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抗原设计

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A safe method of extracting DNA from Coccidioides immitis

A safe method of extracting DNA from Coccidioides immitisAustin Burt(1) Deidre A. Carter(2) Gina L. Koenig(2) Thomas J. White(2) and John W. Taylor(1) (1)Department of Plant Biology University of Cali ...

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A simple, rapid procedure for the isolation of DNA for PCR

A simple rapid procedure for the isolation of DNA for PCR from Gibberella fujikuroi (Fusarium section Liseola)N.M. DuTeau and J.F. Leslie - Department of Plant Pathology Throckmorton Hall Kansas State ...

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Fungal DNA Isolation

Fungal DNA IsolationSaghai-Maroof MA Soliman KM Jorgensen RA & Allard RW (1984) PNAS 81:8014-8018DNA successfully isolated from fungal species of Cochliobolus Aternaria and Fusarium. The key elements ...

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Small scale DNA preps for Neurospora crassa.

Small scale DNA preps for Neurospora crassa. J. Irelan V. Miao and E.U. Selker - Institute of Molecular Biology University of Oregon Eugene OR 97403-1229Molecular biology experiments often require pre ...

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An Ultra-fast method of DNA extraction from Neurospora

An Ultra-fast method of DNA extraction from NeurosporaEdward B. Cambareri and John A. Kinsey - Department of Microbiology Molecular Genetics and Immunology University of Kansas Medical Center Kansas C ...

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A novel method of growing fungi for DNA extraction

A novel method of growing fungi for DNA extractionKeith A. Seifert Centre for Land and Biological Resources Research - Agriculture Canada Research Branch Ottawa Ontario K1A 0C6 CanadaPreparation of fu ...

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A quick RNA mini-prep for Neurospora mycelial cultures

A quick RNA mini-prep for Neurospora mycelial culturesLindgren K.M. A. Lichens-Park J.L. Loros and J.C. Dunlap Dept. of Biochemistry Dartmouth Medical School Hanover NH 03756. Most RNA isolation techn ...

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Fast and reliable mini-prep RNA extraction from Neurospora crassa

Fast and reliable mini-prep RNA extraction from Neurospora crassaV. Sokolovsky+ R. Kaldenhoff M. Ricci and V.E.A. Russo - Max Planck Institut für molekulare Genetik + On leave from A.N. Institute of B ...

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A practical method for the preparation of total DNA from filamentous fungi

A practical method for the preparation of total DNA from filamentous fungiM.I. Borges M.O. Azevedo R. Bonatelli Jr. M.S.S. Felipe and S. Astolfi-Filho Departamento de Biologia Celular Universidade de ...

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Bacteriology

Introduces basic methods of bacteria culture such as media and plate preparation growing streaking and storing bacteria. 点击浏览该文件 ...

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抗体的标记方法

荧光色素标记抗体1.准备好凝胶滤柱以便完成结合反应后用于分离标记抗体和游离的荧光色素。分离球形蛋白使用排除极限为20 000~50 000的凝胶介质和细粒级凝胶(直径约50μm)。所需凝胶滤柱的大小可根据偶联反应的总体积×20来确定。依据厂家说明准备好滤柱,用20倍柱床体积的PBS灌注滤柱,直至缓冲液水平刚好降至低于柱床顶部,关闭滤纸底部的阀门或用塑膜黏土(或parafilm)封闭底端以使滤柱不再 ...

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沉淀反应技术(Precipitation reaction technique)

一、 概述可溶性抗原(如细菌浸出液、含菌病料浸出液、血清以及其他来源的蛋白质、多糖质、类脂体等)与其相应的抗体相遇后,在电解质参与下,抗原抗体结合形成白色絮状沉淀,出现白色沉淀线,此种现象称为沉淀反应。沉淀反应中的抗原叫沉淀原(precipitinogen)与沉淀原发生反应的抗体称为沉淀素(precipitin)。沉淀反应的发生机制与凝集反应基本相同。不同之点是:沉淀原分子小,单位体积 ...

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免疫组化非特异性染色的消除方法

一、非特异性染色的主要因素 组织的非特异性染色的机理很复杂,其产生的原因主要可分为以下几点: (1)一部分荧光素未与蛋白质结合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去 。 (2)抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白,可与组织成分结合。 (3)除去检查的抗原以外,组织中还可能存在类属抗原(如Forssman氏抗原),可与组织中特异性抗原以外之之相应抗体结合。 (4)从组织中难于提纯抗原性物 ...

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免疫组化非特异性背景染色及其控制方法

一、非特异性染色的识别常出现在组织边缘、胶原纤维及血浆渗出处,坏死组织及固定不良的组织中心处。表现为弥漫性,均匀性的背景染色。也可以是随机分布的阳性反应产物点、团或块状。二、非特异性染色的原因1. Ig与Fc受体结合多见于冰冻切片(特别是淋巴造血组织,淋巴细胞,单核细胞,组织细胞表面多),主要是和二抗反应,因为一抗一般稀释度均较大,因此Fc受体的干扰基本不存在。由于福尔马林固定破坏了大部分的Fc受 ...

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免疫组化操作规程

(一)、仪器设备1)18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉; 2)水浴锅(二)、试剂 1)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L。 2)0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液(CB,pH6.0,1000ml):柠檬酸三钠 3g,柠檬酸 0.4g。 ...

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免疫组化常见问题的处理

当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色 ① 确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以及所用的检测系统是否和一抗匹配,这一点是非常重要的。比如,如果一抗是兔来源的抗体,二抗一定要用抗兔的 ...

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免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及对策

良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节,每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果,因此,要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色可以存在各种各样的问题,但从染色的结果看,一般可分为两类:无色片(即无阳性信号)和“杂音”染色片( ...

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影响ELISA试验效果常见问题原因分析及解决办法

ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给同行带来一些启发,提高试验质量。 操作步骤 可能原因 解决办法 选择试剂 选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。 加 样 1 ...

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Large-scale Immunocytology

This protocol describes our method for preparing cells for immunofluorescence in which all incubations and washes are performed in microtiter dishes. Two dishes can be processed simultaneously. The la ...

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Fluorescence Mounting Medium (Antifade)

Materials Needed20ml glass scintillation vial Small stir bar Foil Glycerol 1X PBS Pipets * P-phenylenediamine ( EMD Chemicals Inc. Cat# PX0730) Carbonate-Bicarbonate Buffer (see below) Wrap a glass sc ...

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