/protein_modification/methylationzhubaoqinzhu 不好意思,我最近在做对小鼠成纤维细胞的整个基因组的甲基化水平检测,我是 ...
三叶虫 请各位园友,怎么可以检测我买回来一抗和二抗的质量,我之前买了Santa Cruz抗体开始几次还可以做出条带,现在连β-actin都做不出来,现在准备买另外一个公司的,请问有没有什么预实验可以检测我的抗体质量?谢谢各位帮忙。。ylhuang0502 比较快速的方法就是用dot-blot,几个小时就可以看到结果,你可以google一下,网上关于dot-blot的protocol非常之多。good luck!三叶虫 dot-blo ...
三叶虫 大家好,我最近准备做NF-κB信号通路中的P65,P50还有IKK,IκB。请问各位买哪个公司的抗体好,中衫的怎样?望各位多多指教。谢谢!!三叶虫 顶自己一下。。siru1234 你好,建议你买大品牌的抗体,质量有保证,我以前就曾用过abcom和sigma 的抗体,挺好用的。我们公司专门做血清的,如果你有需要可以联系,QQ:1137173658,电话:021-61729873,网址:www.biocando.cndianaofye ...
aidiandian 请教各位师兄,师姐,caspase-3 抗体哪家公司的既便宜又好用啊?在下不胜感激···w_dennis 各位师兄师姐,本人同问该问题,还有caspase-9抗体?nccunccu cell signallingseagate cst有sample kit,带全了,每样40微升selenium Signalway antibody提供免费试用哦,xsk_bio@163.com环佩从容 cell signaling原装最划算。本文由丁香园 ...
luozhifeng339 请教各位达达,我准备做EMSA,如果做SUPER-SHIFT的话,该选择原装抗体还是分装的抗体呢,盼不吝赐教!wanglinling 看到一篇EMSA的文章,不知道里面有没有回答你的问题哈,不过英文的值得阅读哈。GEL SUPER-SHIFT ASSAY/ EMSAMaterials/Reagents:See Gel-shift assayProcedure:1. Prepare Whole Cell Extract. Make sure ...
zxhuang209 请问:荧光标记二抗除了红、绿、蓝。还有其他颜色的吗?talitha 这里有个列举,lz去看看吧,荧光染料还是很多的,但要看你的滤色块是否够用。http://www.microimage.com.cn/bbs/read.php?tid=3726zxhuang209 thanks a lot本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号:shixiongco ...
superman211 拟通过WB进行AP-1的相关研究,在选择一抗时遇到如下困惑,望了解的战友予以解答。关于AP-1的出c-jun的一抗有多种,其中主要分为磷酸化一抗、非磷酸化一抗两大类。每一大类又包含若干,不知如何选择,它们之间有何区别?实验目的为研究某细胞AP-1的表达情况,及其蛋白磷酸化和DNA结合活性等。superman211 自顶,望解答,谢谢!ziyunfei ampk细胞通路是通过磷酸化激活下游的,磷酸化的就是 ...
dongreyuan 有的抗体名称上面写着Ab-33,比如,β-catenin(Ab-33)antibody,请问,Ab-33是什么意思?bettyzyj 这个抗体是非磷酸化的抗体non-phospho-antibody ,33 代表的是基因位点dongreyuan 谢谢了yhwangcams bettyzyj wrote:这个抗体是非磷酸化的抗体non-phospho-antibody ,33 代表的是基因位点感觉不应该说“33 代表的是基因位点”,准 ...
一 抗体选择指南:检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,为缩小抗体的选择范围选中合适的抗体,需要考虑如下几种因素:1. 分析或应用的类型2. 样本蛋白的结构性质3. 样本的种属4. 抗体宿主的种类5. 抗体的标记和检测1 分析试验的应用类型一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型,如:可以应用于WB IHC ICC ELASA 分析等,如果抗体说明书没有提及的应用类型,并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型,而仅是说明尚未经过此种 ...
上皮及间皮类常用标记抗体EPITHELIAL AND MESOTHELIAL MARKERSCK (MNF 116)- MNF-116 is a pan-cytokeratin antibody.- Source: Dakopatts.- Dilution 1:50.- Antigen retrieval method: HIER (pressure cooking) using EDTA.- Staining pattern: Cytoplasmic, typically fibrillary, with or without acc ...
抗原修复技术及其在免疫组化中的应用福尔马林固定时,组织中的许多氨基酸残基在分子内或分子间形成了醛键,使得不少抗原决定簇被封闭。同时,由于甲醛的聚合作用,使蛋白质分子间相互交联形成大分子网络,也导致了抗原决定簇被掩盖,这就使得相当部分的抗原不能与抗体很好是进行反应。因此,抗原修复也是影响免疫组化染色结果的基本因素。抗原修复(Antigen retrieval ,AR)技术,建立在Fraenkel-conrat等人一系列生 ...