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抗原设计

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【推荐】免疫胶体金稀释液的原则总结

相关专题 制备好免疫胶体金后,还需要将其稀释到一定浓度,并吸附于特殊的惰性介质中才能够最终制成产品。一般来说,特殊的介质常用的是玻璃纤维或无纺布。玻璃纤维和无纺布本身一般是疏水的,胶体金产业一般采用表面活性剂预处理过的玻璃纤维或无纺布,通常配方为1%Tween20+适量PVA。介质处理完成后,免疫胶体金稀释液的配伍才是最关键的。现总结原则如 ...

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免疫组化常见问题分析

相关专题 1、 一抗从4度拿出后,为什么要进行37度复温? (1)一方面,防止切片从4度直接放入PBS易脱片; (2)另一方面,使抗原抗体结合更稳定。一般不需要,但对表达较弱的抗原可能有用,4度和37度时分子运动方式不同,前者分子碰撞机率和运动速度小于后者,后者结合更快,但敏感性也提高了并易造成非特异染色。 (3)其实,我更赞同后一种说法, ...

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ELISA免疫标记技术实验原理

相关专题 ELISA免疫实验技术 免疫标记技术是将一些既易测定又具有高度敏感性的物质标记到特异性抗原或抗体分子上,通过这些标记物的增强放大效应来显示反应系统中抗原或抗体的性质与含量。常用的标记物包括荧光素、酶和放射性核素等,用这3种标记物进行标记的免疫检测技术被称为3大免疫标记技术。目前,使用的免疫标记物还有化学发光物质、铁蛋白和胶体金等。 ...

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免疫组化染色过程常见问题及解答

相关专题 良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节,每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果,因此,要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色可以存在各种各样的问题,但从染色 ...

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荧光显微镜标本制作要求

相关专题 科研推动力:荧光显微镜 1、荧光显微镜 荧光显微镜是免疫荧光组织化学的基本工具,分透谢和落射二种类型,落射光无需镜内操作,方便、效果更好。它是由超高压光源、滤板系统(包括激发和压制滤板)和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。 2、荧光显微镜标本制作要求 (1)载玻片 ...

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免疫组化与抗原修复技术的应用

相关专题 如何实现完美的免疫组化实验抗原实验技术及研究进展 福尔马林固定时,组织中的许多氨基酸残基在分子内或分子间形成了醛键,使得不少抗原决定簇被封闭。同时,由于甲醛的聚合作用,使蛋白质分子间相互交联形成大分子网络,也导致了抗原决定簇被掩盖,这就使得相当部分的抗原不能与抗体很好是进行反应。因此,抗原修复也是影响免疫组化染色结果的基本因素。抗原 ...

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H

相关专题 (一)材料及试剂1.培养基 RPMI-1640或TC199培养液2.PHA 同形态学方法3.小牛血清4.3H-TdR 选用比活性为2Mci~10Mci/mg分子的制品,将1 Mci/ml溶液以生理盐水稀释成100µci/ml,于4℃保存备用。临用时再用培养液稀释成10µci/ml溶液。5.3%冰醋酸6.浓甲醛7.30%H2O2液8. ...

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免疫组化的作用

相关专题 如何实现完美的免疫组化实验 由于免疫组化具有特异性强、灵敏度高、定位准确等特点,且能将形态研究与功能研究有机地结合在一起,所以,这门新技术已被广泛地应用于生物学和医学研究的许多领域。在病理学研究中,免疫组化技术的作用和意义更为重要。以肿瘤研究为例,在免疫组化技术出现以前,对肿瘤的诊断和分类还局限于细胞水平,而引入免疫组化技术后,则使 ...

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影响ELISA结果的若干内源性干扰因素

相关专题 内源性干扰因素一般包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体、因使用鼠抗体治疗或诊断诱导的抗鼠Ig抗体、交叉反应物质等。在日常的临床血清(浆)标本中,有相当比例不同程度的含有上述各种干扰物质,从而导致测定结果的假阳性。 1.类风湿因子(rheumatoid factorsRF)在类风湿患者、其他疾病以 ...

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活细胞间接免疫荧光法实验操作方法

相关专题 一.实验器材: 1. 器材:40孔塑料板、40孔板离心机、微量加样器、振荡器、盖玻片、荧光显微镜等。 2. 试剂:单抗隆抗体(单抗)、荧光标记抗鼠免疫球蛋白、PBS(pH7.2-7.4)、甘油、叠氮钠(NaN3)等。 二.方法(微量法) 1. 将分离好的单个核细胞用PBS洗2次,1000rpm每次10分钟。用含0.1% NaN3 ...

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LDH法进行NK细胞活性测定的方法与注意事项

相关专题 一、原理 活细胞的胞浆内含有LDH。正常情况下,LDH不能透过细胞膜,当细胞受到NK细胞的杀伤后,LDH释放到细胞外。LDH 可使乳酸锂脱氢,进而使NAD还原成NADH,后者再经递氢体吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化四氮唑(INT),INT 接受H+被还原成紫红色甲月赞类化合物。在酶标仪上用490nm比色测定。 二、仪器和 ...

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补体介导的细胞毒试验方法与步骤

相关专题 1、实验原理 带有特异抗原的靶细胞(如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞)与相应抗体结合后,在补体的参与下,引起靶细胞膜损伤,导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料(例如:伊红-Y、台盼蓝)可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色,故可用于指示死细胞或濒死细胞,而活细胞不着色。此即补体依赖性细胞毒试验,利用细胞毒试验可以检查细胞膜抗原,亦可 ...

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ELISA实验经验总结

相关专题 ELISA检测系统可谓是免疫学反应应用到科研生产中最为广泛最为灵敏的技术手段。可是在新老手操作过程中总是会出现或大或小的问题,本人在刚开始做ELISA时就面临很多困难,虽然有师兄师姐铺路,但还是常常做得一塌糊涂,比如说花板,假阳性,全显色,全部显色,显色比空白还低。。。。。。自己也为此苦恼过很长一段时间,随着自己技术水平得提高,或 ...

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单克隆抗体制备常见问题及其解决方式

相关专题 一、免疫失败的可能原因及应采取的措施 有时不能获得满意的抗血清,可从下列几方面找原因,并改进之。 1、免疫动物的种属及品系是否合适,可考虑改变动物的种属或品系,或扩大免疫动物的数量。 2、抗原质量是否良好,可改用其它厂家的产品或改用同一厂家的其它批号,也可考虑改变抗原分子的部分结构,或改进提取方法。 3、制备的免疫原是否符合要求, ...

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如何选择二抗

相关专题 二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体,在免疫学反应中,经常需要针对试验选择不同的二抗,艾美捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品。检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,同时在后继试验中也会有不同的检测方案,因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求,一般来说,选择合适的二抗需要从下面几 ...

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包埋前免疫纳米金单重染色与免疫酶染色结合的双重染色基本程

相关专题 免疫纳米金染色与免疫胶体金―银法染色基本相似,也可分为包埋前染色和包埋后染色。下面分别介绍包埋前免疫纳米金单重染色和与免疫酶染色结合的双重染色基本程序: 包埋前免疫,纳米金单重染色按以下步骤进行免疫染色: 1. 含1%正常血清或1%BSA的PBS预孵育20~30分钟; 2. 特异性第一抗体4℃孵育24~48小时后PBS漂洗3次,每 ...

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十年销售经验牛人浅析影响胎牛血清质量的几大因素

相关专题 胎牛血清产品选择指南 市场上的胎牛血清种类繁多,鱼龙混杂,很多科研工作者,特别是刚接触细胞培养的人,难以分辨血清质量的优劣。根据牛人十多年来血清生产销售的经验,总结如下: 一、外观 拿到血清,最先接触的是血清外观,对于缺少细胞培养经验的人来说,外观的判断尤为重要 1、颜色 根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,我国的细 ...

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火箭免疫电泳实验原理、材料及操作步骤

相关专题 一、实验原理 火箭免疫电泳(rocket immunoelectrophoresis,RIEP)是将单向免疫扩散和电泳相结合的一种定量检测技术。电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与捡样中的抗原浓度 ...

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ELISA各环节中常见问题及解决方法

相关专题 ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。现将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给同行带来一些启发,提高试验质量。 下面分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法 一、选择试 ...

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免疫组化技术常见问题解答攻略

相关专题 1、石蜡切片和冰冻切片的比较? (1)要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片,这是今天我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片,可能会破坏组织的抗原性,如果组织的抗原性较稳定,则可作石蜡切片;但是要求做石蜡切片的,可作冰冻切片。 (2)冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性,做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是 ...

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