抗原设计

（一）原理 利用酶标记抗原（抗体）和待测抗体（抗原）在电场中向一定方向移动，在比例适当的地方形成沉淀线，通过酶作用底物而显色，指示沉淀线的存在。该法的敏感性大大高于对流免疫电泳。 本试验以检测血吸虫抗体为例。（二）材料与试剂1．0.02Mol/pH 8.6巴比妥缓冲液 巴比妥 0.553g 巴比妥钠 ...

（一）原理当抗原遇到相应的抗体便形成抗原抗体复合物（Ag＋Ab ↔Ag －Ab），当用放射性同位素标记抗原再与相应的抗体结合便形成标记抗原和抗体复合物。即： Ag Ab↔ Ag－Ab。当标记抗原和未标记抗原一起加入相应的抗体时则两种抗原产生相互的竞争，而生成有标记抗原和抗体复合物以及非标记抗原和抗体复合物。生成标记抗原抗体复合物与非标记抗原的含量在一定的限度内是呈反比的，所以利用这个原理去测定未知 ...

（一）材料1．血清2．葡聚糖凝胶G2003．洗脱液0.01Mol/L pH7.4PBS（0.14Mol/L NaCl或0.1Mol/L pH8.0 Tris－HCl 0.14Mol/L NaCl）。（二） 操作方法选取2.50cm×90cm层析柱，用葡聚糖凝胶G200装柱，平衡后，直接加血清样品10ml或硫酸铵粗提制品，洗脱液洗脱，流速0.25ml/min，分管收集，测OD280值，第一峰即为I ...

（一）材料与试剂配制1．动物血清2．硫酸铵饱和溶液硫酸铵 800g~850gH2O 1 000ml加热至绝大部分溶质溶解为止，趁热过滤，置室温过夜，然后以28％NH4OH调pH至7.0（不调pH值也可以）。注：硫酸铵以质量优者为佳，因次品中含有少量重金属对蛋白质巯基有影响。如次品必须除去重金属，可在溶液中通入H2S，静置过夜后滤过，加热蒸发H2S即 ...

（一）制片 选无自发性荧光的石英玻片或普通优质玻片，洗净后浸泡于无水乙醇和乙醚等量混合液中。用时取出用绸布擦净。将待检样品如组织块剪成适当大小印压于玻片上。也可采用冰冻切片或石蜡切片样品。（二）固定 除研究细胞表面抗原或不稳定抗原可不固定外，一般均应固定。固定的作用有三：①防止标本从玻片上脱落；②除去防碍抗原—抗体结合的类脂，使抗原抗体结合物易于获得良好的染色结果；③固定的标本易于保存， ...

（一）材料与试剂配制1．DEAE52纤维素2．0.10Mol/L ZnSO4液ZnSO4·7H2O 2.88g加水至1 000.00ml3．饱和硫酸铵溶液4．10％EDTA—Na5．SephadexG2006．0.01Mol/L pH7.4PB液7．0.10Mol/L pH6.4PB液8．血清（二）操作方法1．取血清加等量的0.1Mol/L ZnSO4液，调pH至7.0，室温搅拌 ...

（一）材料与试剂1．初乳2．SephadexG2003．0.10Mol/L pH6.8PB液4．0.01Mol/L pH7.4PB液5．DEAE52（二）操作方法1．取初乳20ml，10 000rpm离心10min，弃去表面脂肪层及底部的沉淀物。2．取乳清过SephadexG200柱（柱规格为2.50cm×90cm），以0.10Mol/L pH6.8PB液洗脱，第一峰为IgA（含IgG）。3． ...

一、定义； 免疫PCR是利用抗原抗体反应的特异性和PCR扩增反应的极高灵敏性而建立的一种微量抗原检测技术。 用抗体检测抗原是免疫学的最基本方法，用酶或同位素标记抗体可使检测的敏感性提高，常用的定量检测方法ELISA和RIA均基于标记分子可以使检测的信号增强。免疫PCR是在ELISA的基础上建立起来的新方法，用PCR扩增代替ELISA的酶催化底物显色。PCR具有很强的放大能力，其可以定量 ...

１　原理　　用一种能破坏血液中的红细胞，但能保护血小板形态完整的稀释液稀释血液，滴入血细胞计数池，在高倍镜下直接计数血小板数。２　器材和试剂　　器材同白细胞计数法。稀释液用许汝和氏尿素稀释液。许汝和氏尿素稀释液配制法：尿素１０ｇ， 福尔马林０．１ｍｌ， 枸橼酸钠０．５ｇ，加水至１００ｍｌ，溶解后过虑，在冰箱内保存。３　操作步骤　　ａ．用２ｍｌ吸管准确吸取血小板稀释液０．３８ｍｌ置小试管中。　　ｂ． ...

　１　试剂　　ａ．固定液：甲醇。　　ｂ．磷酸盐缓冲液：１％磷酸二氢钾３０ｍｌ，１％无水磷酸氢二钠２０ｍｌ，用蒸馏水加至１００ｍ１。　　ｃ．姬姆萨染色液：　由姬姆萨氏染粉 ０．５０ｇ、　甘油 ３３．００ｍｌ及甲醇３３．００ｍｌ配成。先溶解姬姆萨氏染粉于甘油内，置于６０℃水温箱内２小时，再加入甲醇，混合即可。　　２　方法　　从耳垂取血涂片，要求血片均匀，不能过厚。片上涂一薄层甲醇，使血片固定，但不要滴 ...

１　原理　　中性粒细胞中的碱性磷酸酶（简称碱酶）在一定条件下能使β－甘油磷酸钠水解释出无机磷， 后者与钼酸试剂结合成磷钼酸复合物， 再以氨基萘酚磺酸还原为钼蓝而呈现蓝色，用光电比色法求得所释放的无机磷含量，表示酶的活性。　 ２　试剂　　ａ．葡聚糖：分子量２０万，用生理盐水配制成２％溶液，在冰箱中可保存一个月。　　ｂ．β－甘油磷酸钠溶液（０．０２６Ｍ）：称取β－甘油磷酸钠溶于碳酸—重碳酸盐缓冲溶液， ...

１　试剂　　ａ．固定液：加甲醛１０ｍｌ于无水甲醇９０ｍｌ中。　　ｂ．缓冲底质液（须临用时配制）：由１０％巴比妥钠３０ｍｌ、３．２％β－甘油磷酸钠３０ｍｌ、Ｍ／１０硫酸镁３０ｍｌ、２％硝酸钙４５ｍｌ及蒸馏水１６５ｍｌ配成。　　ｃ．清洗液：在蒸馏水中加几滴２％硝酸钙液。　　ｄ．２％硝酸钴。　　ｅ．稀硫化铵液：硫化铵１ｍｌ加水至８０ｍｌ。　　ｆ．２％碱性藏红水溶液。２　方法　　ａ．指端取血推片，不宜太薄 ...

一、基本原理 某些物质的分子能吸收能量而发射出荧光，根据荧光的光谱和荧光强度，对物质进行定性或定量的方法，称为荧光分析法（fluorescence analysis）。 荧光分析法具有灵敏度高、选择性强、需样量少和方法简便等优点，它的测定下限通常比分光光度法低2~4个数量级，在生化分析中的应用较广泛。在室温下分子大都处在基态的最低振动能级，当受到光的照射时，便吸收与它的特征频率相一致的 ...

ELISA 普遍用作非放射性同位素的成键化验. 在这种方法中 通常标准配体是固定的 通过加入溶液相受体或蛋白质来使之成键. 通过加入与受体特异性反应的抗体来定量成键的受体 而且最初抗体的量以加入第二种能显色的抗体测量. 第二种抗体能识别抗体的末端 在其末端的碱性磷酸酯或过氧化物酶等与酶发生反应 从而使溶液显色. ...

免疫系统受抗原刺激后，B细胞转化为浆细胞，由浆细胞产生与抗原发生特异性结合的球蛋白，这类球蛋白称为抗体(antibodyAb)。 免疫球蛋白(immunoglobulimIg)是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。 免疫球蛋白普遍存在于哺乳动物和人类的血液、组织液和外分泌中。人体的免疫球蛋白主要有五类：IgM、IgA、IgG、IgD、IgE。 (一) 抗体结构 抗体是具 ...

抗体(antibody) 机体在抗原物质刺激下，由B细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。因为最初有人用电泳证明血清中抗体活性在γ球蛋白部分，故曾把抗体统称为两种(γ)球蛋白。后来证明，抗体并不都在γ区；而且位于γ区的球蛋白，也不一定都具有抗体活性。1964年，世界卫生组织举行专门会议，将具有抗体活性以及与抗体相关的球蛋白统称为免疫球蛋白(Ig)。如骨髓瘤蛋白， ...

抗原(antigen Ag)是一类能诱导免疫系统发生免疫应答，并能与免疫应答的产物(抗体或效应细胞)发生特异性结合的物质。抗原具有免疫原性和反应原性两种性质。 免疫原性是指抗原刺激机体后，机体免疫系统能形成抗体或致敏T淋巴细胞的特异性免疫反应。 反应原性是指产生的抗体或致敏T淋巴细胞能与抗原进行特异性结合的免疫反应。 既具免疫原性又具反应原性的抗原称免疫原。某种物质之所以能成为 ...

　　病原侵入机体后，由于其生物学特征的不同，可分为胞外菌感染和胞内菌感染两类，机体对这两类感染的免疫反应是有差别的。　　（一）胞外寄生菌的抗感染免疫　　1．抗体对细菌繁殖的抑制作用：抗体与细菌结合，可以出现凝集和鞭毛制动现象，但一般而言，对细菌的活力只有微弱的影响，甚至没有影响。如果抗体的结合能抑制细菌的重要酶系统或代谢途径，则可能抑制细菌的生长。例如，某些细菌（例如败血巴氏杆菌）从血清转铁蛋白摄 ...

红细胞膜中夹杂着3种蛋白质：糖蛋白、简单蛋白及膜收缩蛋白。红细胞抗原有些突出在细胞表面，好像伸出在地面上的树枝，如ABH抗原；有些镶嵌在细胞膜内，如Rh抗原。抗原与抗体发生特异反应的部分，叫做抗原决定簇。血型抗原决定簇的化学组成，有的已经清楚，但大部分不清楚。有些血型在体液中存在可溶性抗原，叫做血型物质。从人体分离出来的ABH及Lewis血型物质是糖蛋白，即在肽链的骨架上连接着一些糖的侧链，这些糖 ...

天然自身抗体(natural autoantibodyNAA)是指在没有任何抗原主动免疫的情况下，正常机体内天然产生并存在的免疫球蛋白。历史上人们对NAA的认识经历了一个复杂而矛盾的过程，从一开始把所有的自身抗体一概看作是"可怕的自身毒素（horror autotoxicus）"，到发现并证实了NAA在正常人体内的存在，目前已逐步认识到NAA具有一系列重要的生物学功能，是机体天然免疫的重要组成部分 ...